Кіріспе

Ақуыз емес химиялық қосылыс немесе металл ионы

Кофактор – ферменттің катализатор ретінде атқаратын рөлі үшін қажетті ақуыз емес химиялық қосылыс немесе металл ионы. Кофакторларды биохимиялық трансформацияларға көмектесетін «көмекші молекулалар» деп қарастыруға болады. Бұл процестердің жылдамдығы фермент кинетикасы деп аталатын зерттеу саласында сипатталады. Кофакторлар лигандтардан ерекшеленеді, өйткені олар өз функцияларын көбінесе байланысқан күйде орындайды. Кофакторларды екі түрге бөлуге болады: бейорганикалық иондар және коферменттер деп аталатын күрделі органикалық молекулалар. Коферменттер негізінен витаминдер мен басқа да органикалық қажетті қоректік заттардан шағын мөлшерде алынады. (Кейбір ғалымдар «кофактор» терминін бейорганикалық заттар үшін қолдануды шектейді; екі түрі де осы жерде қамтылған.) Коферменттер тағы да екі түрге бөлінеді. Біріншісі – «протездік топ», ол белокпен тығыз (немесе тіпті ковалентті) және тұрақты байланысқан коферменттен тұрады. Коферменттердің екінші түрі – «косубстраттар», және олар ақуызға уақытша байланысады. Косубстраттар белгілі бір уақытта ақуыздан босатылуы мүмкін, содан кейін қайта байланысуы мүмкін. Протездік топтар мен косубстраттардың бірдей функциясы бар, ол – ферменттер мен белоктардың реакциясын жеңілдету. Кофакторсыз белсенді емес фермент апофермент деп аталады, ал кофакторлы толық фермент – голофермент деп аталады. (Халықаралық таза және қолданбалы химия одағы (IUPAC) «коферментті» сәл басқаша анықтайды, атап айтқанда, төмен молекулалық салмақты, ақуыз емес органикалық қосылыс ретінде, ол ферменттік реакцияларға химиялық топтардың немесе электрондардың ажыратылатын тасымалдаушысы ретінде еркін қатысады; протездік топ – әрбір ферменттік айналымда қайта жаңартылатын белоктағы тығыз байланысқан, полипептид емес бірлік ретінде анықталады.) Кейбір ферменттер немесе фермент кешендері бірнеше кофакторды қажет етеді. Мысалы, гликолиз бен лимон қышқылы циклының тоғысындағы мультифермент кешені – пируват дегидрогеназаға бес органикалық кофактор және бір металл ионы қажет: бос байланысқан тиамин пирофосфаты (TPP), ковалентті байланысқан липоамид және флавин аденоин динуклеотиді (FAD), косубстраттар никотинамид аденоин динуклеотиді (NAD+) және кофермент А (CoA), және металл ионы (Mg2+). Органикалық кофакторлар көбінесе витаминдер немесе витаминдерден жасалады. Көптегендер құрамының бір бөлігі ретінде нуклеотид аденозин монофосфатын (АМФ) қамтиды, мысалы, АТФ, А коферменті, FAD және NAD+. Бұл ортақ құрылым ежелгі РНК әлеміндегі рибозимдер құрамындағы ортақ эволюциялық текті көрсетеді. Молекуланың АМФ бөлігін фермент коферментін әртүрлі каталитикалық орталықтар арасында ауыстыру үшін «ұстап алатын» «тұтқа» түрінде қарастыруға болады деп ұсынылған.

Темір-көкөрт шоғырлары

Темір-көкөрт кластерлері – цистеинил қалдықтарымен ақуыздардың ішінде бекітілген темір және күкірт атомдарының кешендері. Олар құрылымдық және функционалдық рөлдерді атқарады, оның ішінде электрондық тасымалдау, тотығу-тотықсыздану сезімталдығы және құрылымдық модульдер ретінде.

