Ungulate protoparvovirus 1

Введение

Виды вирусов Парвовирус свиней (PPV), вирус из вида Ungulate protoparvovirus 1 рода Protoparvovirus из семейства вирусов Parvoviridae, вызывает репродуктивную недостаточность свиней, характеризующуюся эмбриональной и фетальной инфекцией и смертью, обычно при отсутствии внешних материнских клинических признаков. Болезнь развивается, в основном, когда серонегативные самки подвергаются воздействию вируса через ротоноз в течение первой половины беременности, а потом плодные самки заражаются через трансплаценту до того, как они становятся иммунокомпетентными. Нет окончательных доказательств того, что инфекция свиней, кроме тех, которые находятся в период беременности, имеет какое-либо клиническое или экономическое значение. Вирус повсеместно распространен среди свиней по всему миру и является энзоотическим у большинства стад, которые были протестированы. Диагностические исследования показали, что ВПП является основной инфекционной причиной эмбриональной и фетальной смерти. В дополнение к своей прямой причинной роли в репродуктивной недостаточности, PPV может усиливать эффекты инфекции свиного цирковируса типа II (PCV2) в клиническом течении послеродового мультисистемного синдрома истощения (PMWS).

Признаки и симптомы

Острая инфекция послеродовых свиней, включая беременных маток, у которых впоследствии развивается репродуктивная недостаточность, обычно имеет субклинический характер. Однако у молодых свиней и, вероятно, у старых племенных животных вирус широко реплицируется и обнаруживается во многих тканях и органах с высоким митотическим индексом. Вирусный антиген особенно концентрирован в лимфоидных тканях. Однако нет никаких экспериментальных доказательств того, что PPV либо широко реплицируется в эпителии кишечного крипта, либо вызывает кишечные заболевания, как парвовирусы нескольких других видов. PPV также выделяют у свиней с поражениями, которые описываются как везикулеподобные. Причинная роль PPV в таких поражениях не была четко определена. Основным и, как правило, единственным клиническим ответом на инфекцию PPV является репродуктивная недостаточность матери. Патологические последствия зависят главным образом от того, когда воздействие происходит во время беременности. Женщины могут вернуться к половому созреванию, не рожать, несмотря на то, что они были анеструсными, рожать несколько свиней в помете или рожать большую долю мумифицированных плодов. Все могут отражать эмбриональную или плодовую смерть или и то, и другое. Единственным внешним признаком может быть уменьшение объема брюшной полости матери, когда плоды умирают в середине беременности или позже, и их сопутствующие жидкости резорбируются. Другие проявления репродуктивной недостаточности матери, а именно бесплодие, аборт, мертворождение, смерть новорожденного и снижение жизнеспособности новорожденного, также были связаны с инфекцией PPV. Обычно это лишь незначительная часть заболевания. Присутствие мумифицированных плодов в помете может продлить обе беременности. Нет никаких доказательств того, что фертильность или либидо кабанов изменяется при заражении PPV.

Причина

PPV классифицируется в роде Parvovirus (от латинского parvus = маленький) семейства Parvoviridae. Все сравниваемые изоляты PPV оказались антигенно похожими, если не идентичными. PPV также антигенно связан с несколькими другими членами рода. Однако его идентичность может быть установлена с помощью относительно строгих серологических тестов, таких как нейтрализация вируса (VN) и ингибирование гемаглютинации (HI).

Биофизические и биохимические свойства

Биофизические и биохимические свойства PPV были тщательно изучены и обобщены следующим образом. Зрелый вирион имеет кубическую симметрию, два или три белка капсида, диаметр около 20 нм, 32 капсомеры, нет оболочки или существенных липидов, и вес 5,3 × 106 дальтон. Вирусный геном представляет собой одноцепочечную дезоксирибонуклеиновую кислоту (ДНК) с молекулярной массой 1,4 × 106 (т. е. около 26,5% массы полного вириона). Плотность плавучести (г/мл в хлориде цезия) полных инфекционных вирионов, неполных "пустых" вирионов и экстрагированной ДНК вириона составляет соответственно 1,381,395, 1,301,315 и 1,724. Вирусная инфекционная способность, гемаглютинирующая активность и антигенность замечательно устойчивы к теплу, широкому диапазону концентраций ионов водорода и ферментам.

