Кіріспе

ДНҚ тізбегінің түрі

Генетикада, үнсіздеуші – репрессорлар деп аталатын транскрипцияны реттеу факторларын байланыстыра алатын ДНҚ тізбегі. ДНҚ гендерді қамтиды және РНК-ны (мРНК) өндіруге арналған матрица болып табылады. Бұл мРНК кейін ақуыздарға аударылады. Репрессорлық ақуыз ДНҚ-ның үнсіздеу аймағына байланысқанда, РНК полимеразаның ДНҚ тізбегін РНК-ға транскрипциялауына бөгет жасайды. Транскрипция тоқтатылған жағдайда, РНК-ны ақуыздарға аудару мүмкін емес. Осылайша, үнсіздеушілер гендердің ақуыз ретінде экспрессиялануына кедергі келтіреді. РНК полимераза, ДНҚ-ға тәуелді фермент, ДНҚ тізбектерін 3'–5' бағытында транскрипциялайды, ал толықтырғыш РНК 5'–3' бағытында синтезделеді. РНҚ ДНҚ-ға ұқсас, бірақ РНҚ-да тиминнің орнына урацил болады, ол аденинмен негіздік жұпты құрайды. РНҚ-да гендік басу және экспрессияның белсенділігі үшін маңызды аймақ – 3' трансляцияланбаған аймақ. Бұл РНК-ның 3' ұшындағы ақуызға аударылмайтын, бірақ көптеген реттеуші аймақтарды қамтитын аймақ. Үнсіздеушілер туралы әлі көп мәлімет жоқ, бірақ ғалымдар олардың түрлерін, геномдағы орналасқан жерлерін және үнсіздеушілермен байланысты ауруларды жіктеу мақсатымен зерттеуді жалғастыруда.

Геном ішіндегі орналасулары

Тынықтырушы – нақты тізбекке тән элемент, ол өзінің белгілі бір генінің транскрипциясына теріс әсер етеді. ДНҚ-да тынықтырушы элемент орналасатын көптеген позициялар бар. Ең көп кездесетін позициясы – мақсатты геннің өстік жағында, онда ол геннің транскрипциясын басуға көмектеседі. Бұл қашықтық геннің өстік жағында шамамен 20 bp-ден 2000 bp-ге дейін айтарлықтай өзгеруі мүмкін. Кейбір тынықтырушылар геннің өзіндегі интрон немесе экзон ішінде орналасқан промотордың төменгі жағында кездеседі. Тынықтырушылар мРНК-ның 3' UTR (3' трансляцияланбаған аймағы) ішінде де табылған.

Түрлері

Қазіргі уақытта ДНК-да екі негізгі түрі бар үнсіздендіргіштердің: классикалық үнсіздендіргіш элементі және классикалық емес теріс реттеу элементі (NRE). Классикалық үнсіздендіргіштерде ген үнсіздендіргіш элемент арқылы белсенді түрде тежеледі, көбінесе жалпы транскрипция факторларының (GTF) жиналуына кедергі келтіре отырып. Прокариоттардың гендері ұқсас функциялары бойынша промотор және оператордан тұратын оперон деп аталатын бірліктерге топтастырылады. Оператор – репрессордың байланысу орны, демек ол эукариоттық ДНК-дағы үнсіздендіргіш аймаққа балама функция атқарады. Репрессорлық ақуыз оператормен байланысқанда, РНК полимераза оперонның транскрипциясын бастау үшін промотормен байланыса алмайды.

Лакоперонды басу

Прокариотты E. coli бактериясындағы лактоперон лактозаны ыдырататын ферменттерді өндіретін гендерден тұрады. Оның опероны прокариоттық үнсіздендіргіштің (silencer) мысалы. Бұл оперонның үш функционалдық гені – lacZ, lacY және lacA. Транскрипциялық деңгейде гендік экспрессия транскрипция жылдамдығын өзгерту арқылы реттеледі. Белсенділерді кодтайтын гендерге полипептидтерді кодтайтын экзондар, белоктардың аудармасынан бұрын мРНК-дан алынып тасталатын интрондар, РНК полимеразаның байланысатын транскрипциялық басталу орны және промотор жатады.

