Введение

Плазмида pGLO – это сконструированная плазмида, используемая в биотехнологии в качестве вектора для создания генетически модифицированных организмов. Плазмида содержит несколько репортерных генов, наиболее заметными из которых являются ген зеленого флуоресцентного белка (GFP) и ген устойчивости к ампициллину. GFP был выделен из медузы *Aequorea victoria*. Поскольку он имеет общий двунаправленный промотор с геном, отвечающим за метаболизм арабинозы, ген GFP экспрессируется в присутствии арабинозы, что приводит к проявлению флуоресценции трансгенного организма под воздействием ультрафиолетового света. Индукция GFP в бактериях, содержащих плазмиду pGLO, достигается путем выращивания их на агаризованных средах с арабинозой (+арабиноза). pGLO производится компанией Bio-Rad Laboratories.

Открытие GFP

Ген GFP был впервые обнаружен Осаму Шимомурой и его командой в 1962 году, изучая медузу Aequorea victoria, у которой под куполом есть кольцо синего света. Шимомура и его команда изолировали белок аэкорин из тысяч медуз, пока не собрали достаточно материала для полного анализа белка. Именно при изучении аэкорина Шимомура обнаружил небольшое количество GFP, который светится зеленым, когда аэкорин излучает синий свет. После успешного выяснения принципа работы GFP совместно с аэкорином в медузах, он временно отложил его изучение, чтобы заняться биолюминесценцией в других организмах. В 1994 году Марти Чалфи и его команда смогли создать мутантную ГФП, способную излучать целый спектр цветов, а не только зеленый. Эти три ученых были удостоены Нобелевской премии по химии в 2008 году за открытие и разработку зеленого флуоресцентного белка GFP.