Введение

Анализ крови, используемый для измерения количества фетального гемоглобина.

Тест Клейхауэра-Бетке ("KB"), окраска Клейхауэра-Бетке ("KB"), тест Клейхауэра или тест кислотной элюции – это анализ крови, используемый для измерения количества фетального гемоглобина, перешедшего от плода в кровь матери. Обычно его проводят у матерей с отрицательным резус-фактором для определения необходимой дозы иммуноглобулина Rho(D) (RhIg) с целью подавления образования антител Rh у матери и предотвращения гемолитической болезни новорожденных у будущих детей с положительным резус-фактором. Тест назван в честь Энно Клейхауэра и Клауса Бетке, описавших его в 1957 году.

Детали испытаний

КБ-тест является стандартным методом количественной оценки фетоматеринского кровотечения (ФМК). Он основан на различной устойчивости фетального гемоглобина к кислоте. Из крови матери готовят стандартный мазок, который подвергают воздействию кислотной ванны. Это удаляет взрослый гемоглобин, но не фетальный гемоглобин, из эритроцитов. Последующее окрашивание по методу Шепарда позволяет увидеть клетки плода (содержащие фетальный гемоглобин) розового цвета, в то время как взрослые эритроциты видны лишь в виде "призраков". Под микроскопом подсчитывают 2000 клеток и рассчитывают процентное соотношение фетальных и материнских клеток.

Результаты исходного метода

Клетки с гемоглобином F плотно окрашиваются эритрозином, клетки с гемоглобином А выглядят как клетки-призраки, а промежуточные клетки окрашиваются в более или менее розовый цвет. Ретикулоциты, содержащие гемоглобин А, могут выглядеть как промежуточные клетки и/или проявлять внутриклеточную гранулярность. В элюированных клетках в виде компактных включений различного размера видны тельца включений (тельца Хайнца, осажденные α- или β-цепи). Гемоглобин А элюируется независимо от того, находится ли он в форме оксигемоглобина, метгемоглобина, цианметгемоглобина, восстановленного гемоглобина или карбоксигемоглобина.

Количество гемоглобина F-клеток

Рекомендуются методы, разработанные Шнайдером, Людвигом и Бартшем. Для определения внутриклеточного распределения гемоглобина F может быть использован полуколичественный метод Шепарда, Уэзеролла и Конли.

Нормальные значения

Нормальные значения гемоглобина F у взрослых, согласно первоначальным публикациям Кляйхауэра, составляли менее 0,01%, а у новорожденных, рожденных в срок, – более 90%.