Кіріспе

Стресс жағдайындағы жасушаларда кездесетін белоктар мен РНК-ның цитоплазмалық биомолекулалық конденсаттары.

Жасуша биологиясында стресс гранулалары – цитозольдегі белоктар мен РНК-дан құралған биомолекулалық конденсаттар. Жасуша стресске ұшырағанда олар 0,1–2 мкм өлшемді мембранасыз органеллаларға жиналады. Стресс гранулаларындағы мРНК молекулалары 40S рибосомалық суббірліктерімен байланысты, трансляцияны бастау факторларымен, поли(А)+ мРНК-мен және РНК байланыстыратын ақуыздармен (РБП) байланыстырылған тоқтап қалған трансляцияға дайын кешендер болып табылады. Мембранасыз органеллалар болғанымен, стресс гранулалары эндоплазмалық ретикулуммен байланысты болуы мүмкін деген болжам бар. Ядролық стресс гранулалары да бар. Бұл мақала цитозольдік түрле туралы.

Ұсынылған функциялар

Кернеу гранулдарының функциясы көбінесе белгісіз күйде қалады. Кернеу гранулдарының РНК-ны зиянды жағдайлардан қорғауға арналған функциясы бар екені ұзақ уақыттан бері айтылып келеді, сондықтан олар стресс жағдайында пайда болады. РНК-ның тығыз шарларға жиналуы олардың зиянды химиялық заттармен әрекеттесуіне кедерес келтіріп, РНК тізбегінде кодталған ақпаратты сақтайды. Кернеу гранулдары аударылмаған мРНК үшін шешім қабылдау ортасы ретінде де жұмыс істей алады. Молекулалар үш жолдың бірімен өтеді: одан әрі сақтау, ыдырау немесе трансляцияны қайта бастау. Алайда, кернеу гранулдары мРНК сақтау үшін маңызды орын емес және олар мРНК-ның сақталу және ыдырау күйлері арасындағы транзиттік аралық ретінде де қызмет етпейді деген пікір де бар. Биохимиялық тазартылған кернеу грануласының "өзегінен" РНК-ны тізбектеп, кернеу гранулаларындағы барлық РНК-ны (кернеу грануласының транскриптомы) бейтарап түрде анықтауға жасалған әрекеттер РНК-ның тізбектік емес, жалпы түрде кернеу гранулаларына тартылатынын, сондай-ақ ұзақ немесе нашар аударылған транскрипттердің көптеп кездесетінін көрсетті. Бұдан бөлек, жасушадағы барлық мРНК-ның шамамен 15% ғана кернеу гранулаларында шоғырланған деп есептеледі. Дегенмен, бұл зерттеулер тек уақыттың бір сәтін көрсетеді және РНК-ның үлкен бөлігі белгілі бір уақытта кернеу гранулаларында сақталуы мүмкін, себебі олар сол гранулаларға кіріп-шығуда болады. Өсімдік жасушаларындағы кернеу гранулаларының негізгі құрамдас бөлігін құрайтын стресс ақуыздары – молекулалық шаперондар, олар ыстық және басқа да стресс түрлерінде ашылатын ақуыздарды бөліп, қорғап, мүмкін болса, қалпына келтіреді. Сондықтан, мРНК-ның кернеу гранулаларымен байланысы жартылай ашылған РНК байланыстыратын ақуыздардың кернеу гранулаларымен байланысының жанама салдары болуы мүмкін, бұл мРНК-ның протеасомалармен байланысына ұқсас.

