Введение

Тонкий, плоский кусок стекла, на который помещают образец для исследования под микроскопом. Микроскопическое предметное стекло – это тонкий плоский кусок стекла, обычно размером 75 x 26 мм (3 x 1 дюйм) и толщиной около 1 мм, используемое для фиксации объектов при исследовании под микроскопом. Как правило, объект монтируется (закрепляется) на стекле, после чего оба вместе помещаются в микроскоп для наблюдения. Такая конструкция позволяет быстро вставлять и извлекать из микроскопа несколько предметных стекол, маркировать их, транспортировать и хранить в специальных кассетах или папках для стекол и т.п. Микроскопические предметные стекла часто используются вместе с покровным стеклом – более тонким и меньшим по размеру стеклянным листом, который накладывается на образец. Предметные стекла фиксируются на предметном столике микроскопа с помощью держателей для стекол, зажимов или крестового стола, обеспечивающего точное дистанционное перемещение стекла по столику (например, в автоматизированных/компьютерных системах, или когда прикосновение к стеклу руками нежелательно из-за риска загрязнения или недостаточной точности).

История

Источником этой концепции были кусочки слоновой кости или кости, содержащие препараты, зажатые между дисками из прозрачной слюды, которые вставлялись в зазор между предметным столиком и объективом. Эти "слайдеры" были популярны в викторианской Англии, пока Королевское микроскопическое общество не ввело стандартизированные стеклянные предметные стекла.

Размеры и типы

Стандартный предметный слайд имеет размеры примерно 75 мм x 25 мм (3″ x 1″) и толщину около 1 мм. Доступны различные другие размеры для различных специальных целей, такие как 75 x 50 мм для геологических исследований, 46 x 27 мм для петрографических исследований и 48 x 28 мм для тонких шлифов. Слайды обычно изготавливаются из обычного стекла, а их края часто подвергаются тонкой шлифовке или полировке. Предметные слайды обычно изготавливаются из оптического стекла, такого как содово-известковое стекло или боросиликатное стекло, но также используются специальные пластики. Кварцевые слайды часто используются, когда важна прозрачность в ультрафиолетовом диапазоне, например, в флуоресцентной микроскопии. Хотя наиболее распространены обычные слайды, существует несколько специализированных типов. Слайды с вогнутостями или лунками имеют одну или несколько неглубоких выемок ("ямок"), предназначенных для удержания немного более толстых объектов, а также определенных образцов, таких как жидкости и клеточные культуры. Различные постоянные маркировки или маски могут быть нанесены производителем на поверхность методом печати, пескоструйной обработки или осаждения, обычно с использованием инертных материалов, таких как PTFE. Некоторые слайды имеют матовую или эмалевую область на одном конце для нанесения надписей карандашом или ручкой. На слайды могут быть нанесены специальные покрытия производителем, например, для химической инертности или усиления адгезии клеток. Покрытие может иметь постоянный электрический заряд для удержания тонких или порошкообразных образцов. Распространенные покрытия включают поли-L-лизин, силаны, эпоксидные смолы.

