Эндофиты: симбионты растений – бактерии и грибы.

Введение

Эндосибиотическая бактерия или гриб

Эндофит – это эндосимбионт, часто бактерия или гриб, который обитает внутри растения на протяжении, по крайней мере, части его жизненного цикла, не вызывая видимых признаков заболевания. Эндофиты широко распространены и обнаружены во всех изученных на сегодняшний день видах растений; однако большинство взаимодействий между эндофитами и растениями изучены недостаточно. Некоторые эндофиты могут способствовать росту растения и усвоению питательных веществ, а также повышать его устойчивость к абиотическим стрессам, таким как засуха, и снижать биотические стрессы, усиливая сопротивляемость растениям к насекомым, патогенам и травоядным. Хотя эндофитические бактерии и грибы изучаются наиболее часто, эндофитические археи все чаще рассматриваются в контексте их роли в стимулировании роста растений как части основного микробиома растения.

История

Эндофиты были впервые описаны немецким ботаником Иоганном Генрихом Фридрихом Линком в 1809 году. Считалось, что это паразитические грибы растений, а позже французский ученый Бешам назвал их "микрозимами". Бытовало мнение, что растения здоровы в стерильных условиях, и лишь в 1887 году Виктор Галиппе обнаружил бактерии, обычно обитающие внутри растительных тканей. Однако, несмотря на то, что большинство эндофитных исследований сообщают о взаимовыгодных отношениях бактерий и грибов, Das et al., (2019) сообщили об эндофитном вироме и его возможной роли в механизмах защиты растений.

Трансмиссия

Эндофиты могут передаваться как вертикально (непосредственно от родительского растения к потомству), так и горизонтально (между отдельными растениями). Вертикально передающиеся грибковые эндофиты обычно рассматриваются как клональные и передаются посредством грибных гиф, проникающих в эмбрион внутри семян растения-хозяина, тогда как размножение грибов бесполыми конидиями или половыми спорами приводит к горизонтальной передаче, при которой эндофиты могут распространяться между растениями в популяции или сообществе.

Симбиоз

Большинство взаимодействий растений с эндофитами до сих пор изучены недостаточно. Однако недавно было показано, что эндофиты передаются из поколения в поколение через семена в процессе, называемом вертикальной передачей. Эндофиты и растения часто вступают во взаимовыгодные отношения, при которых эндофиты прежде всего способствуют здоровью и выживанию растения-хозяина, помогая справляться с такими проблемами, как патогены и болезни, водный стресс, тепловой стресс, доступность питательных веществ, плохое качество почвы, засоленность и поедание травоядными. Эндофиты могут активизироваться и размножаться в определенных условиях окружающей среды или когда растения-хозяева испытывают стресс или начинают стареть, тем самым ограничивая количество углерода, предоставляемого эндофиту. Эндофиты могут приносить пользу растениям-хозяевам, предотвращая колонизацию другими патогенными или паразитическими организмами. Эндофиты способны активно колонизировать ткани растений и вытеснять другие потенциальные патогены. Некоторые грибные и бактериальные эндофиты доказали свою способность стимулировать рост растений и повышать их общую устойчивость. Исследования показали, что эндофитные грибы растут в тесном взаимодействии с клетками растений-хозяев. Грибные гифы наблюдаются растущими либо приплюснутыми, либо вклинивающимися между растительными клетками. Такой характер роста указывает на то, что грибные гифы прочно прикреплены к клеточной стенке растения-хозяина, но не проникают внутрь клеток. Эндофитные грибные гифы, по-видимому, растут с той же скоростью, что и листья растения-хозяина, в межклеточных пространствах растительной ткани. Было показано, что присутствие определенных грибных эндофитов в меристемах, листьях и репродуктивных структурах хозяина значительно повышает выживаемость последних. Эта повышенная выживаемость во многом обусловлена выработкой эндофитами вторичных метаболитов, защищающих от поедания травоядными, а также увеличением поглощения питательных веществ. Существуют данные о том, что растения и эндофиты общаются друг с другом, что может способствовать симбиозу. Например, было показано, что химические сигналы растений активируют экспрессию генов в эндофитах. Один из примеров такого взаимодействия эндосимбионтов наблюдается между двудольными растениями семейства Вьюнковые (Convolvulaceae) и грибами порядка Клавиципитальные (clavicipitaceous fungi). Когда гриб находится в растении, он синтезирует эрголиновые алкалоиды с более высокой скоростью, чем при выращивании вне растения. Это подтверждает гипотезу о том, что для индукции экспрессии эндофитических вторичных метаболитов необходима сигнализация растений.