Құрылу

Қоршаған ортаның стресс факторлары жасушалық сигналдауды іске қосып, әрі қарай стресс түйіршіктерінің қалыптасуына алып келеді. In vitro жағдайында бұл стресс факторларына жылу, суық, тотығу стресі (натрий арсениті), эндоплазмалық ретикулум стресі (тапсигаргин), протеазоманың тежелуі (MG132), гипер осмотикалық стресс, ультракүлгін сәулелену, eIF4A-ның тежелуі (патеамин А, гиппуристанол немесе RocA), 3 морфолинозиднониминмен (SIN 1) емдеуден кейін азот оксидінің жиналуы, пре-мРНҚ тігілуінің бұзылуы және полисомалардың ыдырауына себеп болатын пуромицин сияқты басқа да стресс факторлары кіреді. Бұл стресс факторларының көпшілігі стресске байланысты белгілі бір киназалардың (HRI, PERK, PKR және GCN2) белсендірілуіне, трансляциялық тежелуге және стресс түйіршіктерінің қалыптасуына әкеледі. Стресс түйіршіктерінің қалыптасуы көбінесе эукариоттық трансляцияны бастау факторы eIF2α-ның стресске жауап ретінде фосфорилирленуінен кейін жүзеге асады; алайда, бұл стресс түйіршіктерін тудыратын барлық стресс факторларына қатысты емес. Сонымен қатар, микротүтікшелер стресс түйіршіктерінің қалыптасуында рөл атқарады, мүмкін түйіршік құраушыларын тасымалдау арқылы. Бұл гипотеза микротүтікшелерді нокодазол химиялық затымен бұзу гранулдардың пайда болуын тоқтататындығына негізделген. Бұдан өзге, көптеген сигналдық молекулалар стресс түйіршіктерінің қалыптасуын немесе динамикасын реттейді; оларға «басты энергия сенсоры» AMP-белсенді протеинкиназа (AMPK), O GlcNAc трансфераза ферменті (OGT) және проапоптотикалық киназа ROCK1 жатады.

РНК-РНК өзара әрекеттесуінің ықтимал рөлі

РНК фазалық ауысулары, ішінара молекулааралық РНК-РНК өзара әрекеттесулерінің нәтижесінде, стресс гранулаларының қалыптасуына ықпал етуі мүмкін. Өзіндік ретсіз ақуыздар сияқты, жалпы РНК экстракттары физиологиялық жағдайларда in vitro фазалық бөлінуге қабілді. РНК секвенциялау талдаулары осы жиынтықтардың стресс гранулаларымен үлкен дәрежеде үштас транскриптомды бөлісетінін көрсетеді. Ашытқыда каталитикалық ded1 мутантты аллельдер тұрақты стресс гранулаларын тудырады. АТФазаға тәуелділігі жоқ DDX3X (Ded1 сүтқоректі гомологы) мутантты аллельдер педиатриялық медуллобластомаларда табылады және пациенттер жасушаларындағы тұрақты гранулалық жиынтықтармен сәйкес келеді. Бұл мутантты DDX3 ақуыздары HeLa жасушаларында стресс гранулаларының құралуын күшейтеді. Сондай-ақ, стресс гранулаларындағы РНК цитоплазмадағы РНК-ға қарағанда ықшамдалып, 5' ұштарында N6-метиладенозин (m6A) немесе РНК ацетилациясы ac4C арқылы посттрансляциялық модификацияға ұшырайтынына дәлелдер бар. Жақындағы зерттеулер жоғары мөлшердегі трансляцияны бастау факторы және DEAD қаптамасы eIF4A ақуызы стресс гранулаларының қалыптасуын шектейтінін көрсетті. Ол АТФ және РНК-мен байланысу қабілеті арқылы, Hsp70 сияқты ақуыздық шаперонға ұқсас әрекет етеді.

Өңдеуші органдармен байланыс

Стресс гранулалары мен P денелері (өңдеу денелері) РНК және ақуыз компоненттерін бөліседі, екеуі де стресс жағдайында пайда болады және бір-бірімен физикалық байланысқа түседі. 2018 жылғы мәліметтер бойынша, стресс гранулаларына локализацияланатын ~660 ақуыздың шамамен ~11% өңдеу денелеріне локализацияланған ақуыздар ретінде анықталған (төменде қараңыз). G3BP1 ақуызы өңдеу денелерінің стресс гранулаларымен дұрыс байланысуы үшін қажет, бұл полиаденилденген мРНК-ны сақтау үшін маңызды болуы мүмкін. Стресс гранулалары мен P денелерінің екеуі де мРНК-мен байланысты болғанымен, өңдеу денелері мРНК-ның ыдырау орындары деп ұзақ уақыттан бері қарастырылып келеді, себебі олар мРНК-ны ыдырататын DCP1/2 және XRN1 сияқты ферменттерді қамтиды. Дегенмен, өңдеу денелері стресс гранулаларының пайда болуына алдын алып, көмектесетінін көрсететін деректер де бар.