Забор крови у новорожденных: Процедура пятки и тест Гутри

Введение

Процедура взятия крови у новорожденных

Взятие крови через пяточку новорожденному – это процедура получения крови у новорожденных. Она заключается в небольшом уколе иглой в пяточку новорожденного для сбора крови. Этот метод часто используется как основной способ получения крови у новорожденных. Другие методы включают венозные или артериальные пункции, забор крови из пуповины или катетера из пупочной вены. Этот метод часто используется для проведения теста Гатри, при котором кровь впитывается в предварительно напечатанные карточки для сбора, известные как карточки Гатри. Классический тест Гатри назван в честь Роберта Гатри, американского бактериолога и врача, который разработал его в 1962 году. С конца 1960-х годов этот тест широко используется в Северной Америке и Европе как один из основных скрининговых тестов для новорожденных. Изначально тест представлял собой анализ на подавление роста бактерий, но постепенно во многих регионах его заменяют более современные методы, такие как тандемная масс-спектрометрия, позволяющая выявлять более широкий спектр врожденных заболеваний.

Механизм

В качестве признака наличия высоких уровней фенилаланина, фенилпирувата и/или фениллактата в тесте используется рост штамма бактерий на специально подготовленной агарной пластинке. Соединение B2-тиенилаланин ингибирует рост бактерии Bacillus subtilis (ATCC 6051) в минимальных средах. Если фенилаланин, фенилпируват и/или фениллактат добавляют в среду, рост восстанавливается. Такие соединения могут быть в избытке в крови или моче пациентов с фенилкетонурией (ФКУ). Если соответствующим образом подготовленный образец крови или мочи нанесен на засеянную агарную пластинку, рост бактерий в тесте будет положительным показателем ФКУ у пациента. Для подготовки образца к нанесению небольшое количество крови (например, полученной при проколе пятки) или мочи (например, из подгузника) наносят на кусок фильтровальной бумаги. Затем из центра пятна крови или мочи вырезают небольшой диск, который наносят на поверхность засеянной минимальной агарной среды, содержащей добавленный бета-2-тиенилаланин. Если образец содержит фенилаланин, фенилпируват и/или фениллактат, эти соединения диффундируют в агарную среду. Если их концентрация достаточно высока (как при повышенных уровнях, наблюдаемых при ФКУ), бактерии будут расти под диском, но не в других местах. Обычно достаточно ночной инкубации, чтобы определить, присутствуют ли фенилаланин, фенилпируват и/или фениллактат в необычных концентрациях в крови или моче. Ложноположительные и ложноотрицательные результаты иногда могут возникать при проведении скрининговых тестов до истечения 48 часов. При использовании иммуноанализа в качестве скринингового метода количественного определения 17α-гидроксипрогестерона (17OHP) в сухих пятнах крови наблюдается значительная частота ложноположительных результатов. В соответствии с клиническими рекомендациями, опубликованными Эндокринным обществом в 2018 году, рекомендуется использовать жидкостную хромато-масс-спектрометрию (ЛК-МС/МС) для измерения 17OHP и других стероидных гормонов надпочечников (таких как 21-дезоксикортизол и андростендион) в качестве дополнительного скринингового подхода для повышения точности положительных прогнозов. Поскольку генетические тесты становятся все более распространенными, кровь, полученную таким методом, можно использовать для широкого спектра анализов. Многие отделения новорожденных (SCBU) теперь используют этот метод для проведения ежедневных анализов крови (общий анализ крови, электролиты), необходимых для контроля состояния здоровья недоношенных детей.

The test uses the growth of a strain of bacteria on a specially prepared agar plate as a sign for the presence of high levels of phenylalanine, phenylpyruvate, and/or phenyllactate. The compound B 2 thienylalanine will inhibit the growth of the bacterium Bacillus subtilis (ATCC 6051) on minimal culture media. If phenylalanine, phenylpyruvate, and/or phenyllactate is added to the medium, then growth is restored. Such compounds will be present in excess in the blood or urine of patients with PKU. If a suitably prepared sample of blood or urine is applied to the seeded agar plate, the growth of the bacteria in the test will be a positive indicator for PKU in the patient. To prepare the sample for application, a small amount of blood (from a heel puncture, for example) or urine (from a diaper, for example) is applied to a piece of filter paper. Then a small disc is punched from the center of the spot of blood or urine, and the disc applied to the surface of a seeded, minimal medium agar plate that contains added beta 2 thienylalanine. If the sample contains phenylalanine, phenylpyruvate, and/or phenyllactate then these compounds will diffuse into the agar medium. If their concentrations are high enough (as with the excess levels seen with PKU), bacteria will grow under the disc, but not elsewhere. Generally an overnight incubation is enough to determine whether phenylalanine, phenylpyruvate, and/or phenyllactate are present in unusual concentrations in blood or urine. False positives and false negatives can sometimes occur when the screening tests are performed before 48 hours. When the immunoassay method is utilized as a screening method for quantifying 17α hydroxyprogesterone (17OHP) in dried blood spots, it exhibits a significant rate of false positive results. As per the clinical practice guideline issued by the Endocrine Society in 2018, employing LC MS/MS to measure 17OHP and other adrenal steroid hormones (such as 21 deoxycortisol and androstenedione) is recommended as a supplementary screening approach to enhance the accuracy of positive predictions. With genetic tests becoming more common, a wide variety of tests may use the blood drawn by this method. Many neonatal units (SCBUs) now use this method to carry out the daily blood tests (blood count, electrolytes) required to check the progress of ill neonates.

Спор о сохранении данных

В Ирландии в 2012 году разгорелся скандал, связанный с тем, что ряд больниц сохраняли карточки от забора крови из пятки новорожденных и, следовательно, создали базу данных ДНК, содержащую более миллиона образцов, начиная с 1984 года, без согласия или уведомления родителей. Впоследствии был введен десятилетний цикл последовательного уничтожения этих образцов. Аналогичная практика существует в Соединенном Королевстве, Новой Зеландии и ряде штатов США.