Кіріспе

Дозалық компенсация – бұл организмдердің әртүрлі биологиялық жыныстардың мүшелері арасындағы гендердің экспрессиясын теңестіретін процесі. Түрлер арасында әртүрлі жыныстар көбінесе жыныстық хромосомалардың әртүрлі түрлері мен санымен сипатталады. Жыныстар арасындағы жыныстық хромосомалардың әртүрлі санынан туындаған ген дозасының айырмашылығын бейтараптандыру үшін, эволюцияның әртүрлі тармақтары жыныстар арасындағы ген экспрессиясын теңестірудің әртүрлі әдістерін қабылдады. Жыныстық хромосомаларда әртүрлі гендер болғандықтан, әртүрлі организмдер осы теңсіздікті жеңу үшін әртүрлі механизмдерді дамытты. Генді нақты көшіру мүмкін емес; сондықтан организмдер әр геннен экспрессияны теңестіреді. Мысалы, адамдарда әйел (XX) жасушалары бір Х хромосомасының транскрипциясын кездейсоқ түрде тоқтатып, қалған, экспрессияланатын Х хромосомадан барлық ақпаратты транскрипциялайды. Осылайша, адам әйелдерінің әрбір жасушасындағы Х-мен байланысқан гендердің саны адам еркектеріндегідей (XY) болады, екі жыныстың да әрбір жасушасында гендерді транскрипциялау және экспрессиялау үшін бір Х хромосомасы бар. Әртүрлі эволюциялық желілер жыныстық хромосомаларда байқалатын жыныстар арасындағы гендердің көшірмелерінің санының айырмашылығымен күресу үшін әртүрлі механизмдерді дамытты. Кейбір желілер дозалық компенсацияны дамытты, бұл гетерогаметтік жыныстағы X немесе Z-ге тән гендердің экспрессиясын жыныстық хромосоманың эволюциясына дейінгі ата-бабада байқалған деңгейге қайта қалпына келтіретін эпигенетикалық механизм. Басқа желілер жыныстар арасындағы X немесе Z-ге тән гендердің экспрессиясын теңестіреді, бірақ ата-баба деңгейіне емес, яғни олар «дозалық баланс» арқылы толық емес компенсацияға ие. Мұның бір мысалы – адамдарда кездесетін Х-инактивациясы. Гендік дозаны реттеу механизмінің үшінші құжатталған түрі – теңгерімсіз толық емес компенсация (кейде толық емес немесе ішінара дозалық компенсация деп аталады). Бұл жүйеде жыныстық ерекшеліктегі гендік экспрессия гетерогаметтік жыныста төмендейді, яғни ZZ/ZW жүйелеріндегі әйелдерде және XX/XY жүйелеріндегі еркектерде. Дозалық компенсацияға жетудің үш негізгі механизмі бар, олар ғылыми әдебиетте кеңінен сипатталған және көптеген түрлерге ортақ. Оларға бір әйел Х хромосомасының кездейсоқ инактивациясы (адамдарда және Mus musculus-та байқалатын; бұл Х-инактивациясы деп аталады), бір еркек Х хромосомасының транскрипциясының екі есеге артуы (Drosophila melanogaster-та байқалатын) және гермафродит организмнің екі Х хромосомасында да транскрипцияның жартысына дейін төмендеуі (Caenorhabditis elegans-та байқалатын) жатады. Бұл механизмдер зертханалық зерттеулерде жиі қолданылатын модельді организмдерде кеңінен зерттелді және өзгертілді. Дозалық компенсацияның осы формаларының шолуы төменде келтірілген. Алайда, дозалық компенсацияның басқа, сирек кездесетін формалары да бар, олар кеңінен зерттелмеген және кейде тек бір түрге тән (кейбір құстар мен монотремаларда байқалатын сияқты).

