Введение
Синий краситель
Триппан синий – это азокраситель. Он является прямым красителем для хлопчатобумажных тканей. В биологических науках он используется как витальный краситель для селективного окрашивания мертвых тканей или клеток в синий цвет. Живые клетки или ткани с неповрежденными клеточными мембранами не окрашиваются. Поскольку клетки очень избирательны в отношении соединений, проникающих через мембрану, в жизнеспособной клетке триппан синий не абсорбируется; однако, он проникает через мембрану в мертвой клетке. Следовательно, мертвые клетки выглядят отчетливо синими под микроскопом. Поскольку живые клетки исключаются из окрашивания, этот метод окрашивания также называют методом исключения красителя.
История и химия
Трипан синий получают из толуидина, то есть любого из нескольких изомерных оснований с формулой C14H16N2, полученных из толуола. Трипан синий получил своё название благодаря способности убивать трипаносом – паразитов, вызывающих сонную болезнь. Аналог трипана синего, сурамин, используется в фармакологии для лечения трипаносомоза. Трипан синий также известен как диаминовый синий и ниагарский синий. Коэффициент поглощения трипана синего составляет 6⋅104 М-1 см-1 при длине волны 607 нм в метаноле. Трипан красный и трипан синий впервые были синтезированы немецким ученым Полом Эрлихом в 1904 году.
Использование трипана
Трипан синий обычно используется в микроскопии (для подсчета клеток) и на лабораторных мышах для оценки жизнеспособности тканей. Метод не позволяет различить некротические и апоптотические клетки. Его также можно использовать для наблюдения за грибковыми гифами и стременопилами. Трипан синий применяется в офтальмологической хирургии катаракты для окрашивания передней капсулы при зрелой катаракте, что облегчает визуализацию перед выполнением непрерывной криволинейной капсулорексиса. В кератопластике трипан синий может использоваться для окрашивания задних стромальных волокон при глубокой ламеллярной эндотелиальной кератопластике (DLEK) и для окрашивания эндотелия при десцеметской стриппинг-эндотелиальной кератопластике (DSEK). Трипан синий также применяется в витреоретинальных операциях. В начале XX века, на основании наблюдения, что инъекция трипана синего животным приводила к окрашиванию всего тела, кроме мозга и спинного мозга, было сделано предположение о существовании барьера, защищающего мозг (гематоэнцефалического барьера).