Органикалық

Органикалық кофакторлар – ферментке бос немесе тығыз байланысып, реакцияға тікелей қатысатын шағын органикалық молекулалар (әдетте молекулалық массасы 1000 Да-дан кем). Егер ферментті денатурацияламай алып тастау қиын болса, онда оны протездік топ деп атауға болады. Бос және тығыз байланысқан кофакторлардың арасында нақты шекара жоқ екенін атап өту маңызды. Мысалы, флавин аденоин динуклеотиді (FAD), биотин және липоамид сияқты басқа коэнзимдер тығыз байланысады. Тығыз байланысқан кофакторлар, әдетте, бір реакция циклында қайта жаңартылады, ал бос байланысқан кофакторлар басқа фермент катализдеуімен жүзеге асырылатын келесі реакцияда қайта жаңартылуы мүмкін. Мұндай жағдайда кофакторды субстрат немесе қосалқы субстрат деп қарастыруға да болады. Витаминдер көптеген органикалық кофакторлардың (мысалы, B1, B2, B6, B12, ниацин, фолий қышқылы) прекурсорлары ретінде немесе коэнзимдердің өзі ретінде (мысалы, C витамині) қызмет ете алады. Дегенмен, витаминдердің организмде басқа да функциялары бар. Көптеген органикалық кофакторлар құрамында нуклеотидтер де болады, мысалы, электрон тасымалдаушылар NAD және FAD, сондай-ақ ацил топтарын тасымалдайтын кофермент А. Бұл кофакторлардың көпшілігі түрлердің кең ауқымында кездеседі, ал кейбіреулері тіршілік әр түріне тән. Бұл кең таралудан ерекшелік – метаногендерде пайда болған ерекше кофакторлар тобы, олар осы археялар тобымен ғана шектеледі.

Метаболистік аралық заттар ретінде кофакторлар

Метаболизм химиялық реакциялардың кең ауқымын қамтиды, бірақ көпшілігі функционалдық топтарды ауыстыруға қатысты негізгі реакциялардың бірнеше түріне жатады. Бұл ортақ химия жасушаларға химиялық топтарды әртүрлі реакциялар арасында тасымалдау үшін метаболикалық аралық заттардың шағын жиынтығын пайдалануға мүмкіндік береді. Бұл топтық трансферлік аралық заттар – әлсіз байланысқан органикалық кофакторлар, көбінесе коэнзимдер деп аталады. Топтық трансфер реакциясының әрбір класын оны өндіретін ферменттер жиынтығы және оны тұтынатын ферменттер жиынтығының субстраты болып табылатын белгілі бір кофактор жүзеге асырады. Мысалы, никотинамид аденин динуклеотидін (NAD+) кофактор ретінде пайдаланатын дегидрогеназалар. Мұнда жүздеген түрлі ферменттер өздерінің субстраттарынан электрондарды алып тастап, NAD+-ды NADH-қа дейін тотықтырады. Бұл тотыққан кофактор клеткадағы кез келген редуктазаның субстраты болып табылады, ол өз субстраттарын тотықтыру үшін электрондарды қажет етеді. Сондықтан, бұл кофакторлар метаболизмнің бір бөлігі ретінде үнемі қайта пайдаланылады. Мысалы, адам организміндегі АТФ-тың жалпы мөлшері шамамен 0,1 моль құрайды. Бұл АТФ үнемі АДФ-қа ыдырайды, содан кейін АТФ-қа қайта айналады. Осылайша, кез келген уақытта АТФ + АДФ-тың жалпы мөлшері салыстырмалы түрде тұрақты болып қалады. Адам жасушаларының жұмысы үшін күн сайын 100-150 моль АТФ гидролизі қажет, бұл шамамен 50-75 кг-ға тең. Көбінесе адамдар күні бойы өз дене салмағына тең АТФ-ты пайдаланады. Бұл әр АТФ молекуласы күніне 1000-1500 рет қайта пайдаланылады дегенді білдіреді.

Эволюция

АТФ және НАДҚ сияқты органикалық кофакторлар барлық белгілі тіршілік нысандарында кездеседі және метаболизмнің негізгі бөлігін құрайды. Мұндай әмбебап сақталу осы молекулалардың тірі организмдердің дамуының өте ерте кезеңінде пайда болғанын көрсетеді. Сондықтан, қазіргі кофакторлардың кем дегенде бірі 4 миллиард жыл бұрын өмір сүрген соңғы ортақ ата-тектің құрамында болған болуы мүмкін. Органикалық кофакторлар тіршіліктің Жердегі тарихының тіпті ертерек кезеңінде де болған болуы мүмкін. Аденозин нуклеотиді метил, ацил және фосфорил топтарын беру, сондай-ақ тотығу-тотықсыздану реакциялары сияқты көптеген негізгі метаболикалық реакцияларды катализдейтін кофакторларда кездеседі. Осылайша, бұл кең таралған химиялық құрылым РНК әлемінің қалдығы болуы мүмкін, ал ертедегі рибозимдер нуклеотидтер мен олармен байланысты қосылыстардың шектеулі жиынтығын байланыстыруға бейімделген. Аденозинге негізделген кофакторлар ферменттер мен рибозимдерге жаңа кофакторларды байланыстыруға мүмкіндік беретін, өзара алмасатын адаптерлер ретінде әрекет еткен деп саналады, бұл бастапқыда басқа кофакторды байланыстыру үшін дамыған аденозин байланысу домендерінде шағын өзгерістер арқылы жүзеге асырылды. Алдын ала дамыған құрылымды жаңа қолдану үшін бейімдеу процесі экзаптация деп аталады. IPRO деп аталатын есептеу әдісі жақында Candida boidinii ксилоза редуктазасының кофактор спецификасын NADPH-тан NADH-қа ауыстыратын мутацияларды болжады.