Бір ♀ X-тің кездейсоқ инактивациясы

Логикалық жағдай бойынша, XX/XY жыныстық дифференциация схемасын ұстанатын ерлер мен әйелдер арасындағы гендік экспрессияны теңестірудің бір жолы – XX немесе әйел гомогаметтік жеке тұлғасындағы X хромосомаларының бірінің экспрессиясын азайту немесе толығымен жою болып табылады, сонда ерлер мен әйелдер тек бір X хромосомасын экспрессиялайды. Бұл көптеген сүтқоректілерде, соның ішінде адамдар мен егешқұйрықтарда кездеседі. Олар пісіп-жетілген соматикалық тіндерде кездесетін бұл құрылымдарды байқады. Бұл спутниктердің шын мәнінде конденсацияланған гетерохроматин пакеттері екені кейін анықталды, бірақ ғалымдар осы арнайы ДНҚ-ның маңыздылығын түсінуге он жылдай уақыт кетті. 1959 жылы Сусуму Оно бұл спутник тәрізді құрылымдардың әйел жасушаларында ғана кездесетінін және әйелдердің X хромосомаларынан шыққан екенін дәлелдеді. Ол оларды бастапқыда олардың бар екенін анықтаған зерттеушілердің бірінің құрметіне Барр денелері деп атады. Ононың әйел сүтқоректілердегі Барр денелерін зерттеуі, мұндай әйелдердің Барр денелерін X хромосомаларының бірінен басқа барлығын белсенділіктен шығару үшін қолданғанын көрсетті. Осылайша, Оно "n-1" ережесін сипаттап, әйелдің кариотипіндегі n санындағы X хромосомаларының саны бойынша Барр денелерінің санын болжады. Бұл оның мозаикалық егешқұйрықтарында байқаған әртүрлі түк үлгілерін түсіндірді. Бұл процесс X-инактивациясы деп аталады, кейде "лионизация" деп те айтылады. Демек, егер шаштың түсін анықтайтын гендер X хромосомасына байланысты болса, шаш жасушасында аналық немесе аталық X хромосомасы инактивацияланғандығына байланысты түк түсінің әртүрлі болуы мүмкін. Лионның жаңалықтарын дамытып, 1962 жылы Эрнест Бетлер лионизацияның немесе кездейсоқ X-инактивациясының тұқым қуалайтынын көрсету үшін мәдениетте өсірілген әйелдердің фибробласт жасушаларын пайдаланды. X хромосомасына байланысты глюкоза-6-фосфат дегидрогеназа (G6PD) генінің екі тірі аллелінің дифференциалдық экспрессиясын талдау арқылы Бетлер геннің инактивациясы жасушалардың келесі ұрпақтарында тұқым қуалайтынын байқады. Кездейсоқ X-инактивациясынан туындаған дозалық компенсация үлгісі әйел сүтқоректілердің дамуы бойынша реттеледі, даму барысында келісілген үлгілерді ұстанады; мысалы, әйел сүтқоректілердің дамуының басында екі X хромосомасы да бастапқыда экспрессияланады, бірақ бір X-тің кездейсоқ инактивациясына жету үшін эпигенетикалық процестерге біртіндеп ұшырайды. Сонымен қатар, адамның X хромосомасының 10-25% гендері және PAR-дан тыс егешқұйрықтың X хромосомасының 3-7% гендері белсенді емес X хромосомасынан әлсіз экспрессияны көрсетеді. Кездейсоқ X-инактивациясы жасушада бірден көп белсенді X хромосомасы бар екенін анықтауды талап етеді, содан кейін кез келген артық X хромосомасын (лар) тыныштандыруға кіріседі. Бұл процесс "санау" деп аталады. Дозалық компенсация тұжырымдамасы, шын мәнінде, еркектер X хромосомасына байланысты гендерді екі есе жоғарылатып реттейтін организмдерді түсінуден пайда болды және кейіннен бір кездері құпия Барр денелерін байқау үшін кеңейтілді. 1932 жылы Х. Мюллер көз түсінің экспрессиясын шыбындарда бақылауға мүмкіндік берген тәжірибелер жиынтығын жүргізді, ол X хромосомасына байланысты ген. Мюллер шыбындардың көзінде пигментацияның жоғалуына себеп болған мутант генді енгізді, содан кейін мутант генінің тек бір көшірмесі бар еркектерде мутант генінің екі көшірмесі бар әйелдермен ұқсас пигментация бар екенін атап өтті. Бұл Мюллер ген экспрессиясының теңестірілуінің байқалатын құбылысын сипаттау үшін "дозалық компенсация" сөзін жасауға әкелді. Осы жетістіктерге қарамастан, ғалымдар 1965 жылы Ардхенду Мукерджи мен В. Биерман одан да жетілдірілген авторадиографиялық тәжірибелер жүргізгенге дейін бір еркек X хромосомасындағы гендердің транскрипциясы екі әйел X хромосомасында байқалғаннан екі есе көп екенін растай алмады. Мукерджи мен Биерман X хромосомаларының рибонуклеин қышқылына қосылуын визуализациялауға мүмкіндік беретін жасушалық