Введение

Стадия деления клеток, программное обеспечение для управления жизненным циклом продукта. Метафаза (и от древнегреческого φάσις (phásis) — «явление») — это стадия митоза в цикле эукариотических клеток, в которой хромосомы находятся во второй по степени конденсации и спирализации (наиболее конденсированы они в анафазе). Эти хромосомы, несущие генетическую информацию, выстраиваются в экваториальной плоскости клетки между полюсами веретена деления на метафазной пластинке, прежде чем разделяться на два дочерних ядра. Это выравнивание знаменует начало метафазы. Метафаза занимает около 4% продолжительности клеточного цикла. В метафазе микротрубочки из обеих дуплицированных центросом, расположенных на противоположных полюсах клетки, завершают прикрепление к кинетохорам конденсированных хромосом. Центромеры хромосом собираются на метафазной пластинке — воображаемой линии, равноудалённой от двух полюсов веретена деления. Такое равномерное выравнивание обусловлено балансом сил тяги, создаваемых кинетохорными микротрубочками, действующими в противоположных направлениях, что аналогично перетягиванию каната двумя людьми равной силы, завершающемуся разрушением циклина B. Для предотвращения вредных событий недеисъюнкции ключевая контрольная точка клеточного цикла — контрольная точка веретена — проверяет равномерность и сбалансированность выравнивания и гарантирует, что каждая кинетохора правильно прикреплена к пучком микротрубочек и находится под сбалансированным биполярным напряжением. Сестринским хроматидам требуется активная сепараза для гидролиза когезина, связывающего их вместе, перед переходом в анафазу. Любые неприкреплённые или неправильно прикреплённые кинетохоры генерируют сигналы, препятствующие активации комплекса, стимулирующего анафазу (циклосомы или APC/C) — убиквитинлигазы, которая направляет секюрин и циклин B на деградацию через протеасому. Пока секюрин и циклин B остаются активными, сепараза остаётся неактивной, предотвращая преждевременный переход в анафазу.

Метафаза в исследованиях цитогенетики и рака

Анализ метафазных хромосом является одним из основных инструментов классической цитогенетики и исследований рака. Хромосомы конденсированы (уплотнены) и сильно скручены в метафазе, что делает их наиболее подходящими для визуального анализа. Метафазные хромосомы формируют классическую картину хромосом (кариотип). Для проведения классических цитогенетических анализов клетки выращивают в краткосрочной культуре и останавливают в метафазе с помощью ингибитора митоза. Затем их используют для приготовления препаратов и окрашивания (формирования полос) хромосом, которые визуализируют под микроскопом для изучения структуры и числа хромосом (кариотипа). Окрашивание препаратов, часто с использованием Giemsa (G-окраска) или Quinacrine, создает рисунок, состоящий в общей сложности до нескольких сотен полос. Нормальные метафазные препараты используются в таких методах, как FISH, а также в качестве матрицы гибридизации для экспериментов сравнительной геномной гибридизации (CGH). Злокачественные клетки из образцов солидных опухолей или лейкемии также могут быть использованы для цитогенетического анализа с целью получения метафазных препаратов. Исследование окрашенных метафазных хромосом позволяет выявить числовые и структурные изменения в геноме опухолевых клеток, например, потерю хромосомных сегментов или транслокации, которые могут приводить к образованию химерных онкогенов, таких как bcr-abl при хроническом миелолейкозе.