Ағылшыншамен салыстырыңыз: абзацты басыңыз — түпнұсқа терезеде ашылады. Абзац астындағы EN түймесі оны мәтін ішінде көрсетеді.
Мазмұны
Кіріспе
Жасушаның компоненттерін олардың функцияларын сақтай отырып бөлу
Separating components of a cell while preserving their functions
Жасуша биологиясында жасушалық фракциялау – әрбір компоненттің жеке функцияларын сақтай отырып, жасуша компоненттерін бөлу процесі. Бұл әдіс бастапқыда түрлі биохимиялық процестердің жасуша ішіндегі орналасуын анықтау үшін қолданылған. Субклеткалық фракциялаудың басқа да қолданыстары – одан әрі тазарту үшін ақуыздың толыққанды көзін алуға және түрлі ауруларды диагностикалауды жеңілдетуге мүмкіндік беру.
In cell biology, cell fractionation is the process used to separate cellular components while preserving individual functions of each component. This is a method that was originally used to demonstrate the cellular location of various biochemical processes. Other uses of subcellular fractionation is to provide an enriched source of a protein for further purification, and facilitate the diagnosis of various disease states.
Гомогендеу
Тіндер әдетте осмостық зақымдануды тоқтату үшін изотонды буферлік ерітіндіде гомогенделеді. Гомогендеу механизмдеріне ұнтақтау, ұсақтау, кесу, қысым өзгерту, осмостық соққы, қатыру-еру және ультрадыбыс қолдану жатады. Ферменттік зақымданудың алдын алу үшін үлгілер суық күйде сақталады. Бұл жасушалардың біртекті массасын (жасуша гомогенаты немесе жасуша суспензиясы) құру процесі. Ол жасушаларды тиісті ортада, дұрыс pH, иондық құрамы және температурада белгілі бір ферменттердің қатысуымен ұнтақтауды қамтиды. Мысалы, өсімдік жасушаларының орталық ламелласын ыдырататын пектиназа.
Tissue is typically homogenized in a buffer solution that is isotonic to stop osmotic damage. Mechanisms for homogenization include grinding, mincing, chopping, pressure changes, osmotic shock, freeze thawing, and ultrasound. The samples are then kept cold to prevent enzymatic damage. It is the formation of homogenous mass of cells (cell homogenate or cell suspension). It involves grinding of cells in a suitable medium in the presence of certain enzymes with correct pH, ionic composition, and temperature. For example, pectinase which digests middle lamella among plant cells.
Сүзгілеу
Бұл қадам жасушалардың бастапқы көзіне байланысты қажет болмауы мүмкін. Дегенмен, жануар тінінен байланыстырылған тіндер шығуы мүмкін, оларды жою қажет. Көбінесе, сүзгілеу марля арқылы құю немесе сору сүзгісі және тиісті дәрежедегі керамикалық сүзгіні пайдалану арқылы жүзеге асырылады.
This step may not be necessary depending on the source of the cells. Animal tissue however is likely to yield connective tissue which must be removed. Commonly, filtration is achieved either by pouring through gauze or with a suction filter and the relevant grade ceramic filter.
Тазарту
Тазарту дифференциалды центрифугалау арқылы жүзеге асырылады – күштің салмақтық күшінің кезеңдік жоғарылауы органеллаларды олардың тығыздығына қарай кезеңдік бөліп шығаруға мүмкіндік береді.
Purification is achieved by differential centrifugation – the sequential increase in gravitational force results in the sequential separation of organelles according to their density.