Тарих

Бірінші органикалық кофактор NAD+ болды, оны 1906 жылы Артур Харден мен Уильям Янг анықтады. Олар қайнатылған және сүзгіленген ашытқы экстрактісін қосу арқылы, қайнатылмаған ашытқы экстрактісінде алкогольді ашыту процесін қатты жеделдеткенін байқады. Олар осы әсерге жауапты белгісіз факторды кофермент деп атады. Ашытқыдан алынған қоспаларды ұзақ және қиын тазарту арқылы осы жылуға төзімді факторды Ханс фон Эйлер Челпин нуклеотидтік қант фосфаты ретінде анықтады. 20 ғасырдың басында басқа кофакторлар да анықталды, 1929 жылы Карл Ломан АТФ-ты бөліп алды, ал 1945 жылы Фриц Альберт Липман А коферментін тапты. Бұл молекулалардың функциялары бастапқыда түсініксіз болған, бірақ 1936 жылы Отто Генрих Варбург NAD+ гидридті тасымалдаудағы рөлін анықтады. Осы жаңалық 1940 жылдардың басында Герман Калкардың жұмысымен жалғасты, ол қанттардың тотығуы мен АТФ генерациясы арасындағы байланысты орнатты. Бұл Фриц Альберт Липманның 1941 жылы ұсынған энергия тасымалындағы АТФ-ның орталық ролін растады. Кейін, 1949 жылы Моррис Фридкин мен Альберт Л. Ленингер NAD+ лимон қышқылы циклы және АТФ синтезі сияқты метаболикалық жолдарды байланыстыратынын дәлелдеді.

Белоктан алынған кофакторлар

Бірқатар ферменттерде кофактор ретінде әрекет ететін бөлік ақуыз тізбесінің бір бөлігін трансляциядан кейінгі модификациялау арқылы қалыптасады. Бұл көбінесе ақуыз функциясы үшін металл ионы сияқты сыртқы байланыстырушы фактордың қажеттілігін жояды. Мүмкін болатын модификациялар – ароматты қалдықтардың тотығуы, қалдықтар арасындағы байланыс, тізбек үзілуі немесе цикл құрылуы мүмкін. Бұл өзгерістер фосфорилдану, метилирлеу немесе гликозилдеу сияқты басқа ақуыздық посттрансляциялық модификациялардан ерекшеленеді, себебі аминқышқылдары әдетте жаңа функцияларды иеленеді. Бұл ақуыздың функционалдығын арттырады; өзгертілмеген аминқышқылдары көбінесе қышқыл-негіздік реакциялармен шектеледі, ал қалдықтардың өзгеруі ақуызға электрофильді орындарды немесе еркін радикалдарды тұрақтандыру қабілетін сыйлайды. Сонымен қатар, Ala Ser Gly мотивінен туындаған 4 метилиденимидазол 5-он (MIO) да бар. Ақуыздан алынған кофакторларды сипаттау рентгендік кристаллография және массалық спектроскопия көмегімен жүзеге асырылады; құрылымдық деректер қажет, өйткені аминқышқыл тізбегін анықтау өзгертілген орындарды оңай анықтамайды.

Энзимдік емес кофакторлар

Бұл термин биологияның басқа салаларында ақуыз емес (немесе тіпті ақуызды) молекулаларды, олар ақуыздың жұмыс істеуі үшін белсендіретін, тежейтін немесе қажетті жасайтын молекулаларды атау үшін кеңінен қолданылады. Мысалы, рецепторлы ақуыздарға байланысып, оларды белсендіретін гормондар сияқты лигандтар кофакторлар немесе коактиваторлар деп аталады, ал рецепторлы ақуыздарды тежейтін молекулалар – корпрессорлар деп аталады. Мұндай мысалдың бірі – сезімдік нейрондарда жиі кездесетін G белоктерімен жұптасқан рецепторлар отбасысы. Лигандтар рецепторларға байланысқанда G белгісін белсендіреді, ол өз кезегінде эффекторды белсендіру үшін ферментті белсендіреді. Шатасуды болдырмау үшін, лиганд байланысы арқылы белсендірілетін немесе басуға қабілетті мұндай ақуыздарды коррегуляторлар деп атау ұсынылған.