Most endophyte plant relationships are still not well understood. However, recently it was shown that endophytes are transmitted from one generation to another via seeds, in a process called vertical transmission. Endophytes and plants often engage in mutualism, with endophytes primarily aiding in the health and survival of the host plant with issues such as pathogens and disease, water stress, heat stress, nutrient availability and poor soil quality, salinity, and herbivory. Endophytes may become active and reproduce under specific environmental conditions or when their host plants are stressed or begin to senesce, thereby limiting the amount of carbon provided to the endophyte. Endophytes may benefit host plants by preventing other pathogenic or parasitic organisms from colonizing them. Endophytes can extensively colonize plant tissues and competitively exclude other potential pathogens. Some fungal and bacterial endophytes have proven to increase plant growth and improve overall plant hardiness. Studies have shown that endophytic fungi grow in a very intimate interaction with their host plant cells. Fungal hyphae have been seen growing either flattened or wedged against plant cells. This growth pattern indicates that fungal hyphae are substantially attached to the plant host's cell wall, but do not invade plant cells. Endophytic fungal hyphae appear to grow at the same rate as their host leaves, within the intercellular spaces of the plant tissue. The presence of certain fungal endophytes in host meristems, leaves and reproductive structures has been shown to dramatically enhance the survival of their hosts. This enhanced survivability is largely attributed to endophytic production of secondary metabolites which protect against herbivory as well as increased uptake of nutrients. There is evidence that plants and endophytes engage in communication with each other that can aid symbiosis. For example, plant chemical signals have been shown to activate gene expression in endophytes. One example of this plant endosymbiont interaction occurs between dicotyledonous plants in the Convolvulaceae and clavicipitaceous fungi. When the fungus is in the plant it synthesizes ergoline alkaloids at a higher rate, compared to when it is grown apart from the plant. This supports the hypothesis that plant signaling is required in order to induce expression of endophytic secondary metabolites.

Влияние на поведение растений

Изучалось различное поведение, возникшее в результате эндофитного симбиоза с растениями. Было показано, что ассоциация с грибковыми эндофитами приводит к удлинению корневых и побеговых структур саженцев *Pseudotsuga menziesii* (дугласской ели) в условиях низкого содержания питательных веществ, а также к увеличению общей биомассы. Предполагаемые механизмы включают высокую способность грибов к растворению неорганических фосфатов и минерализации органических фосфатов, усиление микоризных ассоциаций за счет колонизации корней и повышение поглощения азота и фосфора. Кроме того, различные исследования эндофитных взаимодействий показали повышение фотосинтетической активности растений-хозяев и улучшение водного режима. Улучшение эффективности использования воды наблюдалось при более высоких концентрациях, а дальнейшее увеличение – в условиях водного дефицита. Однако специфические биохимические механизмы, лежащие в основе этих поведенческих изменений, до сих пор в значительной степени неизвестны, и низкоуровневые сигнальные каскады еще предстоит изучить. Более того, хотя преимущества эндофитных отношений хорошо изучены, их издержки изучены меньше, например, конкретные углеродные затраты, система регуляции эндофитов и условия окружающей среды, способствующие установлению оптимальных отношений между растением и эндофитом. Уникальным для данного эксперимента был механизм, посредством которого это происходило. В результате инокуляции наблюдалась активация генов, связанных с производством жасмоновой кислоты и этилена в корнях растений, хотя механизм этого явления остается неизвестным. Также было показано, что происходит регуляция генов, связанных с синтезом индолуксусной кислоты (IAA), что указывает на сложный баланс между этиленом и IAA, поддерживаемый *H. frisingense*. Многие эндофиты относятся к отделам Basidiomycota и Ascomycota. Эндофитные грибы могут относиться к классам Hypocreales и Xylariales из класса Sordariomycetes (Pyrenomycetes) или к классу Loculoascomycetes. Одной из групп грибных эндофитов являются арбускулярные микоризные грибы, включающие биотрофные Glomeromycota, ассоциированные с различными видами растений. Как и другие организмы, связанные с растениями, например, микоризные грибы, эндофиты получают углерод от растения-хозяина. Бактериальные эндофиты полифилетичны и принадлежат к широкому спектру таксонов, включая α-протеобактерии, β-протеобактерии, γ-протеобактерии, Firmicutes и Actinobacteria. Один или несколько эндофитных организмов встречаются почти у каждого наземного растения. Предполагается, что области с высоким разнообразием растений, такие как тропические леса, могут содержать наибольшее разнообразие эндофитных организмов, обладающих новыми и разнообразными химическими метаболитами. По оценкам, в мире может существовать около 1 миллиона эндофитных грибов.

