Введение
Вирусное заболевание птицы
Инфекционная бурсальная болезнь (IBD), также известная как болезнь Гумборо, инфекционный бурсит и инфекционный нефроз птиц, – это высококонтагиозное заболевание молодых цыплят и индеек, вызываемое вирусом инфекционной бурсальной болезни (IBDV), характеризующееся иммуносупрессией и смертностью, обычно в возрасте от 3 до 6 недель. Болезнь была впервые обнаружена в Гумборо, штат Делавэр, в 1962 году. Она имеет большое экономическое значение для птицеводческой отрасли во всем мире из-за повышенной восприимчивости к другим заболеваниям и негативного воздействия на эффективность вакцинации. В последние годы в Европе, Латинской Америке, Юго-Восточной Азии, Африке и на Ближнем Востоке появились высоковирулентные штаммы IBDV, вызывающие высокую смертность у цыплят. Инфекция происходит фекально-оральным путем, при этом пораженные птицы выделяют высокие уровни вируса в течение примерно 2 недель после заражения. Болезнь легко распространяется от инфицированных птиц к здоровым через корм, воду и прямой контакт.
Вирусология
IBDV – это вирус с двухцепочечной РНК, имеющий геном, состоящий из двух сегментов, и относящийся к роду Avibirnavirus семейства Birnaviridae. Существует два различных серотипа вируса, но заболевание у птицы вызывают только вирусы серотипа 1. Методом кросс-нейтрализации in vitro было идентифицировано как минимум шесть антигенных подтипов IBDV серотипа 1. Вирусы, принадлежащие к одному из этих антигенных подтипов, обычно называют вариантами, которые, как сообщается, преодолевают высокие уровни материнских антител в коммерческих стадах, вызывая смертность от 60 до 100 процентов у цыплят. С появлением высокочувствительных молекулярных методов, таких как обратная транскрипция полимеразной цепной реакции (ОТ-ПЦР) и полиморфизм длин рестрикционных фрагментов (ПДРФ), стало возможным обнаруживать vvIBDV, дифференцировать штаммы IBDV и использовать эту информацию для изучения молекулярной эпидемиологии вируса. Геном IBDV состоит из двух сегментов, A и B, заключенных в неинкапсулированную икосаэдрическую капсиду. Сегмент генома B (2,9 кб) кодирует VP1 – предполагаемую вирусную РНК-полимеразу. Более крупный сегмент A (3,2 кб) кодирует вирусные белки VP2, VP3, VP4 и VP5. Среди них белок VP2 содержит важные нейтрализующие антигенные детерминанты и индуцирует защитный иммунный ответ, а большинство изменений аминокислот (AA) между антигенно различными IBDV сосредоточены в гипервариабельной области VP2. Таким образом, эта гипервариабельная область VP2 является очевидной мишенью для молекулярных методов, используемых для обнаружения IBDV и изучения вариабельности штаммов.
Патогенез
Клиническое заболевание связано с возрастом птицы и максимальной массой бурсы Фабрициуса, достигаемой в возрасте от 3 до 6 недель. Максимальная масса бурсы в основном обусловлена большой популяцией созревающих B-лимфоцитов, несущих IgM (лимфобластов), которые являются основной мишенью инфекции. Молодые птицы в возрасте около двух-восьми недель с высокоактивной бурсой Фабрициуса более восприимчивы к заболеванию. Птицы старше восьми недель устойчивы к заражению и не проявляют клинических признаков, за исключением случаев инфицирования высоковирулентными штаммами. Субклиническое заболевание развивается у цыплят, инфицированных до трехнедельного возраста. В этом возрасте популяция B-лимфобластов меньше, и системного воздействия недостаточно для развития клинических признаков. Однако разрушение B-клеток обычно наиболее выражено у субклинически инфицированных молодых птиц, поскольку вирус уничтожает меньшую популяцию клеток, сконцентрированную в одном месте – бурсе Фабрициуса. После попадания в организм вирус разрушает лимфоидные фолликулы в бурсе Фабрициуса, а также циркулирующие B-клетки во вторичных лимфоидных тканях, таких как GALT (лимфоидная ткань, ассоциированная с кишечником), CALT (конъюнктива), BALT (бронхосвязанная лимфоидная ткань), целиакальные миндалины, железа Хардериана и другие. Острое заболевание и гибель обусловлены некротизирующим действием этих вирусов на ткани организма. Почечная недостаточность является частой причиной смертности. Если птица выживает и выздоравливает после этой фазы заболевания, она остается иммунокомпрометированной, то есть становится более восприимчивой к другим болезням.