Монтаж

Для успешного наблюдения часто критически важно правильно монтировать образцы на предметные стекла. Эта проблема привлекала большое внимание в течение последних двух столетий и является хорошо разработанной областью с множеством специализированных и иногда весьма сложных техник. Образцы часто фиксируются на месте с помощью небольших стеклянных покровных стекол. Основная функция покровного стекла – прижимать твердые образцы, обеспечивая их плоское положение, и формировать жидкие образцы в плоский слой одинаковой толщины. Это необходимо, поскольку микроскопы высокого разрешения имеют очень узкую область фокусировки. Покровное стекло часто выполняет и другие функции. Оно удерживает образец на месте (либо весом покровного стекла, либо, в случае влажного препарата, за счет поверхностного натяжения) и защищает образец от пыли и случайных повреждений. Оно предохраняет объектив микроскопа от контакта с образцом и наоборот; при иммерсионной микроскопии в масло или воде покровное стекло предотвращает контакт иммерсионной жидкости с образцом. Покровное стекло можно приклеивать к предметному стеклу для герметизации образца, замедляя его обезвоживание и окисление, а также предотвращая загрязнение. Используется ряд герметиков, включая промышленные герметики, лабораторные препараты или даже обычный прозрачный лак для ногтей, в зависимости от типа образца. В качестве герметика, не содержащего растворителей и подходящего для живых клеток, можно использовать "валап" – смесь вазелина, ланолина и парафина в равных пропорциях. Покровные стекла доступны в различных размерах и толщинах. Использование неподходящей толщины может привести к сферической аберрации и снижению разрешения и интенсивности изображения. Для наблюдения образцов без покровных стекол могут использоваться специальные объективы, или они могут быть оснащены коррекционными кольцами, позволяющими пользователю компенсировать использование покровных стекол другой толщины.

Сухой монтаж

В сухом монтаже, самом простом способе монтажа, объект просто помещают на предметное стекло. Сверху может быть установлено покровное стекло для защиты образца и объектива микроскопа, а также для фиксации образца и прижатия его к стеклу. Этот метод успешно применяется для наблюдения образцов, таких как пыльца, перья, волосы и т.п. Он также используется для изучения частиц, уловленных на прозрачных мембранных фильтрах (например, при анализе пыли в воздухе).

Мокрый или временный монтаж

В водном препарате образец помещают в каплю йода или другой жидкости, удерживаемую между предметным и покровным стеклами благодаря поверхностному натяжению. Этот метод часто используется, например, для наблюдения за микроскопическими организмами, растущими в прудовой воде или других жидких средах, особенно в озерах.

Подготовленная крепление или постоянное крепление

Для патологических и биологических исследований образец обычно подвергается сложной гистологической подготовке, включающей фиксацию для предотвращения разложения, удаление содержащейся в нем воды, замену воды парафином, нарезку на очень тонкие срезы с помощью микротома, нанесение срезов на предметное стекло, окрашивание ткани различными красителями для выявления специфических структурных компонентов, просветление ткани для придания ей прозрачности и покрытие покровным стеклом с использованием среды для монтажа.

Стрейн-маунт

Рассеянный метод монтажа описывает создание палинологических микроскопических препаратов путем суспендирования концентрированного образца в дистиллированной воде, нанесения суспензии на предметное стекло и последующего испарения воды.

Подвесные средства

Подвесная среда – это раствор, в котором помещают образец, как правило, под покровным стеклом. Простые жидкости, такие как вода или глицерин, могут рассматриваться как подвесные среды, хотя этот термин обычно относится к соединениям, которые затвердевают, образуя постоянную подложку. Популярные подвесные среды включают Permount, Hoyer's mounting medium и альтернативный глицериновый гель. Свойства хорошей подвесной среды включают в себя показатель преломления, близкий к показателю преломления стекла (1,518), нереактивность по отношению к образцу, стабильность с течением времени без кристаллизации, потемнения или изменения показателя преломления, растворимость в среде, в которой образец был подготовлен (либо водной, либо неполярной, такой как ксилен или толуол), а также отсутствие выцветания или вымывания красителя образца.

В отличие от других типов/значений "монтаж"

В отличие от монтажа, необходимого для стеклянных покровных стекол, схожий монтаж может быть выполнен для сохранения более крупных образцов в стеклянных контейнерах в музеях. Однако для подготовки образцов используется совершенно иной тип монтажа, который может применяться как к биологическим, так и к небиологическим материалам и подразделяется на процессы "горячего" (компрессионного) и "холодного" (заливочного) монтажа. Несмотря на название "монтаж", он больше напоминает встраивание в гистологии и не должен смешиваться с монтажом, описанным выше. Термин "монтаж" имеет множество других значений в других областях.