Кіріспе

Берілген молекуланың массасы дальтондарда. Молекулалық масса (m) – берілген молекуланың массасы. Дальтон (Da) бірлігі жиі қолданылады. Бір қосылыстың әр түрлі молекулалары әр түрлі молекулалық массаға ие болуы мүмкін, себебі олар элементтің әр түрлі изотоптарын қамтиды. Салыстырмалы молекулалық масса – молекула массасының атомдық масса тұрақтысына (бір дальтонға тең) қатынасы, бұл көрсеткіш бірліксіз. Молекулалық масса мен салыстырмалы молекулалық масса молярлық массадан өзгеше, бірақ олармен байланысты. Молярлық масса – белгілі бір заттың массасы, оның мөлшеріне бөлінгенде, грамм/моль (г/моль) арқылы көрсетіледі. Осылайша, молярлық масса – көптеген бөлшектер мен молекулалардың орташа көрсеткіші, ал молекулалық масса – нақты бір бөлшектің немесе молекуланың массасы. Молярлық масса көбінесе заттың макроскопиялық (салмақталатын) мөлшерлерін қарастырғанда қолданылады. Молекулалық салмақ анықтамасы бойынша салыстырмалы молекулалық массамен толық сәйкес келеді; алайда, практикада бұл терминологияны қолдану әртүрлі. Молекулалық салмақ Да бірлігімен берілгенде, ол молярлық массаға ұқсас салмақталған орташа көрсеткіш ретінде беріледі, бірақ бірліктері басқа. Молекулалық биологияда макромолекулалардың массасын олардың молекулалық салмағы деп атайды және оны кДа (kDa) арқылы көрсетеді, бірақ сандық мәні көбінесе шамамен және орташа көрсеткіш болып табылады. "Молекулалық масса", "молекулалық салмақ" және "молярлық масса" терминдері бірлік пен санның дұрыстығы қажет емес жағдайларда жиі алмастырылып қолданылады. Молекулалық масса көбінесе бір немесе нақты молекуланың массасын білдіргенде қолданылады, ал молекулалық салмақ – үлгідегі салмақталған орташа көрсеткішті білдіргенде сирек қолданылады. 2019 жылы СИ (SI) жүйесіндегі негізгі бірліктерді қайта анықтауға дейін, дальтонмен (Da) көрсетілген шамалар сандық жағынан г/моль (g/mol) бірліктерімен көрсетілген молярлық массаға тең болды және осылайша сандық жағынан бір-бірімен алмастырылатын еді. Бірақ 2019 жылғы 20 мамырдағы бірліктерді қайта анықтаудан кейін бұл қатынас тек шамамен тең болып қалды, бірақ айырмашылық практикалық тұрғыдан елеусіз. Кішкентай және орташа өлшемді молекулалардың молекулалық массасы, массалық спектрометрия арқылы өлшенгенде, молекуладағы элементтердің құрамын анықтау үшін қолданылуы мүмкін. Ақуыздар сияқты макромолекулалардың молекулалық массасын да массалық спектрометрия арқылы анықтауға болады; алайда, кристаллографиялық немесе массалық спектрометриялық деректер болмаған жағдайда, молекулалық массаны анықтау үшін тұтқырлық және жарық шашырауына негізделген әдістер де қолданылады.

Есептеу

Молекулалық массалар молекуладағы әрбір нуклидтің атомдық массасынан есептеледі, ал салыстырмалы молекулалық массалар әрбір элементтің стандартты атомдық салмағынан есептеледі. Стандартты атомдық салмақ элементтің берілген үлгідегі изотоптық таралуын ескереді (әдетте «қалыпты» деп есептеледі). Мысалы, судың салыстырмалы молекулалық массасы 18.0153(3), бірақ жеке су молекулаларының молекулалық массасы 18.010 564 6863(15) Да (1H16O) мен 22.027 7364(9) Да (2H18O) аралығында өзгереді. Атомдық және молекулалық массалар әдетте дальтонмен көрсетіледі, ол 12C (көміртек 12) изотопының массасы ретінде анықталған. Қалыптастырылған салыстырмалы атомдық және молекулалық массалар өлшемсіз шамалар болып табылады. Дегенмен, бірыңғай атомдық масса бірлігі (u) атауы әлі де жиі қолданылады. Мысалы, молекулалық формуласы CH4 болатын метанның салыстырмалы молекулалық массасы мен молекулалық массасы келесідей есептеледі:

CH4 салыстырмалы молекулалық массасы

| Стандартты атомдық салмағы | Сан | Жалпы молекулалық салмағы (өлшемсіз) |
|---|---|---|
| C | 1 | |
| H | 4 | |
| CH4 | | |

Молекулалық массасы 12C1H4

| Нуклид массасы | Сан | Жалпы молекулалық массасы (Да немесе u) |
|---|---|---|
| 12C | 12.00 | 1 | 12.00 |
| 1H | 1.007825 | 4 | 4.0313 |
| CH4 | | 16.0313 |

Молекулалық массадағы белгісіздік бүкіл әлемдегі изотоптық құралымның табиғи өзгеруін емес, өлшеудегі қателікті көрсетеді. Жоғары ажыратымдылықтағы массалық спектрометрияда 12C1H4 және 13C1H4 массалық изотоптары шамамен 16.031 Да және 17.035 Да молекулалық массалары бар ерекше молекулалар ретінде байқалады. Массалық спектрометриялық шыңдардың қарқындылығы молекулалық түрдегі изотоптық құралымға пропорционалды. Сондай-ақ, 12C 2H 1H3 молекулалық массасы 17 Да болатын изотоптық түрі де байқалуы мүмкін.

