Фиксация Зенкера: состав, применение и особенности
Zenker's fixative
Фиксатив Ценкера: быстрое фиксирование тканей для микроскопии. Отлично сохраняет ядра и соединительную ткань, но не митохондрии. Сравнение с фиксативом Хелли.
Сравнивайте с английским: нажмите на абзац — оригинал откроется в окне. Кнопка EN под абзацем показывает его прямо в тексте.
Содержание
Введение
Фиксатор Зенкера – быстродействующий фиксатор для тканей животных. Он применяется для подготовки образцов тканей животных или растений к микроскопическому исследованию. Он обеспечивает отличную фиксацию ядерного хроматина, волокон соединительной ткани и некоторых цитоплазматических структур, но не сохраняет деликатные цитоплазматические органеллы, такие как митохондрии. Фиксатор Хелли предпочтительнее для традиционного окрашивания митохондрий. Фиксатор Зенкера повышает проницаемость плазматической, но не ядерной мембраны. Поэтому его можно использовать для селективного окрашивания митотических клеток (где ядерная мембрана разрушена) антителами к хроматину.
Zenker's fixative is a rapid acting fixative for animal tissues. It is employed to prepare specimens of animal or vegetable tissues for microscopic study. It provides excellent fixation of nuclear chromatin, connective tissue fibers and some cytoplasmic features, but does not preserve delicate cytoplasmic organelles such as mitochondria. Helly's fixative is preferable for traditional dye staining of mitochondria. Zenker's fixative permeabilises the plasma, but not the nuclear membrane. It can therefore be used to selectively stain mitotic cells (where the nuclear membrane has dissolved) with antibodies against chromatin
Фиксатор Зенкера содержит хлорид ртути ("коррозионный сублимат"), дихромат калия, сульфат натрия, воду и уксусную кислоту. Фиксаторы, содержащие хлорид ртути или дихромат калия, токсичны, что делает их утилизацию как опасных отходов дорогостоящей. Хлорид ртути можно заменить тем же весом менее токсичного хлорида цинка, но полученный "цинковый Зенкер" может не обеспечивать такого же качества фиксации, как исходная смесь. Этот фиксатор назван в честь Конрада Зенкера, немецкого гистолога, умершего в 1894 году (Бейкер 1958).
Zenker's fixative contains mercuric chloride ("corrosive sublimate"), potassium dichromate, sodium sulfate, water, and acetic acid. Fixatives containing mercuric chloride or potassium dichromate are toxic, making disposal as hazardous waste costly. Mercuric chloride can be replaced with the same weight of less toxic zinc chloride, but the resulting "zinc Zenker" may not give the same quality of fixation as the original mixture. This fixative is named after Konrad Zenker, a German histologist, who died in 1894 (Baker 1958).
Запасной раствор
Zenker обычно изготавливается из 50 г хлорида ртути, 25 г дихромата калия, 10 г сульфата натрия (декагидрата) и дистиллированной воды до объема 1000 мл. Перед использованием к 100 мл раствора добавляют 5 мл ледяной уксусной кислоты. И исходный раствор, и готовый фиксатор Ценкера стабильны в течение многих лет.
Zenker is usually made with 50g of mercuric chloride, 25g of potassium dichromate, 10g of sodium sulfate (decahydrate) and distilled water to complete 1000 ml. Before use, 5 ml glacial acetic acid is added to 100 ml of the solution. Both the stock solution and the complete Zenker fixative are stable for many years.
Хелли - фиксатор.
Если ледяную уксусную кислоту заменить 5 мл формалина (37–40% формальдегида), полученный раствор является фиксатором Хелли, который также иногда называют "формаль-Зенкер". Фиксатор Хелли стабилен лишь несколько часов, поскольку формальдегид и дихромат вступают в реакцию, образуя муравьиную кислоту и ионы хрома(III); оранжевый раствор становится зеленоватым.
If the glacial acetic acid is replaced by 5 ml of formalin (37–40% formaldehyde), the resulting solution is Helly's fixative, also sometimes called "formol Zenker". Helly is stable for only a few hours because the formaldehyde and dichromate components react, producing formic acid and chromium(III) ions; the orange solution becomes greenish.