Введение

Генетический граничный элемент, блокирующий взаимодействие между энхансерами и промоторами; электрический изолятор.

Изолятор – это тип цис-регуляторного элемента, известный как регуляторный элемент дальнего действия. Встречающийся у многоклеточных эукариот и действующий на расстоянии от промоторного элемента целевого гена, изолятор обычно имеет длину от 300 до 2000 пар оснований. Изоляторы содержат кластеры сайтов связывания для белков, специфически связывающихся с ДНК.

Изоляторы функционируют как блокатор энхансеров или барьер, или и то, и другое. Механизмы, посредством которых изолятор выполняет эти две функции, включают формирование петель и модификации нуклеосом. Существует множество примеров изоляторов, включая изолятор CTCF, изолятор gypsy и β-глобиновый локус. Изолятор CTCF особенно важен у позвоночных, в то время как изолятор gypsy связан с Drosophila. β-глобиновый локус впервые был изучен на курицах, а затем на людях для определения его изоляторной активности, в обоих случаях с использованием CTCF. Генетические последствия изоляторов заключаются в их участии в механизме импринтинга и их способности регулировать транскрипцию. Мутации в изоляторах связаны с раком в результате нарушения регуляции клеточного цикла, опухолеобразования и подавления генов-супрессоров роста.

Функция

Изоляторы выполняют две основные функции: также было обнаружено, что изоляторы скапливаются на границах топологически ассоциирующих доменов (TAD) и могут играть роль в разделении генома на "хромосомные соседства" – геномические области, внутри которых происходит регуляция. Некоторые изоляторы могут выступать как в роли блокировщиков энхансеров, так и в роли барьеров, а другие обладают только одной из этих функций. (модель прямого контакта), в этом случае изолятор предотвращает такое взаимодействие, формируя петлевой домен, который разделяет энхансер и промотор, препятствуя образованию петли энхансер-промотор. При этом они не связаны напрямую с барьерной активностью. Позвоночные, в частности, в значительной степени полагаются на изолятор CTCF, однако было идентифицировано множество различных последовательностей изоляторов.

Регулирование

Одним из механизмов регуляции CTCF является метилирование его последовательности ДНК. Поскольку белок CTCF лучше связывается с неметилированными участками, метилирование CpG-островов представляет собой точку эпигенетической регуляции. Вторым механизмом регуляции является контроль белков, необходимых для полноценной работы изоляторов CTCF. К этим белкам относятся, помимо прочего, когезин, РНК-полимераза и CP190.

циганский изолятор

Изоляторный элемент, обнаруженный в ретротранспозоне gypsy дрозофилы, является одной из нескольких последовательностей, детально изученных на данный момент. Изолятор gypsy расположен в 5'-нетранслируемой области (UTR) ретротранспозонного элемента. Gypsy влияет на экспрессию соседних генов в зависимости от места вставки в новый геномный локус, вызывая мутантные фенотипы, проявляющиеся как в определенных тканях, так и на конкретных стадиях развития. Предполагается, что изолятор оказывает ингибирующее действие на энхансеры, контролирующие пространственную и временную экспрессию затронутого гена.

β-глобинный локус

Первые примеры изоляторов у позвоночных были обнаружены в β-глобиновом локусе курицы, cHS4. cHS4 отмечает границу между активным эвхроматином в β-глобиновом локусе и расположенной выше высококонденсированной и неактивной областью гетерохроматина. Изолятор cHS4 действует как барьер против хроматин-опосредованного подавления посредством распространения гетерохроматина и блокирует взаимодействие между энхансерами и промоторами. Характерной особенностью cHS4 является наличие повторяющейся гетерохроматической области на его 5'-конце.