авторадиографиялық эксперимент жасау арқылы осы фактіні растады. Олардың зерттеулері еркектің бір X хромосомасында және екі әйел X хромосомасында бірдей инкорпорация деңгейін көрсетті. Осылайша, зерттеушілер еркектің X хромосомасындағы РНК синтезінің әйелдің X хромосомасына қарағанда екі есе жоғарылауы Мюллердің болжамды дозалық компенсациясын түсіндіре алады деген қорытындыға келді. Бір еркек X хромосомасының екі есе көбейген транскрипциясы жағдайында Барр денесі қажет емес, ал еркек организмі өзінің жалғыз X хромосомасының транскрипциялық өнімділігін арттыру үшін басқа генетикалық механизмдерді пайдалануы керек. Мұндай организмдерде Y хромосомасы еркектің сүектеуі үшін қажет болуы жиі кездеседі, бірақ жыныстық дифференциацияда нақты рөл атқармайды. Мысалы, Drosophila-да жыныстық өлім (SXL) гені соматикалық тіндерде жыныстық дифференциация мен жетілудің маңызды реттегіші болып табылады; XX жануарларында SXL транскрипцияны жоғарылатуды басу үшін белсендіріледі, ал XY жануарларында SXL белсенді емес және жалғыз X транскрипциясының жоғарылауы арқылы еркек дамуына жол береді. Male Specific Lethal комплексі, белок және РНК-дан тұрады, жүздерше X хромосомасына байланысты гендерге байланып, оларды таңдап өзгертеді, олардың транскрипциясын D. melanogaster әйелдерімен салыстыруға дейін арттырады. Бұл әдіс дозалық компенсацияны пайдаланатын организмдерде, дамудың басында бір немесе бірнеше X хромосомаларының болуын анықтау қажет, өйткені тиісті дозалық компенсация механизмдерін іске қоспау өлімге әкеледі. Қазіргі догма MSL2-нің SXL генінің көптеген жерлеріне байланысуы әйелдерде дұрыс MSL2 трансляциясын болдырмайды және осылайша, бұрын айтқандай, әйелдерде X хромосомасына байланысты генетикалық жоғарылату мүмкіндігін басады деп болжайды. Алайда, MSL отбасының басқа барлық транскрипциялық факторлары – maleless, MSL1 және MSL3 – SXL экспрессияланбаған жағдайда әрекет ете алады, еркектердегідей. Бұл факторлар еркек X хромосомасының транскрипциялық белсенділігін арттыруға әрекет етеді. Гистон ацетилдеуі және еркектерде X хромосомасына байланысты гендердің салдарынан жоғарылауы MSL комплексімен анықталады. Атап айтқанда, MSL комплекстеріндегі арнайы roX емес кодтаушы РНК жалғыз еркек X хромосомасына байланысуды жеңілдетеді және X хромосомасының нақты локустарын ацетилдеуді және эухроматин қалыптасуын анықтайды. Бұл РНК-лар еркек X хромосомасының нақты жерлеріне байланысса да, олардың әсері хромосоманың бойымен таралады және ірі масштабты хроматин өзгерістеріне әсер етуге қабілетті. Еркек X хромосомасының бойымен таралатын бұл эпигенетикалық реттеудің салдары геномдық кеңістіктердегі эпигенетикалық белсенділіктің берілуін түсіну үшін маңызды деп саналады. Екі X хромосомасы бар құрттар (XX құрттары) гермафродиттер ретінде дамиды, ал тек бір X хромосомасы барлар (XO құрттары) еркектер ретінде дамиды. Бұл жыныстық анықтама жүйесі бірегей, өйткені XX/XY жыныстық анықтама жүйелеріндегідей еркекке тән хромосома жоқ. Алайда, бұрын талқыланған дозалық компенсация механизмдері сияқты, X хромосомасына байланысты гендерді дұрыс экспрессияламау өлімге әкелуі мүмкін. Бұл XX/XO жыныстық анықтама жүйесінде гендік экспрессия гермафродит XX организмдерінің екі X хромосомасындағы гендердің экспрессиясын жартылай төмендету арқылы теңестіріледі. Бұл көптеген түрлердің митоз және мейоз процестерінде сақталады. Бұл кешен мейоз бен митоз кезінде хромосомалардың конденсациясы мен сегрегациясына өте маңызды. Дозалық компенсацияның басқа түрлердегі хроматинмен кеңейтілген өзгерістерге байланысты туындайтыны туралы деректердің болуына байланысты, көптеген ғалымдар DCC-нің, әсіресе, X хромосомасының хроматинін конденсациялау немесе қайта құру қабілетіне байланысты конденсация кешеніне ұқсас функциясы бар деп санайды. DCC-нің осы формадағы дозалық компенсациядағы рөлі 1980-ші жылдарда Барбара Дж. Мейер ұсынған, ал оның жеке компоненттері мен олардың бірлескен функциясы кейіннен оның зертханасымен анықталды. Атап айтқанда,...