Репликация

Репликация PPV in vitro цитоцидная и характеризуется "закруглением вверх", пикнозом и лизисом клеток (рис. 1А). Многие фрагменты клеток часто остаются прикрепленными, в конечном итоге придавая пораженной культуре разорванный вид. Внутриядерные включения развиваются Инфицированные культуры могут слегка гемасорбировать Первичные и вторичные культуры клеток почек свиней плода или новорожденного чаще всего используются для размножения и титрования PPV, хотя другие виды культур также восприимчивы. Репликация усиливается инфекцией митотически активных культур. Многие клетки в таких культурах находятся в фазе S (т. е. фазе синтеза ДНК) их клеточного цикла, в которой доступны ДНК-полимеразы клеточного происхождения, необходимые для репликации вируса. Если сыворотка плода или взрослого говядины включена в питательную среду клеточных культур, используемых для распространения PPV, ее следует предварительно проверить на наличие вирусных ингибиторов. То же самое может относиться к сывороткам нескольких других видов. Поскольку репликация PPV зависит от митотической активности, эффект сыворотки на клетки также особенно важен. Кроме того, следует предварительно проверить наличие ВПП в культурах. Свиньи. Кроме того, ВПП может случайно попасть в культуру несколькими способами, включая использование загрязненного трипсина. Если заражение обнаружено до того, как все клетки инфицированы, вирус может быть устранен путем многократного подкультурирования клеток в присутствии питательной среды, содержащей антисером PPV. Несколько исследователей использовали микроскопию IF для наблюдения за развитием PPV в клеточной культуре. В общем, последовательность событий следующая. Вирусный антиген обнаруживается в цитоплазме клеток вскоре после заражения, если инокулум содержит высокий титр вируса и вирусного антигена. Большинство, если не все, из этих ранних цитоплазматических флуоресценции является результатом антигена фагоцитизированы из инокулума. При помощи последовательных исследований такой антиген может быть сначала обнаружен на внешней поверхности цитоплазменной мембраны, а затем внутри цитоплазмы, часто относительно концентрированной в сосновом месте. Первым недвусмысленным доказательством репликации вируса является появление зарождающегося вирусного антигена в ядре (рис. 2А). По крайней мере, в некоторых инфицированных клетках зарождающийся антиген затем появляется в цитоплазме в таком количестве, что и цитоплазма, и ядро ярко флуоресцируют. Инфицированные клетки, обычно встречающиеся в легких плодов, которые развивают высокий титр антител к PPV, вероятно, представляют собой эту стадию репликации (см. рис. 8С). Зараженные клетки затем округляются, становятся пикнотическими и распадаются с выделением вируса и вирусного антигена (рис. 2В). Другие клетки в культуре, которые не находятся на соответствующей стадии для поддержки репликации вируса, продолжают фагоцитизировать и накапливать вирусный антиген в цитоплазме (рис. 2С). Вторая волна репликации вируса может быть вызвана, если эти клетки стимулируются для входа в S- фазу клеточного цикла, например, путем добавления свежей среды культивирования.

Replication of PPV in vitro is cytocidal and characterized by "rounding up," pyknosis, and lysis of cells (Fig. 1A). Many of the cell fragments often remain attached, eventually giving the affected culture a ragged appearance. Intranuclear inclusions develop Infected cultures may hemadsorb slightly

Primary and secondary cultures of fetal or neonatal porcine kidney cells are most often used for propagation and titration of PPV, although other kinds of cultures are also susceptible. Replication is enhanced by infection of mitotically active cultures. Many cells in such cultures are in the S phase (i. e., the DNA synthesis phase) of their cell cycle, wherein the DNA polymerases of cell origin needed for viral replication are available. If either fetal or adult bovine serum is incorporated in the nutrient medium of cell cultures used to propagate PPV, it should be pretested for viral inhibitors. The same may apply to sera of several other species. Because replication of PPV is affected by mitotic activity, the effect of the serum on the cells is also especially important. In addition, cultures should be pretested for PPV contamination. pigs. Moreover, PPV can be accidentally introduced into cultures in several ways, including the use of contaminated trypsin. If contamination is detected before all cells are infected, the virus can be eliminated by repeatedly subculturing the cells in the presence of nutrient medium containing PPV antiserum. Several investigators have used IF microscopy to follow the development of PPV in cell culture. In general, the sequence of events is as follows. Viral antigen is detected in the cytoplasm of cells soon after infection if the inoculum contains a high titer of virus and viral antigen. Most, if not all, of this early cytoplasmic fluorescence is the result of antigen phagocytized from the inoculum. By sequential examinations, such antigen can be demonstrated first on the external surface of the cytoplasmic membrane and later within the cytoplasm, often relatively concentrated in a juxtanuclear location. The first unequivocal evidence of viral replication is the appearance of nascent viral antigen in the nucleus (Fig. 2A). In at least some infected cells, nascent antigen next appears in the cytoplasm in sufficient quantity that both cytoplasm and nucleus are brightly fluorescent. Infected cells commonly seen in the lung of fetuses that develop a high titer of antibody for PPV probably represent this stage of replication (see Fig. 8C). Affected cells subsequently round up, become pyknotic, and disintegrate with release of virus and viral antigen (Fig. 2B). Other cells in the culture that are not at the appropriate stage to support viral replication continue to phagocytize and accumulate viral antigen in their cytoplasm (Fig. 2C). A second wave of viral replication can be induced if these cells are stimulated to enter the S phase of the cell cycle as, for example, by the addition of fresh culture medium.

