Зенкерлік ерітіндісі: құрамы, қолданылуы және қауіпсіздік шаралары
Zenker's fixative
Жанкер бекіткіші – жануар тіндерін зерттеуге арналған жылдам әдіс. Ядро, дәнекер тіндерін жақсы сақтайды, бірақ митохондрияны сақтауда Helly бекіткіші артық.
Ағылшыншамен салыстырыңыз: абзацты басыңыз — түпнұсқа терезеде ашылады. Абзац астындағы EN түймесі оны мәтін ішінде көрсетеді.
Мазмұны
Кіріспе
Зенкер фиксаторы – жануарлар тіндерін жылдам бекітуге қолданылатын фиксатор. Ол жануарлар немесе өсімдіктер тіндерінің үлгілерін микроскоптық зерттеу үшін дайындауға пайдаланылады. Ядролық хроматин, байланыстырғыш тіндердің талшықтары және кейбір цитоплазмалық ерекшеліктерді өте жақсы бекітеді, бірақ митохондрия сияқты нәзік цитоплазмалық органеллаларды сақтамайды. Митохондрияларды дәстүрлі бояу үшін Хелли фиксаторы қолайлырақ. Зенкер фиксаторы плазмалық мембрананы өткізгіш етеді, бірақ ядролық мембрананы өткізбейді. Сондықтан, митоздық жасушаларды (ядролық мембранасы еріген жерлерде) хроматинге қарсы антиденелермен таңдап бояуға болады. Зенкер фиксаторының құрамында сынап хлориді ("қоқыс қоздырғыш"), калий дихроматы, натрий сульфаты, су және сірке қышқылы болады. Сынап хлориді немесе калий дихроматы бар фиксаторлар уытты, сондықтан оларды қауіпті қалдық ретінде жою қымбатқа түседі. Сынап хлоридін сол салмақтағы, аз уытты мырыш хлоридімен алмастыруға болады, бірақ нәтижесінде алынған "мырыш Зенкер" бастапқы қоспамен салыстырғанда бекітудің сапасы төмен болуы мүмкін. Бұл фиксатор 1894 жылы қайтыс болған неміс гистологы Конрад Зенкердің құрметіне аталған (Бейкер 1958).
Zenker's fixative is a rapid acting fixative for animal tissues. It is employed to prepare specimens of animal or vegetable tissues for microscopic study. It provides excellent fixation of nuclear chromatin, connective tissue fibers and some cytoplasmic features, but does not preserve delicate cytoplasmic organelles such as mitochondria. Helly's fixative is preferable for traditional dye staining of mitochondria. Zenker's fixative permeabilises the plasma, but not the nuclear membrane. It can therefore be used to selectively stain mitotic cells (where the nuclear membrane has dissolved) with antibodies against chromatin
Zenker's fixative contains mercuric chloride ("corrosive sublimate"), potassium dichromate, sodium sulfate, water, and acetic acid. Fixatives containing mercuric chloride or potassium dichromate are toxic, making disposal as hazardous waste costly. Mercuric chloride can be replaced with the same weight of less toxic zinc chloride, but the resulting "zinc Zenker" may not give the same quality of fixation as the original mixture. This fixative is named after Konrad Zenker, a German histologist, who died in 1894 (Baker 1958).
Қорғау ерітіндісі
Zenker әдетте 50 г сынап хлориді, 25 г калий дихроматы, 10 г натрий сульфаты (декагидрат) және дистилленген сумен 1000 мл-ге дейін толықтырылады. Қолдану алдында 100 мл ерітіндіге 5 мл мұздық сірке қышқылы қосылады. Бастапқы ерітінді де, дайын Zenker фиксаторы да көп жылдар бойы сақталады.
Zenker is usually made with 50g of mercuric chloride, 25g of potassium dichromate, 10g of sodium sulfate (decahydrate) and distilled water to complete 1000 ml. Before use, 5 ml glacial acetic acid is added to 100 ml of the solution. Both the stock solution and the complete Zenker fixative are stable for many years.
Хеллидің фиксациясы
Егер мұздық сірке қышқылы 5 мл формалинмен (37–40% формальдегид) ауыстырылса, нәтижесінде Хелли фиксаторы алынады, ол кейде "formol Zenker" деп те аталады. Хелли фиксаторы бірнеше сағатқа ғана тұрақты болады, себебі формальдегид және дихромат компоненттері реакцияға түсіп, құмырсқа қышқылы мен хром(III) иондарын түзетіндіктен; апельсин түсті ерітінді жасыл түске өтеді.
If the glacial acetic acid is replaced by 5 ml of formalin (37–40% formaldehyde), the resulting solution is Helly's fixative, also sometimes called "formol Zenker". Helly is stable for only a few hours because the formaldehyde and dichromate components react, producing formic acid and chromium(III) ions; the orange solution becomes greenish.