There are various behaviors that have been studied that resulted from endophyte symbiosis with plants. Through association with fungal endophytes, the root and shoot structures of Pseudotsuga menziesii (Douglas fir) saplings in low nutrient conditions have been shown to be elongated, as well as undergo overall biomass increases. The proposed mechanisms behind this include high inorganic phosphate solubilization ability by the fungi as well as organic phosphate mineralization, increased mycorrhizal associations through root colonization, and enhanced nitrogen and phosphorus uptake. Additionally, various reports on endophyte interactions have shown increased photosynthetic capacities of host plants as well as improved water relations. Improvements in water use efficiency were observed in higher concentrations and a further increase was seen in water deficit conditions. However, the specific biochemical mechanisms behind these behavioral changes are still largely unknown and lower level signal cascades have yet to be discovered. Furthermore, while the benefits of endophyte relations are well studied, the costs of these relations are less well understood, such as the specific carbon costs, the system of endophyte governance, and the environmental conditions that facilitate a proper plant endophyte relationship. However, unique to this experiment was the mode by which this was thought to happen. Inoculation saw an upregulation in the genes relevant to jasmonate and ethylene production in the plant roots, although the mechanism to this is still unknown. and was also shown to manage IAA genes, indicating that there is an intricate balance maintained between ethylene and IAA by H. frisingense. Many endophytes are in the phyla Basidiomycota and Ascomycota. Endophytic fungi may be from Hypocreales and Xylariales of the Sordariomycetes (Pyrenomycetes) class or from the class of Loculoascomycetes. One group of fungal endophytes are the arbuscular mycorrhizal fungi involving biotrophic Glomeromycota associated with various plant species. As often with other organisms associated with plants such as mycorrhizal fungus, endophytes gain carbon from their association with the plant host. Bacterial endophytes are polyphyletic, belonging to broad range of taxa, including α Proteobacteria, β Proteobacteria, γ Proteobacteria, Firmicutes, Actinobacteria. One or more endophytic organisms are found in nearly every land plant. It is suggested that areas of high plant diversity such as tropical rainforests may also contain the highest diversity of endophytic organisms that possess novel and diverse chemical metabolites. It has been estimated that there could be approximately 1 million endophytic fungi that exist in the world.

Классификация

Эндофиты включают в себя широкий спектр микроорганизмов, таких как грибы, бактерии и вирусы. Существуют два различных подхода к классификации эндофитов.

Системные и несистемные

Первый метод делит эндофиты на две категории: системные (истинные) и несистемные (временные). Эти категории основаны на генетике, биологии и механизме передачи эндофита от растения к растению. Системные эндофиты определяются как организмы, которые обитают внутри тканей растения на протяжении всего его жизненного цикла и участвуют в симбиотических отношениях, не вызывая при этом никаких заболеваний или вреда растению. Кроме того, концентрация и разнообразие системных эндофитов в растении-хозяине не меняются при изменении условий окружающей среды.

