Сравнивайте с английским: нажмите на абзац — оригинал откроется в окне. Кнопка EN под абзацем показывает его прямо в тексте.
Содержание
Введение
Форма клонирования
Form of cloning
Перенос ядра – это форма клонирования. Процедура включает в себя удаление ДНК из ооцита (неоплодотворенной яйцеклетки) и введение ядра, содержащего ДНК, подлежащую клонированию. В редких случаях новообразованная клетка начинает делиться нормально, реплицируя новую ДНК и оставаясь в плюрипотентном состоянии. Если клонированные клетки помещают в матку самки млекопитающего, в редких случаях клонированный организм развивается до конца срока вынашивания. Именно так были клонированы овца Долли и многие другие виды. Коров обычно клонируют для отбора особей с наилучшей молочной продуктивностью. 24 января 2018 года было сообщено о создании двух клонов обезьян с использованием этой техники впервые. Однако низкая эффективность метода заставила некоторых исследователей, в частности Иана Вильмута, создателя клонированной овцы Долли, отказаться от его использования.
Nuclear transfer is a form of cloning. The step involves removing the DNA from an oocyte (unfertilised egg), and injecting the nucleus which contains the DNA to be cloned. In rare instances, the newly constructed cell will divide normally, replicating the new DNA while remaining in a pluripotent state. If the cloned cells are placed in the uterus of a female mammal, a cloned organism develops to term in rare instances. This is how Dolly the Sheep and many other species were cloned. Cows are commonly cloned to select those that have the best milk production. On 24 January 2018, two monkey clones were reported to have been created with the technique for the first time. Despite this, the low efficiency of the technique has prompted some researchers, notably Ian Wilmut, creator of Dolly the cloned sheep, to abandon it.
Инструменты и реагенты
Передача ядра – деликатный процесс, являющийся серьезным препятствием в развитии технологии клонирования. Для проведения этой процедуры используются микроскоп, пипетка-держатель (создающая небольшой вакуум) для фиксации яйцеклетки, и микропипетка (очень тонкая игла) для извлечения ядра клетки с помощью вакуума. Для некоторых видов, например, мышей, используется дрель для прокола внешних слоев яйцеклетки. Различные химические реагенты применяются для повышения эффективности клонирования. Ингибиторы микротрубочек, такие как нокодазол, используются для остановки яйцеклетки в метафазе (M-фазе), в ходе которой ее ядерная мембрана разрушается. Химические вещества также используются для стимуляции активации яйцеклетки. При их применении мембрана полностью растворяется.
Nuclear transfer is a delicate process that is a major hurdle in the development of cloning technology. Materials used in this procedure are a microscope, a holding pipette (small vacuum) to keep the oocyte in place, and a micropipette (hair thin needle) capable of extracting the nucleus of a cell using a vacuum. For some species, such as mouse, a drill is used to pierce the outer layers of the oocyte. Various chemical reagents are used to increase cloning efficiency. Microtubule inhibitors, such as nocodazole, are used to arrest the oocyte in M phase, during which its nuclear membrane is dissolved. Chemicals are also used to stimulate oocyte activation. When applied the membrane is completely dissolved.
Передача ядра соматической клетки
Соматическая клеточная ядерная передача (SCNT) – это процесс, при котором ядро ооцита (яйцеклетки) удаляется и заменяется ядром соматической (телесной) клетки (например, клетки кожи, сердца или нервной клетки). Эти две структуры сливаются, и факторы, содержащиеся в ооците, вызывают перепрограммирование соматического ядра в плюрипотентное состояние. Клетка содержит генетическую информацию, идентичную генетическому материалу донорской соматической клетки. После стимуляции клетки к делению, при подходящих условиях развивается эмбрион. Стволовые клетки можно извлечь через 5–6 дней для использования в исследованиях.
Somatic Cell Nuclear Transfer (SCNT) is the process by which the nucleus of an oocyte (egg cell) is removed and is replaced with the nucleus of a somatic (body) cell (examples include skin, heart, or nerve cell). The two entities fuse to become one and factors in the oocyte cause the somatic nucleus to reprogram to a pluripotent state. The cell contains genetic information identical to the donated somatic cell. After stimulating this cell to begin dividing, in the proper conditions an embryo will develop. Stem cells can be extracted 5–6 days later and used for research.
Перепрограммирование
Геномное перепрограммирование – это ключевой биологический процесс, лежащий в основе переноса ядра. Неидентифицированные на данный момент факторы перепрограммирования, присутствующие в яйцеклетках, способны запускать каскад событий, возвращающих зрелую, специализированную клетку в недифференцированное эмбриональное состояние. Предполагается, что эти факторы в основном представляют собой белки ядра.
Genomic reprogramming is the key biological process behind nuclear transfer. Currently unidentified reprogramming factors present in oocytes are capable of initiating a cascade of events that can reset the mature, specialized cell back to an undifferentiated, embryonic state. These factors are thought to be mainly proteins of the nucleus.