Введение

Класс химических соединений

Нуклеозидтрифосфат – это нуклеозид, содержащий азотистое основание, связанное с углеводным сахаром, содержащим 5 атомов углерода (либо рибозой, либо дезоксирибозой), к которому присоединены три фосфатные группы. Они являются молекулярными предшественниками ДНК и РНК, которые представляют собой цепи нуклеотидов, образующиеся в процессах репликации ДНК и транскрипции. Нуклеозидтрифосфаты также служат источником энергии для клеточных реакций и участвуют в сигнальных каскадах. Нуклеозидтрифосфаты плохо абсорбируются, поэтому обычно синтезируются внутри клетки. Пути синтеза различаются в зависимости от конкретного нуклеозидтрифосфата, но, учитывая множество важных функций нуклеозидтрифосфатов, синтез строго регулируется во всех случаях. Нуклеозидные аналоги также могут применяться для лечения вирусных инфекций.

Именование

Термин "нуклеозид" обозначает азотистое основание, связанное с углеводным сахаром, содержащим пять атомов углерода (либо рибозой, либо дезоксирибозой). Для указания количества фосфатных групп нуклеотиды могут именоваться как нуклеозид (моно-, ди- или три-)фосфаты. Таким образом, нуклеозидные трифосфаты являются разновидностью нуклеотидов. Нуклеозидные трифосфаты, содержащие рибозу, обычно обозначаются аббревиатурой NTP, а нуклеозидные трифосфаты, содержащие дезоксирибозу – аббревиатурой dNTP. Например, dATP обозначает дезоксирибозаденозинтрифосфат. NTP являются строительными блоками РНК, а dNTP – строительными блоками ДНК. Атомы углерода сахара в нуклеозидном трифосфате нумеруются по кольцу, начиная с исходного карбонильного атома углерода сахара. Для различения атомов углерода сахара и азотистого основания к номерам атомов углерода в сахаре обычно добавляют штрих ('). Азотистое основание соединено с 1'-атомом углерода посредством гликозидной связи, а фосфатные группы ковалентно связаны с 5'-атомом углерода. Первая фосфатная группа, присоединенная к сахару, называется α-фосфатом, вторая – β-фосфатом, а третья – γ-фосфатом; они связаны между собой двумя фосфоангидридными связями.

Синтез ДНК и РНК

Клеточные процессы репликации и транскрипции ДНК включают в себя синтез ДНК и РНК соответственно. Синтез ДНК использует dNTP в качестве субстратов, а синтез РНК – rNTP в качестве субстратов. Таким образом, для синтеза ДНК требуются dATP, dGTP, dCTP и dTTP, а для синтеза РНК – ATP, GTP, CTP и UTP. Синтез нуклеиновых кислот катализируется либо ДНК-полимеразой, либо РНК-полимеразой для синтеза ДНК и РНК соответственно. Эти ферменты ковалентно связывают свободную OH-группу на 3'-углероде растущей цепи нуклеотидов с α-фосфатом на 5'-углероде следующего (d)NTP, высвобождая β- и γ-фосфатные группы в виде пирофосфата (PPi). Это приводит к образованию фосфодиэфирной связи между двумя (d)NTP. Высвобождение PPi обеспечивает энергию, необходимую для протекания реакции. Нуклеозидные трифосфаты плохо абсорбируются, поэтому все нуклеозидные трифосфаты обычно синтезируются de novo. Синтез АТФ и ГТФ (пуринов) отличается от синтеза КТФ, ТТФ и УТФ (пиримидинов). Как пуриновый, так и пиримидиновый синтез используют фосфорибозилпирофосфат (PRPP) в качестве исходной молекулы. Преобразование NTP в dNTP возможно только в дифосфатной форме. Обычно NTP теряет один фосфат, превращаясь в NDP, затем под действием фермента рибонуклеотидредуктазы превращается в dNDP, после чего к нему добавляется фосфат, образуя dNTP.

Синтез пуринов

Азотистое основание, называемое гипоксантином, непосредственно присоединяется к PRPP. В результате образуется нуклеотид, называемый инозинмонофосфат (ИМФ). Затем ИМФ превращается либо в предшественник АМФ, либо в предшественник ГМФ. После образования АМФ или ГМФ они могут быть фосфорилированы АТФ до дифосфатных и трифосфатных форм. Синтез пуринов регулируется аллостерическим ингибированием образования ИМФ адениновыми или гуаниновыми нуклеотидами. АМФ и ГМФ также конкурентно ингибируют образование своих предшественников из ИМФ.

Синтез пиримидина

Азотистое основание, называемое оротатом, синтезируется независимо от PRPP. ОМФ превращается в УМФ, который затем может быть фосфорилирован АТФ до UDP и UTP. UTP затем может быть преобразован в CTP посредством реакции деаминирования. ТТФ не является субстратом для синтеза нуклеиновых кислот, поэтому он не синтезируется в клетке. Вместо этого dTTP образуется косвенно из dUDP или dCDP после превращения в их соответствующие дезоксирибозные формы.

Трансдукция сигнала GTP

GTP необходим для передачи сигнала, особенно в работе с G-белками. G-белки связаны с рецептором, находящимся в клеточной мембране. GTP активирует альфа-субъединицу G-белка, вызывая её диссоциацию от G-белка и её функцию как нисходящего эффектора. Нуклеозидные аналоги – это нуклеозиды, структурно схожие (аналогичные) нуклеозидам, используемым в синтезе ДНК и РНК. Попав в клетку, эти нуклеозидные аналоги могут быть фосфорилированы вирусным ферментом. Полученные нуклеотиды достаточно похожи на нуклеотиды, используемые в синтезе ДНК или РНК, чтобы включаться в растущие цепи ДНК или РНК, но у них отсутствует доступная 3'-OH группа для присоединения следующего нуклеотида, что приводит к обрыву цепи. Это можно использовать в терапевтических целях при вирусных инфекциях, поскольку вирусная ДНК-полимераза легче распознает определенные нуклеотидные аналоги, чем эукариотическая ДНК-полимераза, например, цитозин арабинозид (ара-С) при лечении некоторых форм лейкемии. Это часто встречается в нуклеозидных аналогах, используемых для лечения ВИЧ/СПИДа.