Құстар

Құстардың жыныстық хромосомалары сүтқоректілердің хромосомаларынан тәуелсіз дамыды және XY хромосомаларымен өте аз гомологияға ие. Сондықтан ғалымдар құстардың жыныстық хромосомаларын ZW жынысты анықтау жүйесі деп атайды, онда аталықтарда екі Z хромосомасы, ал аналықтарда бір Z және бір W хромосомасы болады. Осылайша, құстардағы дозалық өтемақы көптеген сүтқоректілерде байқалатын кездейсоқ X инактивациясы сияқты үлгіні ұстанса деп болжауға болады. Балама ретінде, құстар еркек гетерогаметтік жыныстағы екі Z хромосомасының транскрипциясын төмендетуі мүмкін, бұл C. elegans-тың екі гермафродиттік X хромосомасында байқалған жүйеге ұқсас. Дегенмен, құстардың дозалық өтемақы механизмдері бұл бұрынғы мысалдардан едәуір өзгеше. Керісінше, ата құстар кездейсоқ түрде бір Z хромосомасын тоқтатудың орнына, Z хромосомаларының біріндегі тек бірнеше гендерді таңдап тоқтатады. Бұл таңдаулы тоқтату кейбір ғалымдарды құстарды сүтқоректілерге қарағанда дозалық өтемақыда «кем тиімді» деп сипаттауға алып келді. Алайда, соңғы зерттеулер құстарда белсенділігі жойылмаған Z хромосомасындағы гендер ZZ организмдерінде Z хромосомасына дозалық өтемақы механизмін тартуда маңызды рөл атқаратынын көрсетті. Атап айтқанда, осы гендердің бірі – ScII, C. elegans-тағы жыныстық реттеуші ген xol1-дің ортологы болып табылады. Осылайша, таңдаулы тоқтатудың функциясы гомологиялық жұптасу үшін маңызды гендердің дозалық өтемақысын сақтау болуы мүмкін. Құстардағы дозалық өтемақының эпигенетикалық механизмдері, әсіресе адамдар мен дрозофиладағы жақсы зерттелген механизмдермен салыстырғанда, нашар түсінілгендігімен қатар, соңғы зерттеулер перспективалы тізбектерді анықтады. Бір мысал – MHM (еркектерде гиперметилденген) РНК, Xist сияқты ұзын кодталмаған РНК, ол тек әйел тауықтарда (ZW) экспрессияланады. Бұл Z хромосомасындағы MHM локусына жақын орналасқан гистон 4-те лизин 16-ның әйелдерге тән гипер-ацетилденуімен байланысты. Бұл MHM локусы дозалық өтемақы орны ретінде кеңінен зерттеледі, өйткені еркек Z хромосомалары гиперметилденген және осы аймақтағы гендерді әйелдердің Z хромосомаларымен салыстырғанда аз экспрессиялайды, олар гипер-ацетилденген және осы гендерді жоғары экспрессиялайды. MHM локусы дозалық өтемақыны құрай ма, жоқ па деген пікірталас бар, өйткені ғалымдар MHM локусының әйелдерде еркектерге қарағанда айтарлықтай жоғары экспрессияланғаны анықталса да, ол гетерогаметтік жыныста Z хромосомасы мен автосомалар арасындағы ген дозасын теңестірмейтін болғандықтан, оны дозалық өтемақы механизмі деп санауға болмайды. Сүтқоректілерге ұқсас, тауықтар ген экспрессиясын реттеу үшін CpG аралдарын (цитозин-фосфат-гуанин сегменттері, басқа ДНК сегменттеріне қарағанда оңайрақ метилирленеді және тоқтатылады) пайдаланады. Бір зерттеуде CpG аралдары негізінен Z хромосомасының өтемақыланған аймақтарында табылған – еркек және әйел тауықтарда әртүрлі экспрессияланатын аймақтар. Осылайша, бұл CpG аралдары еркек Z хромосомасындағы гендер метилирленген және тоқтатылатын, бірақ әйел Z хромосомасында функционалды болып қалатын жерлер болуы мүмкін.