Клинические признаки
Болезнь может возникнуть внезапно, и заболеваемость обычно достигает 100%. В острой форме птицы становятся угнетенными, истощенными и обезвоженными. У них развивается водянистая диарея, а фекалии могут быть опухшими и окрашенными вокруг клоаки. Большинство птиц в стаде находятся в лежачем положении и имеют взъерошенные перья. Уровень смертности варьируется в зависимости от вирулентности штамма, инфекционной дозы, предшествующего иммунитета, наличия сопутствующих заболеваний, а также способности организма птицы к эффективному иммунному ответу. Иммуносупрессия у очень молодых цыплят, младше трех недель, является, возможно, наиболее важным последствием и может быть не клинически проявляться (субклиническая). Кроме того, инфекция менее вирулентными штаммами может не вызывать явных клинических признаков, но птицы с атрофией бурсы, фиброзными или кистозными фолликулами и лимфоцитопенией до шести недель могут быть восприимчивы к оппортунистическим инфекциям и могут погибнуть от возбудителей, которые обычно не вызывают заболевания у иммунокомпетентных птиц. У кур, инфицированных этим заболеванием, обычно наблюдаются следующие симптомы: клевание других кур, высокая температура, взъерошенные перья, тремор и медлительная походка, обнаружение сбившихся в кучи птиц с опущенными головами, диарея, желтый и пенистый помет, затрудненное опорожнение кишечника, снижение аппетита или анорексия. Уровень смертности составляет около 20% при гибели в течение 3–4 дней. Восстановление у выживших занимает около 7–8 дней. Наличие материнских антител (антител, передаваемых от матери птенцу) влияет на течение заболевания. Особенно опасные штаммы вируса с высокой смертностью были впервые обнаружены в Европе; эти штаммы не были выявлены в Австралии.
Диагноз
Предварительный диагноз обычно ставится на основании анамнеза птицы, клинических признаков и результатов вскрытия (некропсии). Однако окончательный диагноз может быть установлен только путем специфического обнаружения и/или выделения и характеристики вируса болезни Гамборо (IBDV). Иммунофлуоресцентные или иммуногистохимические тесты, основанные на антителах, меченных против IBDV, или in situ гибридизация, основанная на меченом комплементарном cDNA-зонде, полезны для специфического выявления IBDV в инфицированных тканях. RT-PCR (как указано выше) разработан для обнаружения генома IBDV, например, кодирующего гена VP1, с возможностью определения последовательности продуктов ПЦР для генетического сравнения изолятов и построения филогенетических деревьев. Серологические тесты, такие как осаждение в агар-геле и ELISA, для выявления антител, используются для мониторинга иммунного ответа на вакцинацию и могут предоставить дополнительную информацию для диагностики инфекции в невакцинированных стадах. При вскрытии обычно наблюдаются изменения в бурсе Фабрициуса, такие как увеличение в размерах, отек, кровоизлияния, наличие серозного экссудата, напоминающего желе, и, в конечном итоге, атрофия бурсы. Патологические изменения, особенно кровоизлияния, также могут наблюдаться в скелетных мышцах, кишечнике, почках и селезенке.
Лечение и контроль
Перифокальная вакцинация может оказаться неэффективной для борьбы со вспышкой из-за высокой скорости распространения дикого вируса IBDV. Пассивный иммунитет может защитить от заражения гомологичным IBDV, как и предшествующая инфекция гомологичными авирулентными штаммами. Племенные стада могут быть иммунизированы против IBD для передачи защитных антител потомству, такому как цыплята-бройлеры и молодняк несушек. Слабоааттенуированные штаммы вакцины могут вызывать повреждение бурсы Фабрициуса и иммуносупрессию у восприимчивых цыплят. Необходимо соблюдать меры биобезопасности, включая адекватное ограничение посещения фермы и изоляцию от других стад. Гигиенические мероприятия после вспышки могут быть неэффективны, поскольку вирус способен длительно сохраняться как в помещениях для содержания птицы, так и в воде.
Эпидемиология
Естественными хозяевами ИБП являются куры и индейки.