Гемаглютинация

PPV агглютинирует эритроциты человека, обезьяны, морской свинки, кошки, курицы, крысы и мыши. Эритроциты других видов животных, которые были протестированы, относительно или полностью нечувствительны, или результаты были неоднозначными. Также описаны несколько параметров теста гемагглютинации (ГА), таких как температура инкубации.

Серологические

Тесты Тест HI часто используется для обнаружения и количественного определения гуморальных антител к PPV. Антитела иногда могут быть обнаружены уже через 5 дней после контакта свиней с живым вирусом, и они могут сохраняться в течение многих лет. Тест SN иногда используется для обнаружения и количественного определения гуморальных антител к PPV. Нейтрализация инфекционной способности обычно подтверждается отсутствием или уменьшением внутриядерных включений или флуоресцентных клеток в культурах или вирусного гемаглютинина в среде культуры. Было сообщено, что тест SN более чувствителен, чем тест HI. Описана микротехника применения испытания SN. модифицированный тест непосредственной фиксации комплемента также успешно использовался для выявления антител к ВПП.

Эволюция

Эти вирусы, по-видимому, эволюционировали ~120 лет назад с быстрым увеличением размера их популяции в течение последних 40-60 лет. По-видимому, они первоначально развились у диких кабанов, а затем распространились на домашних свиней. Скорость эволюции была оценена в 3,86 х 10−4 8,23 х 10−4 замещений на место в год. Эта скорость аналогична другим одноцепочечным вирусам ДНК.

Эпидемиология

Парвовирус свиней повсеместно распространен среди свиней во всем мире. В крупных свиноводческих районах, таких как средний запад Соединенных Штатов, инфекция является энзоотической в большинстве стад, и за редким исключением свиноматки имеют иммунитет. Кроме того, большая часть детенышей заражается вирусом ППВ еще до зачатия, и в результате у них развивается активный иммунитет, который, вероятно, сохраняется на протяжении всей жизни. В совокупности, сероэпидемиологические данные указывают на то, что воздействие PPV является распространенным. Они также подчеркивают высокий риск заражения и заболеваний репродуктивной системы у детенышей, у которых до зачатия не развился иммунитет. Наиболее распространенными путями заражения послеродовых и пренатальных свиней являются ораносальный и трансплацентарный. У свиней, кормящих иммунными материками, из молозива поглощается высокий титр антител к PPV. Эти титры постепенно снижаются с течением времени в результате разбавления с ростом свиней, а также в результате биологического разложения. Они обычно достигают поддетектируемого уровня через 3-6 месяцев, если сыворотка исследуется с помощью теста HI. Иногда пассивно приобретенные антитела сохраняются в течение более длительного интервала. Кроме того, уровни антитела, которые слишком низки, чтобы быть обнаруженными тестом HI, могут быть обнаружены тестом SN. Следовательно, некоторые группы женских цыплят не подвержены полностью инфекции и распространению вируса до момента зачатия или в начале беременности. Загрязненные помещения, вероятно, являются основными резервуарами PPV. Вирус термостабилен, устойчив ко многим распространенным дезинфицирующим средствам и может оставаться заразным в течение нескольких месяцев в секретах и экскрециях от остро инфицированных свиней. Экспериментально было показано, что, хотя свиньи передавали ВПП только в течение 2 недель после воздействия, клетки, в которых они первоначально содержались, оставались заразными в течение как минимум 4 месяцев. Повсеместное распространение ВПП также повышает вероятность того, что некоторые свиньи постоянно инфицированы и, по крайней мере, периодически передают вирус. Однако выделение за пределами интервала острой инфекции не было продемонстрировано. Был зарегистрирован возможный пример инфицированного, иммунотолерантного, сексуально активного кабана. Сперма может быть загрязнена внешне, например, фекалиями, содержащими вирус, или внутри мужского репродуктивного тракта. Вирус был выделен из яичка кабана через 5 дней после его инъекции в предкожу кабана и из яичек кабанов, убитых через 5 и 8 дней после того, как они были инфицированы орально-нозально (Mengeling, неопубликованные данные 1976). Вирус также изолировали из мошонных лимфатических узлов кабанов, убитых через 5, 8, 15, 21 и 35 дней после воздействия через ротоносовую полость. После 8 дня изоляция была достигнута путем совместного выращивания фрагментов лимфатических узлов с клетками почек плода свиньи (Mengeling, неопубликованные данные 1976). Независимо от иммунного статуса, кабаны могут также служить средством механического распространения ВПП среди восприимчивых самок.