Монотремалар

Монотремалар – жұмыртқа салатын сүтқоректілердің ең алғашқы класы. Олар қуысқұйрықтар (платипустар) және төрт түрлі эхиднаны қамтитын сүтқоректілердің бір тобы, барлығы да жұмыртқа салатын сүтқоректілер. Монотремалар XX/XY жүйесін пайдаланса да, басқа сүтқоректілерден өзгеше, оларда екінен астам жыныстық хромосома болады. Мысалы, қысқа тұмсықты эхиднаның еркегінде тоғыз жыныстық хромосома бар: 5 X және 4 Y, ал платипустің еркегінде 5 X және 5 Y хромосомасы бар. Платипустар – жыныс анықталу механизмі жан-жақты зерттелген монотремалардың бір түрі. Академиялық ортада платипустардың эволюциялық тегі және дұрыс таксономиясы туралы пікірлер қалыптасуда. Жақында жүргізілген зерттеуге сәйкес, платипустың геномы әлі толық секвенцияланбағандықтан (оның ішінде бір Х хромосомасы да), платипустардың дозалық компенсация механизміне қатысты зерттеулер жалғасуда. Дженнифер Грейвстің зертханасы qPCR және SNP талдауларын, Х хромосомаларындағы әртүрлі гендерді қамтитын BAC-терді пайдаланып, X-ке байланысты гендер үшін бірнеше аллель бір уақытта экспрессиялана ма, әлде дозалық компенсация жүзеге асырыла ма, анықтау үшін жүргізді. Зерттеу нәтижесінде S. latifolia-ның еркегіндегі X-ке байланысты гендердің экспрессиясының деңгейі әйелдердегіден шамамен 70% төмен екені анықталды. Егер S. latifolia дозалық компенсацияны қолданбаса, еркектердегі X-ке байланысты гендердің экспрессиясының күтілетін деңгейі әйелдердегіден 50% болуы керек еді. Осылайша, өсімдік белгілі бір деңгейде дозалық компенсацияны жүзеге асырады, бірақ еркектердегі экспрессия әйелдердегіден 100% емес, сондықтан S. latifolia және оның дозалық компенсация жүйесі әлі де эволюцияда болуда деп болжануда. Сонымен қатар, диморфты жыныстық хромосомалары жоқ өсімдік түрлерінде аберрант мейоз оқиғалары немесе мутациялар анеуплоидияға немесе полиплоидияға алып келген жағдайда дозалық компенсация жүруі мүмкін. Зақымдалған хромосомадағы гендер хромосомалардың қалыпты санындағы өзгерісті өтеу үшін жоғары немесе төмен реттелуі мүмкін.