Клавципитациальные и неклавиципитациальные

Второй метод разделяет грибковые эндофиты на четыре группы на основе таксономии и шести других критериев: диапазон хозяев, колонизируемые ткани хозяина, колонизация растений, биоразнообразие в растениях, способ передачи и преимущества для приспособленности. Эти четыре группы делятся на клавиципитацеозные эндофиты (класс 1) и неклавиципитацеозные эндофиты (классы 2, 3 и 4). Эндофиты класса 1 филогенетически связаны между собой и размножаются в злаках как теплого, так и умеренного климата. Они обычно колонизируют побеги растений, где формируют системную межклеточную инфекцию. Эндофиты класса 1 в основном передаются от хозяина к хозяину вертикальным путем, когда материнские растения передают грибы своему потомству через семена. Эндофиты класса 1 могут быть далее разделены на типы I, II и III. Среди этих трех типов клавиципитацеозных эндофитов наблюдаются различные взаимодействия с их растениями-хозяевами, варьирующиеся от патогенных до симбиотических и от проявляющихся симптомами до бессимптомных. Эндофиты клавиципитации III типа растут внутри растения-хозяина, не вызывая симптомов заболевания и не нанося ему вреда. Эндофиты класса 1 обычно приносят пользу растению-хозяину, например, улучшают биомассу растений, повышают устойчивость к засухе и увеличивают выработку химических веществ, токсичных и неприятных для животных, тем самым снижая травоядность. Эти преимущества могут варьироваться в зависимости от хозяина и условий окружающей среды. Использование эндофитов потенциально может увеличить урожайность сельскохозяйственных культур. Семена газонных трав Festuca и Lolium perenne, инфицированные грибковыми инокулянтами Acremonium coenophialum и A. lolii, коммерчески доступны для выращивания газонов, которые могут требовать меньшего использования пестицидов. Эти травы ядовиты для крупного рогатого скота и более устойчивы к некоторым повреждениям насекомыми. По состоянию на 1999 год они доступны только для вышеупомянутых газонных трав, которые продаются как сорта с "низким уровнем обслуживания". Грибы заставляют травы содержать токсичные алкалоиды. Продукты обеспечивают высокую устойчивость к листовым вредителям газона, таким как долгоносики, цикадки, совки, армейские черви и аргентинские стеблевые долгоносики, но обеспечивают небольшую защиту от вредителей корней трав, таких как личинки. Эндофиты могут выживать под воздействием большинства пестицидов и даже устойчивы к некоторым фунгицидам, что делает их очень подходящими для использования в интегрированной защите растений.

The second method divides fungal endophytes into four groups based on taxonomy and six other criteria: host range, host tissues colonized, in planta colonization, in planta biodiversity, mode of transmission and fitness benefits. These four groups are divided into clavicipitaceous endophytes (Class 1) and non clavicipitaceous endophytes (Class 2, 3, and 4). Class 1 endophytes are all phylogenetically related and proliferate within cool and warm season grasses. They typically colonize plant shoots where they form a systemic intercellular infection. Class 1 endophytes are mainly transmitted from host to host by vertical transmission, in which maternal plants pass fungi on to their offspring through seeds. Class 1 endophytes can further be divided into Types I, II and III. Among these three types of clavicipitaceous endophytes are different interactions with their plant hosts. These interaction range from pathogenic to symbiotic and symptomatic to asymptomatic. Type III clavicipitaceous endophytes grow within their plant host without manifesting symptoms of disease or harming their host. Class 1 endophytes typically confer benefits on their plant host such as improving plant biomass, increasing drought tolerance and increasing the production of chemicals that are toxic and unappetizing to animals, thereby decreasing herbivory. These benefits can vary depending on the host and environmental conditions. Use of endophytes might potentially increase crop yields. Turfgrass seed of Festuca and Lolium perenne infected with fungal inoculants, Acremonium coenophialum and A. lolii, is commercially available for use in growing lawns which might require less pesticide use the grasses are poisonous to cattle and more resistant to some insect damage. As of 1999 this is only available in the afore mentioned lawn grasses, which are sold as 'low maintenance' cultivars. The fungi cause the grasses to contain toxic alkaloids. The products provide high resistance to foliar lawn pests such as billbugs, chinch bugs, sod webworms, fall army worms and Argentine stem weevils, but offer little protection to pests of grass roots such as grubs. The endophytes can survive most pesticides and are even resistant to some fungicides, and are very suitable for use in Integrated Pest Management.

Биотопливо

В 2008 году эксперимент с изолятом гриба под названием NRRL 50072 показал, что этот штамм способен производить небольшое количество углеводородных соединений, подобных топливу, что продвигалось как "мико-дизель". Выражалась надежда, что в будущем это может стать потенциальным источником биотоплива. Первоначально гриб был ошибочно идентифицирован как эндофит Gliocladium roseum, но последующие исследования показали, что это на самом деле сапрофит Ascocoryne sarcoides. Штамм эндофитных грибов, тесно связанный с Nigrograna mackinnonii и выделенный из стебля растения Guazuma ulmifolia, собранного в Эквадоре, оказался способен производить разнообразные летучие органические соединения, включая терпены и полиены с нечетным числом атомов углерода в цепи. Полиены, выделенные из этого гриба, обладают свойствами, востребованными в качестве компонентов суррогатных бензиновых биотоплив.