Porcine parvovirus is ubiquitous among swine throughout the world. In major swine producing areas such as the midwestern United States, infection is enzootic in most herds, and with few exceptions sows are immune. In addition, a large proportion of gilts are naturally infected with PPV before they conceive, and as a result they develop an active immunity that probably persists throughout life. Collectively, the seroepidemiological data indicate that exposure to PPV is common. They also emphasize the high risk of infection and reproductive disease among gilts that have not developed immunity before conception. The most common routes of infection for postnatal and prenatal pigs are oronasal and transplacental respectively. Pigs nursing immune dams absorb a high titer of antibody for PPV from colostrum. These titers decrease progressively with time by dilution as pigs grow as well as by biological degradation. They usually reach subdetectable levels in 3–6 months if sera are examined by the HI test. Sometimes passively acquired antibody persists for a longer interval. Moreover, levels of antibody too low to be detected by the HI test may be detected by the SN test. Consequently, some groups of gilts are not fully susceptible to infection and dissemination of virus until either shortly before conception or during early gestation. Contaminated premises are probably major reservoirs of PPV. The virus is thermostable, is resistant to many common disinfectants, and may remain infectious for months in secretions and excretions from acutely infected pigs. It was shown experimentally that although pigs transmitted PPV for only about 2 weeks after exposure, the pens in which they were initially kept remained infectious for at least 4 months. The ubiquity of PPV also raises the possibility that some pigs are persistently infected and at least periodically shed virus. However, shedding beyond the interval of acute infection has not been demonstrated. A possible example of an infected, immunotolerant, sexually active boar was reported. Semen may be contaminated externally, as for example with viruscontaining feces, or within the male reproductive tract. The virus was isolated from a testicle of a boar 5 days after it was injected into the boar's prepuce and from testicles of boars killed 5 and 8 days after they were infected oronasally (Mengeling, unpublished data 1976). Virus was also isolated from scrotal lymph nodes of boars killed 5, 8, 15, 21, and 35 days after oronasal exposure. After day 8, isolation was accomplished by cocultivating lymph node fragments with fetal porcine kidney cells (Mengeling, unpublished data 1976). Irrespective of their immune status, boars can also function as a vehicle for mechanical dissemination of PPV among susceptible females.

