Сравнивайте с английским: нажмите на абзац — оригинал откроется в окне. Кнопка EN под абзацем показывает его прямо в тексте.
Содержание
Введение
Биологический краситель, используемый для окрашивания тканей.
Biological stain used for staining of tissues
Гематоксилин фосфовольфрамовой кислоты (PTAH) – это смесь гематоксилина с фосфовольфрамовой кислотой, применяемая в гистологии для окрашивания. Он окрашивает некоторые ткани в контрастные цвета, подобно гематоксилину и эозину, поскольку фосфовольфрамовая кислота связывается с белками тканей. Используется для выявления глиоза в центральной нервной системе, опухолей скелетных мышц и отложений фибрина в поражениях. Мышечная ткань окрашивается в синий, от черного до темно-коричневого цвета, соединительная ткань – от бледно-оранжевого до коричнево-красного, фибрин и нейроглия – в темно-синий цвет, грубые эластические волокна выглядят фиолетовыми, а кости и хрящи приобретают желтовато-коричневый оттенок. PTAH идеально подходит для демонстрации поперечно-полосатых мышечных волокон и митохондрий, часто без применения контркрасителя. Благодаря этому он используется для идентификации сократительных полос, наблюдаемых при некрозе сократительных полос. PTAH может быть полезен при диагностике онкоцитом и инфантильной дигитальной фибромы. PTAH окрашивает эпендимомы, но не окрашивает папилломы хориоидного сплетения, что позволяет дифференцировать эти опухоли. Данная методика в значительной степени заменена методами иммуногистохимии.
Phosphotungstic acid haematoxylin (PTAH) is a mix of haematoxylin with phosphotungstic acid, used in histology for staining. It stains some tissue in contrasting colors in a way similar to haematoxylin and eosin stain, as phosphotungstic acid binds to tissue proteins. It is used to show gliosis in the central nervous system, tumours of skeletal muscles, and fibrin deposits in lesions. Muscle is stained blue black to dark brown, connective tissue is pale orange pink to brownish red, fibrin and neuroglia stain deep blue, coarse elastic fibers show as purple, and bone and cartilage obtain yellowish to brownish red color. PTAH is ideal for demonstrating striated muscle fibers and mitochondria, often without a counterstain. As such, it is used to identify contraction bands, as seen in contraction band necrosis. PTAH can be helpful in diagnosing oncocytomas, infantile digital fibromas. PTAH stains ependymomas while it does not stain choroid plexus papillomas, providing one means of differentiating these tumors. This technique has been largely replaced by immunohistochemistry techniques.
Принцип окрашивания
В растворе фосфотунгоновой кислоты значительно больше, чем гематоина. Фосфотунговая кислота связывает весь доступный гематеин, образуя синий лаковый пигмент. Этот пигмент окрашивает поперечные полосы мышц, фибрин, ядра и другие структурные элементы тканей в синий цвет. Оставшаяся фосфотунговая кислота окрашивает красно-коричневые компоненты, такие как коллаген.
There is much more phosphotungstic acid in the solution than hematein. The phosphotungstic acid binds all of the available hematein to form a blue lake pigment. This lake stains the muscle cross striations, fibrin, nuclei, and other tissue elements blue. The rest of the phosphotungstic acid stains the red brown components, such as collagen.
Замечания по процедуре
Предпочтительно использовать фиксатор Зенкера, хотя можно использовать ткань, фиксированную формалином. В этом случае ткань следует подвергнуть мордированию в растворе Зенкера перед окрашиванием. Большинство источников рекомендуют мордирование в фиксаторе Зенкера в течение ночи при комнатной температуре, но это можно сделать за 3,5 часа в духовке при температуре от 56 до 60 градусов Цельсия. Потребуются раствор PTAH, раствор йода по Граму, 5% раствор тиосульфата натрия, 0,25% раствор перманганата калия и 5% раствор щавелевой кислоты. После окрашивания препараты следует быстро обезвоживать, так как красно-коричневые компоненты теряют цвет при контакте с водой или спиртом.
Zenker fixative is preferred, although formalin fixed tissue can be used. If this is the case, the tissue should be mordanted in Zenkers solution before staining. Most texts recommend mordanting in Zenker fixative overnight at room temperature, but it can be done for 3.5 hours in a 56 to 60 degrees Celsius oven. PTAH solution, Gram Iodine, 5% sodium thiosulfate, 0.25% Potassium Permanganate, and 5% Oxalic Acid solution are needed. After staining, slides should be dehydrated quickly because the red brown components lose their color when exposed to water or alcohol.