Фиторемедиация

Растения потенциально способны разрушать или секвестрировать, или стимулировать микроорганизмы в почве к разрушению или секвестрированию определенных органических и неорганических загрязнителей, таких как никель, в деградированных экосистемах, что известно как фиторемедиация. В этом эндофиты могут помочь растениям преобразовывать загрязнители в менее биологически опасные формы; в одном из немногих проведенных экспериментов плазмида TOM из штамма бактерии рода Burkholderia, известного как G4, способного разрушать трихлорэтилен (TCE), была перенесена эндофитам популярных деревьев; хотя это не позволило растениям удалить больше этого химического вещества, чем неинокулированным растениям, растения выделяли в воздух меньше TCE. В другом эксперименте бактерии Burkholderia, содержащие плазмиду TOM и гены устойчивости к никелю, были введены в желтую люпину; это увеличило корневую массу растений, но количество выделяемого в воздух TCE не было статистически значимым. Несмотря на эти неудачи, подобные методы могут привести к улучшениям в будущем. Два штамма эндофитных грибов Pestalotiopsis microspora, выделенных из стеблей растений эквадорских тропических лесов, в лабораторных условиях продемонстрировали способность переваривать полиуретановый пластик как единственный источник углерода в анаэробных условиях, хотя многие другие неэндофитные грибы также показали эту способность, и большинство изолированных в этом эксперименте эндофитных грибов могли выполнять это в определенной степени.

Открытие лекарств

Эндофиты производят широкий спектр вторичных метаболитов, которые могут быть полезны в качестве ведущих соединений при разработке лекарств. Биопроспекция эндофитов уже позволила получить соединения с антибактериальными, противогрибковыми, противовирусными и нейропротекторными свойствами. Хорошо известен пример открытия химических веществ, полученных из эндофитных грибов – гриба *Taxomyces andreanae*, выделенного из тихоокеанского тиса *Taxus brevifolia*. *T. andreanae* производит паклитаксел, также известный как таксол, важный препарат для лечения рака. С тех пор были обнаружены другие эндофиты, производящие паклитаксел у различных видов хозяев, однако на сегодняшний день не создан ни один успешный промышленный источник паклитаксела. Два производных фузарубина – ангидрофузарубин и метиловый эфир фузарубина – были выделены из эндофитного гриба *Cladosporium* sp. и проявили цитотоксичность в отношении лейкемии человека (K 562). Кроме того, соединения морского гриба *Nigrospora* sp. проявляют активность против штаммов *Mycobacterium tuberculosis*, устойчивых ко многим лекарственным препаратам. Эндофитный гриб рода *Pseudomassaria* был обнаружен во влажных тропических лесах Демократической Республики Конго. Этот гриб производит метаболит, обладающий потенциалом в качестве антидиабетического средства, также известного как миметик инсулина. Это соединение действует подобно инсулину и, как показано в экспериментах на мышах, снижает уровень глюкозы в крови. Эндофиты *Epichloë* широко используются в коммерческих целях в травяных газонах для повышения их продуктивности и устойчивости к биотическим и абиотическим стрессам. *Piriformospora indica* – интересный эндофитный гриб порядка Себацинальные, способный колонизировать корни и формировать симбиотические отношения со многими растениями. Эндофиты, по-видимому, усиливают рост своих симбиотических хозяев. Они также повышают устойчивость хозяев к абиотическим и биотическим стрессорам, таким как засуха, бедные почвы и поедание травоядными животными. Увеличение роста и устойчивости, вероятно, связано со способностью эндофитов улучшать питание растений или производство вторичных метаболитов, как в случае ингибирования *Phoma eupatoriis* фитопатогена *Phytophthora infestans*. Эндофиты достигают этого, увеличивая поглощение ценных, ограниченных в почве питательных веществ, таких как фосфор, и делая доступными другие питательные вещества для растений, например, фосфат горных пород и атмосферный азот, которые обычно находятся в недоступных для растений формах. Все большее значение придается эндофитам, защищающим ценные сельскохозяйственные культуры от инвазивных насекомых. Один из примеров взаимодействия эндофитов и насекомых растений наблюдается на лугах Новой Зеландии, где эндофиты, известные как AR1 и AR37, используются для защиты ценной овсяницы луговой от аргентинского стеблевого жука, при этом оставаясь привлекательными для другого важного источника пищи – домашнего скота. Обнаружено несколько эндофитов, обладающих инсектицидными свойствами. Один из таких эндофитов происходит от *Nodulisporium* sp., впервые выделенного из растения *Bontia daphnoides*. Из этого эндофита были получены индольные дитерпены, известные как нодулиспориновые кислоты, которые эффективно уничтожают личинок мух. Существует множество препятствий для успешного внедрения эндофитов в сельское хозяйство. Несмотря на многочисленные известные преимущества, которые эндофиты могут приносить своим растениям-хозяевам, традиционные методы ведения сельского хозяйства по-прежнему остаются приоритетными. Современное сельское хозяйство в значительной степени зависит от фунгицидов и высоких доз химических удобрений. Использование фунгицидов оказывает негативное воздействие на эндофитные грибы, а удобрения снижают зависимость растения от его эндофитного симбионта. Тем не менее, интерес и использование биоинсектицидов, а также эндофитов для стимуляции роста растений, возрастают по мере того, как органическое и устойчивое сельское хозяйство приобретает все большее значение. По мере того, как люди осознают ущерб, наносимый синтетическими инсектицидами окружающей среде и полезным насекомым, таким как пчелы и бабочки, биологические инсектициды могут стать более важными для сельскохозяйственной отрасли.

