Введение

Бромфеноловый синий (3′,3″,5′,5″-тетрабромфенолсульфонфталеин, BPB), альбутест, используется как индикатор pH, электрофоретический краситель-маркер и краситель. Его можно получить, медленно добавляя избыток брома к горячему раствору фенолсульфонфталеина в ледяной уксусной кислоте.

Показатель кислотно-основного соединения

В качестве кислотно-основного индикатора его эффективный диапазон лежит между pH 3,0 и 4,6. Он изменяет цвет от жёлтого при pH 3,0 до синего при pH 4,6; эта реакция обратима. Бромфеноловый синий структурно связан с фенолфталеином (широко используемым индикатором).

Цветная маркировка

Бромофенол также используется в качестве цветового индикатора для контроля процесса электрофореза в агарозном и полиакриламидном гелях. Поскольку бромфенол-синий несет небольшой отрицательный заряд при умеренном pH, он мигрирует в том же направлении, что и ДНК или белок в геле; скорость его миграции варьируется в зависимости от плотности геля и состава буфера, но в типичном 1% агарозном геле в 1X буфере TAE или TBE бромфенол-синий мигрирует с той же скоростью, что и фрагмент ДНК размером около 300 пар оснований, а в 2% агарозном геле – 150 пар оснований. Ксиленовый цианол и оранжевый G также могут использоваться для этой цели.

Краска

Бромфеноловый синий также используется в качестве красителя. При нейтральном pH краситель наиболее сильно поглощает красный свет и пропускает синий. (Пик поглощения составляет 590 нм при щелочном pH 12.) Поэтому растворы этого красителя имеют синий цвет. При низком pH краситель наиболее сильно поглощает ультрафиолетовый и синий свет и выглядит желтым в растворе. В растворе при pH 3,6 (в середине диапазона перехода для этого индикатора pH), полученном путем растворения в воде без регулирования pH, бромфеноловый синий имеет характерный зелено-красный цвет, при этом наблюдаемый цвет смещается в зависимости от концентрации и/или длины оптического пути. Это явление называется дихроматизмом цвета. Бромфеноловый синий – вещество с наивысшим известным значением индекса дихроматичности Крэфта. Это означает, что он демонстрирует наибольшее изменение цветового тона при изменении толщины или концентрации наблюдаемого образца.