3,3'-Диаминобензидин (DAB) – полибензимидазол өндірісіндегі маңызды қосылыс. Иммуногистохимияда, нуклеин қышқылы мен ақуызды бояуда қолданылады. Химиялық тұрақтылығы жоғары.
Ағылшыншамен салыстырыңыз: абзацты басыңыз — түпнұсқа терезеде ашылады. Абзац астындағы EN түймесі оны мәтін ішінде көрсетеді.
Мазмұны
Кіріспе
3,3′-диаминобензидин (DAB) — формуласы (C6H3(NH2)2)2 болатын органикалық қосылыс. Бұл бензидин туындысы полибензимидазолдың алдындағы заттары болып табылады, ол химиялық және жылулық тұрақтылығымен әйгітлі талшықтарды құрайды. Суда еритін тетрагидрохлорид түрінде DAB нуклеин қышқылдары мен ақуыздарды иммуногистохимиялық бояу үшін қолданылады.
3,3′ Diaminobenzidine (DAB) is an organic compound with the formula (C6H3(NH2)2)2. This derivative of benzidine is a precursor to polybenzimidazole, which forms fibers that are renowned for their chemical and thermal stability. As its water soluble tetrahydrochloride, DAB has been used in immunohistochemical staining of nucleic acids and proteins.
Құрылымы
DAB екі сақиналық құрылымның орталық көміртегі байланысы бойынша симметриялы. Кристалда әр молекуланың сақиналары бір жазықтықта болады, ал амин топтары молекулаларды байланыстырып, молекулааралық үш өлшемді сутекті байланыстар желісін қалыптастырады.
DAB is symmetric about the central carbon bond between both ring structures. In the crystal, the rings of each molecule are co planar and the amine units connect molecules to form an intermolecular 3 dimensional hydrogen bond network.
Дайындық
Диаминобензидин, коммерциялық түрде қолжетімді, 3,3'-дихлорбензидинді аммиакпен, мыс катализаторының қатысуымен жоғары температура мен қысымда өңдеу арқылы, одан кейін қышқылмен өңдеу арқылы дайындалады. Басқа синтез жолы бензидинді негіздік жағдайда сірке қышқылы ангидридімен диацилдеуді қамтиды: DAB-тың суда ерігіштігі, басқа уытты еріткіштерді пайдаланатын анықтау ерітінділерімен салыстырғанда, бейімделуге мүмкіндік береді. Дұрыс дайындалмаған тіндік үлгілер жалған оң нәтижелерді көрсетуі мүмкін. Зерттеулерде бұл реакция сутек пероксидаза ферментімен дайындалған жасушаларды бояу үшін, иммуноцитохимияның стандартты протоколдары бойынша қолданылады. Альцгеймер ауруына қатысты, Aβ белок амилоидты плактары біріншілік антиденемен, содан кейін пероксидаза ферментімен байланыстырылған екіншілік антиденемен белгіленеді. Бұл DAB-ты субстрат ретінде байланыстырып, тотықтырады, нәтижесінде оңай көрінетін қоңыр түс пайда болады. Плактарды одан әрі бағалау үшін сандық түрде анықтауға болады. Тағы бір әдіс инъекцияланған биоцитиннің авидинмен немесе стрептавидинмен, биотинмен, содан кейін пероксидазамен құрамына енгізілген кешендерін пайдаланады.
Diaminobenzidine, which is commercially available, is prepared by treating 3,3′ dichlorobenzidine with ammonia with a copper catalyst at high temperature and pressure, followed by acidic workup. An alternate synthesis route involves the diacylation of benzidine with acetic anhydride under basic conditions: The solubility of DAB in water allows for adaptability compared to other detection solutions which use toxic solvents. Improperly prepared tissue samples may give false positives. In research, this reaction is used to stain cells that were prepared with hydrogen peroxidase enzyme, following common immunocytochemistry protocols. Relevant to Alzheimer's disease, Aβ protein amyloid plaques are targeted by a primary antibody, and subsequently by a secondary antibody, which is conjugated with a peroxidase enzyme. This will bind DAB as a substrate and oxidize it, producing an easily observable brown color. Plaques can then be quantified for further evaluation. One other method uses complexes of injected biocytin with avidin or streptavidin, biotin, and then peroxidase.