Ағылшыншамен салыстырыңыз: абзацты басыңыз — түпнұсқа терезеде ашылады. Абзац астындағы EN түймесі оны мәтін ішінде көрсетеді.
Кіріспе
Биохимияда ABTS (2,2'-азинобис(3-этилбензотиазолин-6-сульфоқышқылы)) – белгілі бір ферменттердің реакциялық кинетикасын бақылауға қолданылатын химиялық қосылыс. Оның кең таралған қолданылуы – ферменттермен байланысты иммуносорбенттік талдау (ELISA), молекулалардың бір-бірімен байланысуын анықтау үшін. Ол көбінесе пероксидаза ферментімен (мысалы, хрендік пероксидазамен) сутек пероксидімен бірге субстрат ретінде немесе көк мультиметалл оксидаза ферменттерімен (мысалы, лакказа немесе билирубин оксидазасымен) жеке қолданылады. Оны қолдану пероксидазалардың реакциялық кинетикасын тікелей бақылауға мүмкіндік береді. Осылайша, ол кез келген сутек пероксидін өндіретін ферменттің реакциялық кинетикасын жанама түрде бақылауға немесе үлгідегі сутек пероксидінің мөлшерін анықтауға да пайдаланылуы мүмкін. ABTS үшін формальды тотығу-тотығу потенциалы (редукция потенциалы) молекулалық оттегі және сутек пероксиді сияқты оксо түрлерін, әсіресе биологиялық катализде кездесетін төмен pH мәндерінде, электрон доноры ретінде әрекет етуі үшін жеткілікті. Бұл жағдайда сульфонат топтары толық депротонды болады және медиатор дианион түрінде болады. ABTS–· + e– → ABTS2– E° = 0.67 В vs SHE
ABTS + e– → ABTS–· E° = 1.08 В vs SHE
In biochemistry, ABTS (2,2' azino bis(3 ethylbenzothiazoline 6 sulfonic acid)) is a chemical compound used to observe the reaction kinetics of specific enzymes. A common use for it is in the enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) to detect the binding of molecules to each other. It is commonly used as a substrate with hydrogen peroxide for a peroxidase enzyme (such as horseradish peroxidase) or alone with blue multicopper oxidase enzymes (such as laccase or bilirubin oxidase). Its use allows the reaction kinetics of peroxidases themselves to be followed. In this way it also can be used to indirectly follow the reaction kinetics of any hydrogen peroxide producing enzyme, or to simply quantify the amount of hydrogen peroxide in a sample. The formal reduction potentials for ABTS are high enough for it to act as an electron donor for the reduction of oxo species such as molecular oxygen and hydrogen peroxide, particularly at the less extreme pH values encountered in biological catalysis. Under these conditions, the sulfonate groups are fully deprotonated and the mediator exists as a dianion. ABTS–· + e– → ABTS2– E° = 0.67 V vs SHE
ABTS + e– → ABTS–· E° = 1.08 V vs SHE
Бұл қосылыс фермент сутек пероксидімен реакцияны жеңілдетіп, оны жасыл және ерігіш түпкі өнімге айналдырады. Оның 420 нм жарық ұзындығындағы жаңа ең жоғары сіңіруін (ε = 3.6 × 104 М–1 см–1) спектрофотометрмен – зертханада қолданылатын құралмен оңай бақылауға болады. Кейде ол қан сарысуы сияқты ерітінділердегі глюкоза концентрациясын анықтау үшін глюкозаны бағалау реагентінің құрамына кіреді. ABTS тағам өнеркәсібі және ауыл шаруашылығы зерттеушілері тарапынан тағамның антиоксиданттық қабілетін өлшеу үшін жиі қолданылады. Бұл талдау кезінде ABTS натрий персульфатын қосу арқылы радикал-катионға айналады. Бұл радикал-катион көк түсті және 415, 645, 734 және 815 нм жарықты сіңіреді. ABTS радикал-катионы фенолдар, тиолдар және C витамині сияқты көптеген антиоксиданттарға реактивті. Бұл реакция кезінде көк ABTS радикал-катионы түссіз бейтарап түріне қайта айналады. Реакцияны спектрофотометриялық түрде бақылауға болады. Бұл талдау көбінесе Trolox эквивалентті антиоксиданттық сыйымдылық (TEAC) талдауы деп аталады. Сыналған әр түрлі антиоксиданттардың реактивтілігі суға ерігіш E витамині аналогы – Trolox-тың реактивтілігімен салыстырылады.
This compound is chosen because the enzyme facilitates the reaction with hydrogen peroxide, turning it into a green and soluble end product. Its new absorbance maximum of 420 nm light (ε = 3.6 × 104 M–1 cm–1) can easily be followed with a spectrophotometer, a common laboratory instrument. It is sometimes used as part of a glucose estimating reagent when finding glucose concentrations of solutions such as blood serum. ABTS is also frequently used by the food industry and agricultural researchers to measure the antioxidant capacities of foods. In this assay, ABTS is converted to its radical cation by addition of sodium persulfate. This radical cation is blue in color and absorbs light at 415, 645, 734 and 815 nm. The ABTS radical cation is reactive towards most antioxidants including phenolics, thiols and Vitamin C. During this reaction, the blue ABTS radical cation is converted back to its colorless neutral form. The reaction may be monitored spectrophotometrically. This assay is often referred to as the Trolox equivalent antioxidant capacity (TEAC) assay. The reactivity of the various antioxidants tested are compared to that of Trolox, which is a water soluble analog of vitamin E.
Функционалдық тағамдарды талдау үшін қолданылатын тәсілдер
Азат радикалдардың ерекше химиялық қасиеттеріне негізделген АБТС әдісі, азық-түлік өнімдерінің антиоксиданттық қабілетін анықтау үшін қолданылады. Мысалы, жемістерде кең таралған полифенол қосылыстары адам ағзасындағы азат радикалдарды бейтараптандырып, олардың күйдіргіш зақымдануын алдын алады. Өсімдік экстракттерінің немесе азық-түлік өнімдерінің антиоксиданттық қуаты АБТС әдісі арқылы өлшенді. Гибискус өнімдерінің антиоксиданттық белсенділігін талдау – бұл әдістің егжей-тегжейлі мысалы.
Based on the special chemical properties of formed free radicals, ABTS assay has been used to determine the antioxidant capacity of food products. For example, polyphenol compounds, which widely exist in fruit, can quench free radicals inside human body, thus prevent oxidative damage by free radicals. The antioxidant potency of plant extract or food product has been measured by ABTS assay. One example with detailed method is the antioxidant activity analysis of Hibiscus products.