TATA қорабының басылуы

Эукариоттық гендерде жоғары орналасқан промотор және негізгі промотор, сондай-ақ базалық промотор болады. Көбінесе кездесетін базалық промотор – TATAAAAAA тізбегі, ол TATA қорапшасы деп аталады. TATA қорапшасы – бірнеше түрлі ақуыздардан құралған кешен, оның ішінде TATA байланыстырушы ақуыз (TBP) бар, ол TATA қорапшасына байланысады және TBP-ға байланысатын тағы 13 ақуызды қамтитын транскрипция факторы II D (TFIID) кіреді. TATA қорапшасын байланыстыратын ақуыздарға ДНК және РНК полимеразаларға байланысатын транскрипция факторы II B (TFIIB) да жатады. Репрессорлық ақуыз ДНК тізбегіне де, геннің промоторында жиналған транскрипция факторларына да байланыса алады, бұл хромосомалық иілгіш механизмді құрайды. Геномда кодталған үнсіздендіргіштер мұндай өзгерістерге ұшырауы мүмкін, бұл көптеген жағдайларда ауыр фенотиптік және функционалдық бұзылыстарға алып келеді. Жалпы алғанда, үнсіздендіргіш элементтеріндегі немесе аймақтарындағы мутациялар үнсіздендіргіштің әрекетін тежеуге немесе қажетті геннің тоқтаусыз репрессиясына әкелуі мүмкін. Бұл организмдегі белгілі бір жүйелердің қалыпты жұмыс істеуіне әсер ететін қажетсіз фенотиптің пайда болуына немесе жойылуына соқтыруы мүмкін. Көптеген үнсіздендіргіш элементтері мен ақуыздарының арасында REST/NSRF – дамудың нейрондық аспектілерінде ғана емес, түрлі әсер ететін маңызды үнсіздендіргіш факторы болып табылады. Шындығында, көптеген жағдайларда REST/NSRF RE 1/NRSE-мен бірлесіп, нейрон емес жасушаларды репрессиялап, оларға әсер етеді. Оның әсері бақалардан (Xenopus laevis) адамдарға дейін, фенотипте және дамуда көптеген әсерлерге ие. Xenopus laevis-те REST/NRSF-тың дисфункциясы немесе зақымдануы даму кезінде эктодермалық қалыптың бұзылуымен және нейрондық түтік, бас сүйек ганглиялары мен көздің дамуында маңызды салдарлармен байланысты. Адамдарда REST/NSRF үнсіздендіргіш элементінің жетіспеушілігі BDNF транскрипциясының төмендеуіне байланысты Хентингтон ауруымен байланысты. Сонымен қатар, жүргізіліп жатқан зерттеулер NRSE-нің ANP генін реттеуге қатысатынын көрсетеді, ол шамадан тыс экспрессияланғанда қарынша гипертрофиясына алып келуі мүмкін. Поликомб тобының (PcG) кешендеріндегі мутациялар организмдердің физиологиялық жүйелерінде де маңызды өзгерістерге әкелді. Сондықтан, үнсіздендіргіш элементтері мен тізбектеріндегі өзгерістер зиянды немесе байқаусыз өзгерістерге әкелуі мүмкін.

Xenopus laevis-тегі REST/NRSF

RE1/NRSE және REST/NRSF әсері мен ықпалы нейрондық емес жасушаларда маңызды, олар нейрондық гендерді басу немесе үнсіздендіруді қажет етеді. Бұл үнсіздендіру элементтері сондай-ақ нейронға тән емес белоктарды тудырмайтын гендердің экспрессиясын реттейді және зерттеулер осы факторлардың жасушалық процестерге қатты әсер ететінін көрсетті. Xenopus laevis-те RE1/NRSE және REST/NRSF дисфункциясы немесе мутациясы жүйке түтігінің, бас сүйек ганглияларының және көздің дамуына елеулі әсер етеді. Бұл бұзылулар деменцияға, хореяға және соңында өлімге алып келуі мүмкін. Молекулалық деңгейде Хантингтон ауруы (ХА) – аңшылық белдеуі (Htt) белгісінің мутациясынан туындайды. Нақтырақ айтқанда, геннің 5’ ұшына қарай CAG тізбегінің қалыптан тыс қайталануы байқалады, бұл нәтижесінде ақуызда уытты полиглутамин (polyQ) тізбегі пайда болады. Мутацияланған Htt ақуызы REST/NRSF әрекетін тежеу арқылы қалыпты жүйке функцияларын бұзады. REST/NRSF – нейрондық функцияларға қатысты белгілі бір ақуыздардың экспрессиясын бақылау үшін реттеуші аймақтарға байланысатын маңызды үнсіздендіру элементі. Хантингтиннің әрекет ету механизмі әлі толыққанды түсініксіз, бірақ ХА дамуында Htt мен REST/NRSF арасында байланыс бар. Мутацияланған аңшылық белдеуі REST/NRSF-ке байланысып, үнсіздендіру элементінің әрекетін тежейді және оны цитозольде ұстап тұрады. Осылайша, REST/NRSF ядроға еніп, 21 базалық жұптан тұратын RE1/NRSE реттеуші элементіне байланыса алмайды. Белгілі бір мақсатты гендерді тиімді түрде басу өте маңызды, өйткені олардың көптегені нейрондық рецепторлардың, нейротрансмиттерлердің, синаптық көпіршіктердің және каналдық ақуыздардың дұрыс дамуына қатысады. Бұл ақуыздардың дұрыс дамуының жетіспеуі Хантингтон ауруында байқалатын жүйке дисфункцияларына себеп болуы мүмкін. REST/NRSF белсенділігінің төмендеуіне байланысты репрессияның болмауымен қатар, мутацияланған аңшылық белдеуі мидан туындаған нейротроптық фактор (BDNF) генінің транскрипциясын да төмендетуі мүмкін. BDNF орталық және шеткі жүйке жүйесіндегі нейрондардың тірі қалуы мен дамуына әсер етеді. Бұл қалыптан тыс басу BDNF промотор аймағындағы RE1/NRSE аймағының REST/NRSF байланысы арқылы белсендірілуі нәтижесінде пайда болады, бұл BDNF генінің транскрипциясын тоқтатуға әкеледі. Осылайша, BDNF ақуызының аномальды басуы Хантингтон ауруына елеулі әсер етеді.

REST/NRSF және сүтқоректілердің ішкеуін гипертрофиясы бойынша қазіргі зерттеулер

REST/NRSF RE1/NRSE-мен бірлесіп, жүйке жүйесінен тыс жерлерде де реттегіштер және репрессорлар ретінде әрекет етеді. Қазіргі зерттеулер RE1/NRSE белсенділігін жүрекшелік натрий бөлшектегіш пептид (ANP) генінің экспрессиясын реттеумен байланыстырды. АNP геніне тигізетін әсерінен басқа, NRSE тізбегі басқа да жүрек эмбриондық гендерін, мысалы, ми натрий бөлшектегіш пептиді BNP, қаңқа α актині және Na, K – АТФаза α3 суббірлігін реттейді.