Жыртқыш жануарлар

Дозалық компенсацияны зерттеу токсикоферлік рептилиялардың алты түрінде және жұмсақ қабықты тасбақаның бір түрінде жүргізілді. Кейнофидиялық жыланның екі түрі (біреуі Viperidae тұқымдасына, екіншісі Colubridae тұқымдасына жатады) зерттелді, және олардың екеуінде де әйелдер гетерогаметтік жыныс анықтау жүйесі (ZZ\ZW) бар, сондай-ақ тепе-теңдіксіз толық емес компенсация байқалды. Комодо драконы өздігінен дамыған ZZ/ZW жүйесінде дозалық тепе-теңдіксіз толық емес компенсацияны көрсетеді. Basiliscus vittatus-тың XX/XY жүйесінде және Lialis burtonis пигоподид геккосындағы еркек гетерогаметиясы бар көптеген жаңа жыныстық хромосомаларда да дозалық тепе-теңдіксіз толық емес компенсация анықталды. Жасыл аноль (Anolis carolinensis; Dactyloidea) XX/XY жыныс анықтау жүйесіне ие, және осы уақытқа дейін зерттелген басқа қабықтылардың барлығынан өзгеше, дозалық тепе-теңдікпен толық дозалық компенсацияға ие. Флориданың жұмсақ қабықты тасбақасында (Apalone ferox), ZZ/ZW жыныстық хромосомалары бар, Z-ге байланысты гендердің экспрессиясында дозалық тепе-теңдіктің болмауы да анықталды.

Х хромосомасының иактивациясы және эмбрионалды дің жасушалары

XCI әйел эмбрионалды даму кезінде немесе әйел эмбрионалды түбір жасушаларының (ES) дифференциациясы кезінде басталады және әрбір әйелдің соматикалық жасушасындағы бір X хромосомасының инактивациясына әкеледі. Бұл процесс дамудың өте ерте кезеңінде, шамамен екі-сегіз жасушалық сатыда басталады және ұрықтың дамуындағы эмбриональды тіндерде, соның ішінде ұрықтық плацентада сақталады. Xist РНК, гендік үнсіздікке қатысатын хроматин модификаторларын тарту арқылы Х хромосомасының гетерохроматизациясын тудырады. Xist РНК Xi-мен тығыз байланысты және X хромосомасының цис-те инактивациясы үшін қажет. Әйел ES жасушаларында және егеуқұйрықтардағы нокаут зерттеулері Xist генінің жойылған X хромосомалары мутацияланған X-ті инактивациялай алмайтынын көрсетті. Адамның әйел ES жасушаларының көпшілігі XIST экспрессиясымен, XIST қаптамасымен және Xi-де гетерохроматиннің жинақталған маркерлерімен сипатталатын дифференциацияланбаған күйде инактивацияланған X хромосомасын көрсетеді. Әйел эмбриондарында екі X хромосомасының бірінде Xist РНК жиналуы 8-ші жасушалық сатыдан басталады. Xist РНК морула және бластоцист сатыларында жиналады және Xist-ге қапталған хромосомалық аймақтың транскрипциялық үнсіздігімен байланысты екені көрсетілді, демек дозалық компенсация жүзеге асты. Бұл Tsix-пен бірлесіп жұмыс істейді, ол X инактивациясының басталуымен Xist-тің әсерін төмендететін антисенс болып табылатын кодтамайтын РНК. Бұл үш РНК жұп Х хромосомаларының екеуінің де тең ингибиторлық әрекеттеріне мүмкіндік беру үшін жұмыс істейді. Tsix және Xite X инактивациясына қоса, негізгі lncRNA функцияларын атқарады және X жұбын реттейді. Бұл екі X хромосомасы үшін де эксклюзивті үнсіздікті қамтамасыз етеді. Xite және Tsix цис және транс процестеріндегі бағдарлау-бағыттамалық процестерде маңызды, өйткені Tsix және Xite болмағанда жұптасу және гендерді санау бұзылады. Xite Tsix экспрессиясының асимметриясында да маңызды рөл атқарады және хромосомаларды дұрыс келесі lncRNA (Tsix немесе Xist) әрекет етуі үшін бағыттап, хромосомалық теңсіздік тудырады.