Ағылшыншамен салыстырыңыз: абзацты басыңыз — түпнұсқа терезеде ашылады. Абзац астындағы EN түймесі оны мәтін ішінде көрсетеді.
Кіріспе
Қоспадағы бөлшектерді бөлу әдісі
Method of separating particles in a mixture
Биохимия және жасуша биологиясында дифференциалды центрифугалау (дифференциалды жылдамдықпен центрифугалау деп те аталады) – органеллаларды және басқа да жасуша ішіндегі бөлшектерді олардың тұну жылдамдығына сәйкес бөлу үшін қолданылатын кең таралған процедура. Көбінесе биологиялық талдауларда қолданылса да, дифференциалды центрифугалау – тірі емес суспензиядағы бөлшектерді (мысалы, нанобөлшектер, коллоидты бөлшектер, вирустар) қарапайым тазартуға да жарамды әдіс. Дифференциалды центрифугалау жасушалық биологиялық құбылыстарды (мысалы, органеллалардың таралуын) зерттеу үшін қолданылатын жағдайда, алдымен тіндік үлгі жасуша мембраналарын бұзу және органеллалар мен цитозольді босату үшін лизге түсіріледі. Лизат қайталап центрифугалауға ұшыратылады, онда белгілі бір центрифугалық күшпен белгілі бір уақыт ішінде жеткілікті жылдамдықпен тұнатын бөлшектер центрифугалау түтігінің түбінде тығыз "пеллет" құрайды. Әрбір центрифугалаудан кейін, үстіңгі сұйық (пеллетсіз ерітінді) түтікшеден алынып, арттырылған центрифугалық күшпен және/немесе уақытпен қайта центрифугаланады. Дифференциалды центрифугалау тұну жылдамдығына негізделген қарапайым бөлістерге жарамды, бірақ одан да дәл тазартулар тепе-теңдік тығыздық градиенті центрифугалау арқылы тығыздық негізінде жүзеге асырылуы мүмкін. Осылайша, дифференциалды центрифугалау әдісі – жоғары центрифугалық күштерді пайдалана отырып, алдыңғы үстіңгі сұйықтан бөлшектерді біртіндеп пеллеттеу болып табылады. Дифференциалды центрифугалау арқылы бөлінген жасуша органеллалары оқшаулау кезінде денатурацияға ұшырамаса, қалыпты жұмыс істеудің жоғары деңгейін сақтайды.
In biochemistry and cell biology, differential centrifugation (also known as differential velocity centrifugation) is a common procedure used to separate organelles and other sub cellular particles based on their sedimentation rate. Although often applied in biological analysis, differential centrifugation is a general technique also suitable for crude purification of non living suspended particles (e. g. nanoparticles, colloidal particles, viruses). In a typical case where differential centrifugation is used to analyze cell biological phenomena (e. g. organelle distribution), a tissue sample is first lysed to break the cell membranes and release the organelles and cytosol. The lysate is then subjected to repeated centrifugations, where particles that sediment sufficiently quickly at a given centrifugal force for a given time form a compact "pellet" at the bottom of the centrifugation tube. After each centrifugation, the supernatant (non pelleted solution) is removed from the tube and re centrifuged at an increased centrifugal force and/or time. Differential centrifugation is suitable for crude separations on the basis of sedimentation rate, but more fine grained purifications may be done on the basis of density through equilibrium density gradient centrifugation. Thus, the differential centrifugation method is the successive pelleting of particles from the previous supernatant, using increasingly higher centrifugation forces. Cellular organelles separated by differential centrifugation maintain a relatively high degree of normal functioning, as long as they are not subject to denaturing conditions during isolation.
Дифференциалдық және тығыздық градиенті центрифугасының айырмашылықтары
Дифференциалдық және тығыздық градиенті центрифугалау әдістерінің айырмашылығы – екінші әдісте әртүрлі тығыздықтардағы ерітінділер (мысалы, сахароза, Фиколл, Перколл) немесе үлгі арқылы өтетін гельдер қолданылады. Бұл, молекулалар центрифугалық күш әсерімен өз тығыздығымен тең ортаға жеткенше төмен түсетініне негізделген, салыстырмалы тығыздық бойынша үлгіні қабаттарға бөледі. Қабаттардың бөліну дәрежесі немесе саны қолданылған ерітіндіге немесе гельге байланысты. Ал дифференциалдық центрифугалау тығыздық градиентін пайдаланбайды және центрифугалау жылдамдығы біртіндеп арттырылады. Әртүрлі центрифугалау жылдамдықтары көбінесе екі фракциядан аспайтын бөлінуге әкеледі, сондықтан супернатантты қосымша центрифугалау кезеңдерінде одан әрі бөлуге болады. Ол үшін, қажетті бөлшектер бөлінгенше әр кезеңде центрифугалау жылдамдығын арттыру қажет. Керісінше, тығыздық градиенті центрифугалау әдетте бір ғана жылдамдықпен жүргізіледі.
The difference between differential and density gradient centrifugation techniques is that the latter method uses solutions of different densities (e. g. sucrose, Ficoll, Percoll) or gels through which the sample passes. This separates the sample into layers by relative density, based on the principle that molecules settle down under a centrifugal force until they reach a medium with the density the same as theirs. The degree of separation or number of layers depends on the solution or gel. Differential centrifugation, on the other hand, does not utilize a density gradient, and the centrifugation is taken in increasing speeds. The different centrifugation speeds often create separation into not more than two fractions, so the supernatant can be separated further in additional centrifugation steps. For that, each step the centrifugation speed has to be increased until the desired particles are separated. In contrast, the density gradient centrifugation is usually performed with just one centrifugation speed.