Патогенез

Женщины-основатели подвержены репродуктивной недостаточности, вызванной ВПП, если заражены в любое время примерно в первой половине беременности. Этот интервал восприимчивости матери показан общими результатами нескольких экспериментальных исследований, углубленными эпидемиологическими исследованиями и оценками времени смерти плодов, собранными во время эпидемиологических обследований. Также сообщалось о штамме PPV с немного более высокой вирулентностью. Обычные последствия инфекции на разных стадиях беременности обобщены в таблице 1. Когда только часть помета заражена трансплацентарно, как это часто бывает, один или несколько членов помета часто заражаются последующим внутриматочным распространением вируса. То же самое можно сказать, если первоначальная инфекция была заражена спермой. В результате в одном и том же помете может развиться любая комбинация или все последовательности, указанные в таблице 1. Внутриматочное распространение, вероятно, встречается реже, когда заражены ранние эмбрионы, потому что они быстро резорбируются после смерти, эффективно удаляя внутриматочный резервуар вируса. и хотя, по-видимому, он не может проникнуть в этот слой, предположение, что он может представлять угрозу для эмбриона после вылупления. В любом случае, зараженная через сперму самка является очагом заражения для других. За исключением возможных изменений в матке, упомянутых в предыдущем пункте, репродуктивная недостаточность, вызванная ВПП, вызвана непосредственным воздействием вируса на концептус. При отсутствии иммунного ответа вирус широко реплицируется в этих тканях. К тому времени, когда концептус умирает, большинство его клеток содержат большое количество внутрицитоплазматического вирусного антигена, которое может быть продемонстрировано микроскопией IF. Относительный недостаток ядерной флуоресценции во время смерти, по сравнению с более ранними стадиями заболевания, указывает на то, что при тяжелом поражении концептуса митотическая активность и связанные с ней условия, необходимые для репликации вируса, подавляются больше, чем фагоцитарная активность. Смерть концептуса, вероятно, является результатом коллективного повреждения вирусом различных тканей и органов, включая плаценту. Механизм трансплацентарной инфекции был изучен с помощью микроскопии ИФ для выявления инфицированных клеток в тканях матери и плода через постепенно увеличивающиеся интервалы времени после воздействия материнской полости рта. Каким бы ни был путь, виремия матери, по-видимому, является предпосылкой трансплацентарной инфекции. Когда плоды заражались на ранних сроках беременности (35, 50 и 60 дней), а их матери погибали через 7 и 11 дней, поражения были похожи. Однако поражения матки были более серьезными и включали также обширные наручники миометриальных и эндометриальных сосудов с мононуклеарными клетками. (Рисунок. 7А). Врачи не рекомендуют представлять образцы от мертворожденных свиней и новорожденных свиней, если только они не являются единственными доступными образцами. Если они заражены, их ткани обычно содержат антитела, которые мешают лабораторным тестам на вирус или вирусный антиген. [Файл:Болезни свиней 17 6. пнгххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххххх ППВ-инфицированные плоды. Строки = 5 см. (A) Мясо золотистой кобылы, экспериментально инфицированн...

Dams are susceptible to PPV induced reproductive failure if infected anytime during about the first half of gestation. This interval of maternal susceptibility is indicated by the collective results of several experimental studies, by in depth epidemiological investigations, and by estimates of the time of death of fetuses collected during epidemiological surveys. or longer, A strain of PPV of slightly greater virulence also has been reported. The usual consequences of infection at different stages of gestation are summarized in Table 1. When only part of a litter is infected transplacentally, as is often the case, one or more littermates are frequently infected by subsequent intrauterine spread of virus. The same would apply if initial infection were through contaminated semen. As a result, any combination or all of the sequelae indicated in Table 1 can develop in the same litter. Intrauterine dissemination is probably less common when early embryos are infected because they are quickly resorbed after death, effectively removing the intrauterine reservoir of virus. and although it apparently cannot penetrate this layer, speculation is that it could pose a threat to the embryo after hatching. In any event, a female infected through semen provides a focus of infection for others. With the possible exception of the uterine changes alluded to in the preceding paragraph, PPV induced reproductive failure is caused by the direct effect of the virus on the conceptus. In the absence of an immune response, the virus replicates extensively throughout these tissues. By the time the conceptus dies, most of its cells contain large quantities of intracytoplasmic viral antigen that can be demonstrated by IF microscopy. The relative lack of nuclear fluorescence at the time of death, compared to earlier stages of the disease, indicates that when the conceptus is severely affected, mitotic activity and the associated conditions necessary for viral replication are suppressed more than phagocytic activity. Death of the conceptus probably results from the collective damage by the virus to a variety of tissues and organs, including the placenta. The mechanism of transplacental infection has been investigated by using IF microscopy to identify infected cells in maternal and fetal tissues at progressively longer intervals after maternal oronasal exposure. Whatever the route, maternal viremia seems a likely prerequisite for transplacental infection. When fetuses were infected earlier in gestation (35, 50, and 60 days) and their dams were killed 7 and 11 days later, the lesions were similar. However, uterine lesions were more severe and also included extensive cuffing of myometrial and endometrial vessels with mononuclear cells. (Fig. 7A). Inflammation stillborn pigs, and neonatal pigs are not recommended for submission unless they are the only samples available. If infected, their tissues will usually contain antibody that interferes with laboratory tests for either virus or viral antigen. [[File:Diseases of Swine 17 6. png|thumb|left|Figure 6. PPV infected fetuses. Bars = 5 cm. (A) Litter of a gilt experimentally infected oronasally on day 47 of gestation and killed 34 days later; fetuses from left (L) and right (R) horn of uterus, numbered 1–4 from cervix toward ovary; fetuses L1 and L4 stunted but alive at necropsy, fetus L3 recently dead, others later stages. (B) Fetuses from litter of a naturally infected gilt, collected at about 114 days of gestation, advanced stage of dehydration (mummification). Identification of viral antigen by IF microscopy is a reliable and sensitive diagnostic procedure. Sections of fetal tissues are prepared with a cryostat microtome and are then reacted with standardized reagents. Tissues are triturated in diluent and then sedimented by centrifugation. The supernatant fluid is tested for agglutinating activity for guinea pig erythrocytes. This test requires a minimum of laboratory equipment and is effective in the absence of antibody. thumb|Figure 7. Tissues of PPV infected fetuses of gilts experimentally infected oronasally. (A) Necrotic focus in liver of live fetus of a gilt infected on day 40 of gestation and killed 42 days later; fetus had numerous macroscopic lesions (H&E; ×400). (B) Perivascular cuffing with mononuclear cells in cerebrum of live fetus, littermate of A; fetus had no macroscopic lesions (H&E; ×320). (Insert) Viral antigen associated with endothelium of cerebral vessel of fetus of a gilt infected on day 46 of gestation and killed 25 days later (IF microscopy; ×312.5). All fetuses were probably infected by intrauterine spread of PPV from transplacentally infected littermates. (Photographs A and B courtesy of T. T. Brown Jr., National Animal Disease Center.) Virus isolation is less suitable as a routine diagnostic procedure than either of the aforementioned tests. Infectivity is slowly but progressively lost after fetal death;