Endophytes produce a wide variety of secondary metabolites that might be useful as lead compounds in drug discovery. Endophyte bioprospecting has already yielded compounds with antibacterial, antifungal, antiviral, neuroprotective,

A well known example of the discovery of chemicals derived from endophytic fungi is from the fungus Taxomyces andreanae isolated from the pacific yew Taxus brevifolia. T. andreanae produces paclitaxel, also known as taxol. This drug is important for the treatment of cancer. Other endophytes since have been discovered that also produce paclitaxel in other host species, but to date there has been no successful industrial source of paclitaxel created. Two fusarubin derivatives: anhydrofusarubin and methyl ether of fusarubin were isolated from endophytic fungus Cladosporium sp. and have shown cytotoxicity against human leukemia (K 562). Also, compounds from the marine fungus Nigrospora sp. have activity against strains of multi drug resistant Mycobacterium tuberculosis. An endophytic fungus of the genus Pseudomassaria has been found in the rainforest of the Democratic Republic of the Congo. This fungus yields a metabolite that shows potential as an antidiabetic, also known as an insulin mimetic. This compound acts like insulin and has been shown to lower blood glucose levels in mouse model experiments. Epichloë endophytes are being widely used commercially in turf grasses to enhance the performance of the turf and its resistance to biotic and abiotic stresses. Piriformospora indica is an interesting endophytic fungus of the order Sebacinales, the fungus is capable of colonising roots and forming symbiotic relationship with many plants. Endophytes appear to enhance the growth of their plant host symbionts. Endophytes also provide their hosts with an increased resilience to both abiotic and biotic stressors such as drought, poor soils and herbivory. The increased growth and resilience is likely caused by the endophytes ability to improve plant nutrition or secondary metabolite production, as in the case of Phoma eupatoriis inhibition of the phytopathogen Phytophthora infestans. Endophytes accomplish this by increasing the uptake of valuable land limited nutrients from the soil such as phosphorus and making other plant nutrients available to plants such as rock phosphate and atmospheric nitrogen which are normally trapped in forms that are inaccessible to plants. Increasingly there has been great importance placed on endophytes that protect valuable crops from invasive insects. One example of an endophyte plant insect interaction is located in the New Zealand grasslands, where endophytes, known as AR1 and AR37 are utilized to protect valuable ryegrass from the Argentine stem weevil but remain palatable to another important food source, livestock. There are several endophytes that have been discovered that exhibit insecticidal properties. One such endophyte comes from the Nodulisporium sp. which was first harvested from the plant Bontia daphnoides. Indole diterpenes, known as nodulisporic acids, have been harvested from this endophyte which have effective insecticidal properties against the blowfly larvae. There are many obstacles to successfully implementing the use of endophytes in agriculture. Despite the many known benefits that endophytes may confer to their plant hosts, conventional agricultural practices continue to take priority. Current agriculture relies heavily on fungicides and high levels of chemical fertilizers. The use of fungicides has a negative effect on endophytic fungi and fertilizers reduce a plant's dependence on its endophytic symbiont. Despite this, the interest and use of bio insecticides and using endophytes to aid in plant growth is increasing as organic and sustainable agriculture is considered more important. As humans become more aware of the damage that synthetic insecticides cause to the environment and beneficial insects such as bees and butterflies biological insecticides may become more important to the agricultural industry.