Массалық спектрометрия

Массалық спектрометрияда кіші молекуланың молекулалық массасы көбінесе моноизотоптық масса ретінде беріледі, яғни әрбір элементтің ең көп таралған изотопын ғана қамтитын молекуланың массасы. Бұл молекулалық массадан да сәл өзгеше, себебі изотоптардың таңдауы нақты анықталған, сондықтан көптеген мүмкіндіктердің ішінде тек бір ғана нақты молекулалық масса болып табылады. Моноизотоптық молекулалық массаны есептеу үшін қолданылатын массалар изотоптық массалар тізімінде табылады және олар әдеттегі периодтық кестеде кездеспейді. Көп атомды молекулалар үшін орташа молекулалық масса жиі қолданылады, өйткені көптеген атомдары бар молекулалардың құрамында әр элементтің ең көп таралған изотопы ғана болуы екіталай. Теориялық орташа молекулалық массаны есептеу үшін әдеттегі периодтық кестедегі стандартты атомдық салмақтарды пайдалануға болады, себебі молекуланың құрамындағы изотоптарды көрсететін атомдардың статистикалық таралуы болуы мүмкін. Дегенмен, сынаманың орташа молекулалық массасы көбінесе осы есептелген мәннен айтарлықтай өзгеше болады, өйткені бір ғана сынаманың орташа көрсеткіші, географиялық түрде кеңінен таралған көптеген сынамалардың орташа көрсеткішімен бірдей емес.

Массалық фотометрия

Массалық фотометрия (МФ) – ақуыздардың, липидтердің, қанттардың және нуклеин қышқылдарының молекулалық массасын жеке молекула деңгейінде, жылдам, ерітіндіде және маркерсіз анықтау әдісі. Бұл техника интерферометриялық шашыраңқы жарық микроскопиясына негізделген. Ақуыз ерітіндісі мен шыны слайд арасындағы байланыс нәтижесінде шашыраған жарықтан туындайтын контраст анықталады және ол молекуланың массасына тура пропорционал. Бұл әдіс үлгінің біртектілігін өлшеуге, ақуыздың олигомеризация күйін анықтауға, күрделі макромолекулалық құралымдарды (рибосомалар, GroEL, AAV) сипаттауға, сондай-ақ ақуыз-ақуыз өзара әрекеттесулері сияқты ақуыздық өзара әрекеттесулерді зерттеуге де қабілетті. Массалық фотометрия молекулалық массаны 40 кДа – 5 МДа аралығындағы кең ауқымда жоғары дәлдікпен өлшеуге мүмкіндік береді.

Гидродинамикалық әдістер

Бірінші жуықтау бойынша, Марк-Хоуинк қатынастарына сәйкес молекулалық массаны анықтаудың негізі – макромолекулалардың ерітінділерінің (немесе суспензияларының) ішкі тұтқырлығы белгілі бір еріткіштегі дисперстік бөлшектердің көлемдік үлесіне тәуелділігі болып табылады. Атап айтқанда, молекулалық массаға қатысты гидродинамикалық мөлшері белгілі бір молекуланың пішінін сипаттайтын түрлендіру коэффициентіне байланысты. Бұл гидродинамикалық әсерлерге сезімтал әдістер арқылы анықталатын көрінетін молекулалық массаны анықтауға мүмкіндік береді, оларға DLS, SEC (элюент органикалық еріткіш болған жағдайда GPC деп те аталады), вискозиметрия және диффузиялық реттелген ядролық магниттік резонанс спектроскопиясы (DOSY) жатады. Көрінетін гидродинамикалық мөлшерін макромолекулаға тән стандарттар тізбегін қолдана отырып, молекулалық массаны жуықтау үшін пайдалануға болады. Бұл калибрлеуді талап ететіндіктен, бұл әдіс жиі "салыстырмалы" молекулалық массаны анықтау ретінде сипатталады.

Статикалық жарық шашырау

Сондай-ақ, абсолютті молекулалық массаны тікелей жарық шашырауы арқылы, дәстүрлі түрде Зимм әдісін пайдалану арқылы анықтауға болады. Бұл классикалық статикалық жарық шашырауы немесе көп бұрышты жарық шашырау детекторы арқылы іске асырылуы мүмкін. Осы әдіспен анықталған молекулалық массаларды калибрлеудің қажеті жоқ, сондықтан олар "абсолютті" деп аталады. Қажетті жалғыз сыртқы өлшем – жарық сыну индексінің өсуі, ол концентрацияға байланысты жарық сыну индексінің өзгеруін көрсетеді.