In general, serologic procedures are recommended for diagnosis only when tissues from mummified fetuses are not available for testing as previously described. Results with maternal sera are of value if antibody is not detected, thus excluding PPV as a cause, and if samples collected at intervals reveal seroconversion for PPV coincident with reproductive failure. When serum is not available, body fluids collected from fetuses or their viscera that have been kept in a plastic bag overnight at 4?C have been used successfully to demonstrate antibody. [[File:Diseases of Swine 17 8. png|thumb|left|Figure 8. Cryostat microtome sections of lungs of PPV infected fetuses examined by IF microscopy. (A) Lung of mummified fetus reacted with FA plus nonimmune serum (×312.5). (B) Replicate section reacted with FA plus PPV immune serum (i. e., blocking control) (×312.5). (C) Lung of live fetus with HI antibody titer of 640 reacted with fluorescent antibodies (FA) plus nonimmune serum, two infected cells (arrow) (× 162.5). (Insert) Two similar infected cells in the same section as C (×500). and modified live virus (MLV) vaccines have been developed. An inactivated vaccine has been tested under field conditions, and both types of vaccines were effective when tested under controlled laboratory conditions. These limits may define a very brief interval for effective vaccination of gilts that are bred before 7 months of age. Although inactivated vaccine provides maximum safety, there is experimental evidence that PPV can be sufficiently attenuated so that it is unlikely to cause reproductive failure even if inadvertently administered during gestation. Moreover, it has been shown by transuterine inoculation of both virulent and attenuated virus that a much larger dose of attenuated virus is required to establish infection of fetuses. Duration of immunity following vaccination is unknown; however, in one study antibody titers were maintained for at least 4 months after administration of an inactivated vaccine. Low levels of antibody found to be protective allow speculation that, once the immune system has been primed with PPV, subsequent exposure to virulent virus during gestation is unlikely to result in transplacental infection even if antibody from vaccination is no longer detected. Vaccination is recommended also for seronegative sows and boars. Seronegative sows are usually found only in PPV free herds; in such cases, inactivated vaccine is indicated. Experience has shown that few herds can be expected to remain free of PPV even if access is carefully controlled. Introduction of PPV into a totally susceptible herd can be disastrous. Vaccination of boars should reduce their involvement in dissemination of the virus. Vaccines are used extensively in the United States and in several other countries where PPV has been recognized as an economically important cause of reproductive failure. All federally licensed vaccines marketed in the United States are inactivated.