Сравнивайте с английским: нажмите на абзац — оригинал откроется в окне. Кнопка EN под абзацем показывает его прямо в тексте.
Введение
Спектрофлюорометр – это прибор, использующий флуоресцентные свойства некоторых соединений для получения информации об их концентрации и химическом окружении в образце. Выбирается определенная длина волны возбуждения, а излучение наблюдается либо на одной длине волны, либо проводится сканирование для записи зависимости интенсивности от длины волны, также называемой спектром эмиссии. Прибор применяется в флуоресцентной спектроскопии.
A spectrofluorometer is an instrument which takes advantage of fluorescent properties of some compounds in order to provide information regarding their concentration and chemical environment in a sample. A certain excitation wavelength is selected, and the emission is observed either at a single wavelength, or a scan is performed to record the intensity versus wavelength, also called an emission spectrum. The instrument is used in fluorescence spectroscopy.
Операция
Как правило, спектрофлюорометры используют источники света высокой интенсивности для облучения образца максимально возможным количеством фотонов. Это позволяет максимально возможному числу молекул находиться в возбужденном состоянии в любой момент времени. Свет либо пропускается через фильтр, выбирающий фиксированную длину волны, либо через монохроматор, позволяющий выбрать интересующую длину волны для использования в качестве возбуждающего света. Излучение собирается под углом, близким к перпендикулярному к направлению излучаемого света. Затем излучение также пропускается через фильтр или монохроматор перед детектированием фотоумножителем, фотодиодом или ПЗС-детектором. Сигнал может быть обработан как в цифровом, так и в аналоговом формате. Системы значительно различаются, и на выбор влияют различные факторы. Первым из них является отношение сигнал/шум. Существует множество способов оценки отношения сигнал/шум для конкретной системы, но общепринятым стандартом является использование рамановского сигнала воды. Чувствительность или предел обнаружения – еще одна важная характеристика, определяющая, какое минимальное количество света может быть измерено. В качестве стандарта обычно используют флуоресцеин в растворе NaOH, при этом типичные значения для высококлассных приборов находятся в фемомолярном диапазоне.
Generally, spectrofluorometers use high intensity light sources to bombard a sample with as many photons as possible. This allows for the maximum number of molecules to be in an excited state at any one point in time. The light is either passed through a filter, selecting a fixed wavelength, or a monochromator, which allows a wavelength of interest to be selected for use as the exciting light. The emission is collected at the perpendicular to the emitted light. The emission is also either passed through a filter or a monochromator before being detected by a photomultiplier tube, photodiode, or charge coupled device detector. The signal can either be processed as digital or analog output. Systems vary greatly and a number of considerations affect the choice. The first is the signal to noise ratio. There are many ways to look at the signal to noise of a given system but the accepted standard is by using the Raman signal of water. Sensitivity or detection limit is another specification to be considered, that is how little light can be measured. The standard would be fluorescein in NaOH, typical values for a high end instrument are in the femtomolar range.