Введение

Плоская пластина с множеством "ячеек", используемая в качестве небольших пробирок. Географическое применение.

Микропластина, также известная как микротитровальная пластина, пластина с микролунками или многоячеечная пластина, представляет собой плоскую пластину с множеством "ячеек", используемых в качестве небольших пробирок. Микропластина стала стандартным инструментом в аналитических исследованиях и клинических диагностических лабораториях. Наиболее распространенное применение – иммуноферментный анализ (ELISA), который лежит в основе большинства современных медицинских диагностических тестов для людей и животных. Микропластина обычно имеет 6, 12, 24, 48, 96, 384 или 1536 ячеек для образцов, расположенных в прямоугольной матрице 2:3. Некоторые микропластины изготавливаются с 3456 или 9600 ячейками, а также разработан продукт в виде "ленты с массивом", который представляет собой непрерывную полосу микропластин, отформованную на гибкой пластиковой ленте. Каждая ячейка микропластины обычно вмещает от десятков нанолитров до нескольких миллилитров жидкости. Они также могут использоваться для хранения сухого порошка или в качестве держателей для стеклянных пробирок. Ячейки могут быть круглыми или квадратными. Для хранения соединений предпочтительны квадратные ячейки с плотно прилегающими силиконовыми матами. Микропластины могут храниться при низких температурах в течение длительного времени, могут нагреваться для увеличения скорости испарения растворителя из ячеек и даже могут быть герметично запаяны фольгой или прозрачной пленкой. В начале 1980-х годов несколько компаний разработали микропластины со встроенным слоем фильтрующего материала, и сегодня существуют микропластины практически для любого применения в биологических исследованиях, включающих фильтрацию, разделение, оптическое детектирование, хранение, смешивание реакций, культивирование клеток и обнаружение антимикробной активности. Огромный рост исследований целых живых клеток привел к появлению совершенно новой линейки продуктов микропластин, специально обработанных для "культивирования тканей". Поверхности этих продуктов модифицируются с помощью плазменной обработки кислородом, чтобы сделать их более гидрофильными, облегчая рост адгезивных клеток на поверхности, которая в противном случае была бы сильно гидрофобной. Ряд компаний разработали роботов, специально предназначенных для работы с микропластинами. Эти роботы могут быть жидкостными манипуляторами, которые аспирируют или дозируют жидкие образцы из и в эти пластины, или "переносчиками пластин", которые транспортируют их между приборами, штабелерами пластин, которые хранят микропластины во время этих процессов, "отелями для пластин" для долгосрочного хранения, мойками пластин для обработки пластин, термозапечатывателями пластин для нанесения герметичных швов, распаятелями для удаления герметичных швов или инкубаторами для микропластин, обеспечивающими постоянную температуру во время тестирования. Компании, производящие приборы, разработали приборы для чтения пластин, которые могут обнаруживать специфические биологические, химические или физические события в образцах, хранящихся на этих пластинах. Также был разработан специализированный прибор для чтения пластин, который может осуществлять контроль качества содержимого ячеек микропластин, способный идентифицировать пустые ячейки, заполненные ячейки и осадок.

Форматы и усилия по стандартизации

Микропластины производятся с одинаковым стандартизированным размером, но в различных форматах (см. таблицу ниже), из разных материалов (см. раздел выше), с разной высотой пластины, количеством лунок, формой лунок и высотой дна лунок, при этом некоторые из этих характеристик более вариативны у разных производителей, чем другие (см. раздел ниже).

лунки объем (мл) количество расположение
6 2×3 2 – 5
12 3×4 2 – 4
24 4×6 0.5 – 3
48 6×8 0.5 – 1.5
96 8×12 0.1 – 0.3
384 16×24 0.03 – 0.1
1536 32×48 0.005 – 0.015; Применение в UHTS (Ultra HTS)
3456 48×72 0.001 – 0.005; Применение в UHTS (Ultra HTS).

Также существуют менее распространенные микропластины с 192 и 768 лунками.

Стандартизация

Попытка стандартизации микропластин была предпринята Обществом биомолекулярных наук на основе стандартов ANSI (ANSI/SBS 1 2004, ANSI/SBS 2 2004, ANSI/SBS 3 2004, ANSI/SBS 4 2004). Эти стандарты были обновлены и теперь известны как стандарты ANSI/SLAS.

Стандартная высота микропластинки

Высота стандартной микропластины также определена, однако производители иногда не соответствуют ей, даже если они соблюдают стандарты по габаритам и фланцам. Высота (14,35 мм ± 0,76 мм)

Варианты микропластин с увеличенной высотой

Существуют также глубокие микропластины, иногда называемые "блоками". В отличие от пластин стандартной высоты, стандарт ANSI SLAS 2 2004 не определяет стандартную высоту для глубоких микропластин (блоков). Глубокие микропластины обычно соответствуют фактическому стандарту высоты 44 мм. Также в продаже имеются резервуарные пластины. Резервуарные пластины имеют колонки лунок (например, 96-луночные, 24-луночные и т.д.), объединенные в единые лунки, что обеспечивает дополнительный объем для многоканальных пипеток. Как и глубокие микропластины или блоки, они часто соответствуют фактическому стандарту высоты 44 мм.

Юбки

Микропластины, используемые для ПЦР, имеют значительно меньшую толщину стенок, чем стандартные микропластины ANSI/SLAS (для лучшей теплопроводности), и выпускаются с различными типами "боковых стенок" (или "полей"): с полными боковыми стенками, с полубоковыми стенками, без боковых стенок. Боковые стенки аналогичны размерам и фланцам, определенным в стандартах ANSI/SLAS, поэтому, хотя большинство микропластин для ПЦР с полными боковыми стенками могут соответствовать стандартам ANSI/SLAS, другие варианты, такие как полубоковые стенки или отсутствие таковых, этим стандартам не соответствуют.

История

Первая микропластина была создана в 1951 году венгром, доктором Дьюлой Такачи, который обработал шесть рядов по 12 "ячеек" в люците. Впоследствии доктор Джон Луис Север модифицировал венгерскую конструкцию, создав 96-луночную пластину, которую он опубликовал в 1962 году. Однако широкое использование микропластин началось в конце 1980-х годов, когда Джон Линер представил литую версию. К 1990 году более 15 компаний производили широкий ассортимент микропластин с различными характеристиками. По оценкам, только в 2000 году было использовано 125 миллионов микропластин. Слово "Microtiter" является зарегистрированным товарным знаком Thermo Electron OY. Другие торговые названия микропластин включают Viewplate и Unifilter (представленные в начале 1990-х годов компанией Polyfiltronics и продаваемые компанией Packard Instrument, которая в настоящее время является частью PerkinElmer). В 1996 году Общество биомолекулярного скрининга (SBS), позднее известное как Общество биомолекулярных наук, инициировало разработку стандартного определения микропластинки. В 2003 году был предложен ряд стандартов, опубликованных Американским национальным институтом стандартов (ANSI) от имени SBS. Стандарты регулируют различные характеристики микропластинок, включая позиционирование ячеек (но не их форму, глубину и диаметр), а также свойства пластин, что обеспечивает совместимость между микропластинами, приборами и оборудованием от разных поставщиков и особенно важно для лабораторной автоматизации. В 2010 году Общество биомолекулярных наук объединилось с Ассоциацией по лабораторной автоматизации (ALA) и образовало новую организацию – Общество лабораторной автоматизации и скрининга (SLAS). С тех пор стандарты микропластин известны как стандарты ANSI SLAS.