Введение

Класс ферментов

Трансаминазы или аминотрансферазы — это ферменты, катализирующие реакцию переаминирования между аминокислотой и α-кетокислотой. Они играют важную роль в синтезе аминокислот, являющихся строительными блоками белков.

Функция и механизм

Аминокислота содержит амино (NH2) группу. Кетокислота содержит кето (=O) группу. При трансаминации аминогруппа (NH2) одной молекулы обменивается на кетогруппу (=O) другой молекулы. Аминокислота превращается в кетокислоту, а кетокислота – в аминокислоту. Трансаминазы требуют кофермента пиридоксалфосфат, который превращается в пиридоксамин в первой полуреакции, когда аминокислота превращается в кетокислоту. Пиридоксамин, связанный с ферментом, в свою очередь, реагирует с пируватом, оксалоацетатом или альфа-кетоглутаратом, образуя соответственно аланин, аспарагиновую кислоту или глутаминовую кислоту. Многие трансаминационные реакции происходят в тканях и катализируются трансаминазами, специфичными для конкретной пары амино-/кетокислот. Реакции легко обратимы, и направление определяется преобладанием одного из реагентов. Эту обратимость можно использовать в синтетической химии для получения ценных хиральных аминов. Конкретные ферменты получают название по одной из пар реагентов; например, реакция между глутаминовой кислотой и пирувиновой кислотой с образованием альфа-кетоглутаровой кислоты и аланина называется аланинтрансаминазой и первоначально называлась глутаминовой пирувической трансаминазой или GPT. Активность тканевых трансаминаз можно исследовать, инкубируя гомогенат с различными парами амино-/кетокислот. Трансаминация подтверждается образованием соответствующих новых аминокислот и кетокислот, что выявляется с помощью бумажной хроматографии. Обратимость демонстрируется использованием комплементарной пары кето-/аминокислот в качестве исходных реагентов. После извлечения хроматограммы из растворителя ее обрабатывают нингидрином для определения местоположения пятен.

Метаболизм аминокислот у животных

Животным необходимо расщеплять белки до аминокислот, за счет распада мышечной ткани, при низком уровне сахара в крови. Предпочтение печеночных трансаминаз оксалоацетату или альфа-кетоглутарату играет ключевую роль в направлении азота из метаболизма аминокислот к аспартату и глутамату для последующего превращения в мочевину и выведения азота. Подобным образом, в мышцах использование пирувата для трансаминирования приводит к образованию аланина, который транспортируется с кровотоком в печень (вся реакция известна как цикл глюкоза-аланин). Там другие трансаминазы регенерируют пируват, являющийся ценным предшественником глюконеогенеза. Этот цикл аланина аналогичен циклу Кори, обеспечивающему возможность анаэробного метаболизма в мышцах.

Диагностическое применение

Трансаминазы играют важную роль в синтезе различных аминокислот, а измерение концентрации различных трансаминаз в крови необходимо для диагностики и мониторинга многих заболеваний. Например, повышение уровня трансаминаз может указывать на повреждение печени и сердца. Два важных трансаминазных фермента – это аспартаттрансаминаза (АСТ), также известная как сывороточная глутаминооксалоацетат-трансаминаза (СГОТ); и аланинтрансаминаза (АЛТ), также называемая аланин-аминотрансфераза (АЛАТ) или сывороточная глутаматопируват-трансаминаза (СГПТ). Эти трансаминазы были открыты в 1954 году, а их клиническая значимость была описана в 1955 году.