Введение

Домен белка

Домен SH2 (Src Homology 2) — это структурно консервативный домен белка, содержащийся в онкопротеине Src и во многих других внутриклеточных белках, осуществляющих передачу сигналов. Домены SH2 связываются с фосфорилированными тирозиновыми остатками в других белках, модифицируя функцию или активность белка, содержащего SH2-домен. Домен SH2 можно рассматривать как прототипический модульный домен для взаимодействия белков, обеспечивающий передачу сигналов, контролирующих разнообразные клеточные функции. Домены SH2 особенно часто встречаются в адапторных белках, которые способствуют передаче сигналов в сигнальных путях рецепторных тирозинкиназ.

Структура и взаимодействия

Домены SH2 содержат около 100 аминокислотных остатков и характеризуются центральным антипараллельным β-листом, расположенным между двумя α-спиралями. Связывание с пептидами, содержащими фосфотирозин, включает строго консервированный остаток аргинина, который образует пару с отрицательно заряженным фосфатом фосфотирозина, а также окружающий карман, распознающий фланкирующие последовательности в целевом пептиде. Известно, что более 100 человеческих белков содержат домены SH2. Разнообразные тирозинсодержащие последовательности способны связываться с доменами SH2 и консервативны у широкого спектра организмов, выполняя сходные функции. Связывание белка, содержащего фосфотирозин, с доменом SH2 может приводить либо к активации, либо к инактивации белка, содержащего SH2, в зависимости от характера взаимодействий, формирующихся между доменом SH2 и другими доменами фермента. Мутации, нарушающие структурную стабильность домена SH2 или влияющие на связывание пептида фосфотирозина с его мишенью, вовлечены в развитие ряда заболеваний, включая X-связанную агаммаглобулинемию и тяжелый комбинированный иммунодефицит.

Разнообразие

Домены SH2 отсутствуют у дрожжей и впервые появляются на границе между царствами протистов и животных, например, у социальной амебы Dictyostelium discoideum. Детальный биоинформатический анализ доменов SH2 человека и мыши выявил 120 доменов SH2, входящих в состав 115 белков, кодируемых геномом человека, что свидетельствует о быстром темпе эволюционного расширения этих доменов. Структуры большого числа доменов SH2 были определены, и многие белки, содержащие домены SH2, были инактивированы у мышей.

Приложения

Домены SH2 и другие связывающие домены использовались в белковой инженерии для создания белковых комплексов. Белковые комплексы формируются, когда несколько белков связываются друг с другом, образуя более крупную структуру (называемую супрамолекулярным комплексом). С помощью методов молекулярной биологии были созданы белки-слияния специфических ферментов и доменов SH2, которые могут связываться друг с другом, формируя белковые комплексы. Поскольку для связывания доменам SH2 требуется фосфорилирование, использование киназ и фосфатаз дает исследователям возможность контролировать образование белковых комплексов. Высокоаффинные сконструированные домены SH2 были разработаны и используются в приложениях по сборке белков. Основная цель формирования белковых комплексов – повышение эффективности метаболических путей за счет ферментативной ко-локализации. Другим применением белковых комплексов, опосредованных доменом SH2, является формирование фрактальных структур высокой плотности, обладающих выраженными свойствами молекулярного захвата.