Сравнивайте с английским: нажмите на абзац — оригинал откроется в окне. Кнопка EN под абзацем показывает его прямо в тексте.
Введение
Автофлуоресценция - это естественное излучение света биологическими структурами, такими как митохондрии и лизосомы, когда они поглощают свет, и используется для различения света, происходящего от искусственно добавленных флуоресцентных маркеров (флуорофоров). Наиболее часто наблюдаются молекулы автофлуоресценции NADPH и флавины; внеклеточный матрикс также может способствовать автофлуоресценции из-за внутренних свойств коллагена и эластина.
Autofluorescence is the natural emission of light by biological structures such as mitochondria and lysosomes when they have absorbed light, and is used to distinguish the light originating from artificially added fluorescent markers (fluorophores). The most commonly observed autofluorescencing molecules are NADPH and flavins; the extracellular matrix can also contribute to autofluorescence because of the intrinsic properties of collagen and elastin.
Микроскопия
Автофлуоресценция может быть проблематичной в флуоресцентной микроскопии. Светоизлучающие пятна (например, антитела с флуоресцентной маркировкой) наносятся на образцы для визуализации конкретных структур. Автофлуоресценция мешает обнаружению специфических флуоресцентных сигналов, особенно когда сигналы, представляющие интерес, очень тусклые, - это приводит к тому, что видны другие структуры, кроме тех, которые представляют интерес. В некоторых микроскопах (в основном конфокальных) можно использовать разные периоды жизни возбужденных состояний добавленных флуоресцентных маркеров и эндогенных молекул, чтобы исключить большую часть автофлуоресценции. В некоторых случаях автофлуоресценция может фактически освещать интересующие структуры или служить полезным диагностическим показателем. Автофлуоресценция кожи человека может быть использована для измерения уровня конечных продуктов прогрессирующего гликования (AGEs), которые присутствуют в больших количествах во время нескольких заболеваний человека. Системы оптической визуализации, использующие мультиспектральную визуализацию, могут уменьшить деградацию сигнала, вызванную автофлуоресценцией, при одновременном добавлении расширенных возможностей мультиплексирования. Микроскопия сверхразрешения SPDM обнаружила автофлуоресцентные клеточные объекты, которые не могут быть обнаружены в обычных условиях флуоресцентной визуализации.
Autofluorescence can be problematic in fluorescence microscopy. Light emitting stains (such as fluorescently labelled antibodies) are applied to samples to enable visualisation of specific structures. Autofluorescence interferes with detection of specific fluorescent signals, especially when the signals of interest are very dim — it causes structures other than those of interest to become visible. In some microscopes (mainly confocal microscopes), it is possible to make use of different lifetime of the excited states of the added fluorescent markers and the endogenous molecules to exclude most of the autofluorescence. In a few cases, autofluorescence may actually illuminate the structures of interest, or serve as a useful diagnostic indicator. The autofluorescence of human skin can be used to measure the level of advanced glycation end products (AGEs), which are present in higher quantities during several human diseases. Optical imaging systems that utilize multispectral imaging can reduce signal degradation caused by autofluorescence while adding enhanced multiplexing capabilities. The super resolution microscopy SPDM revealed autofluorescent cellular objects which are not detectable under conventional fluorescence imaging conditions.