Введение

Фармацевтический препарат

Тейкопланин – полусинтетический гликопептидный антибиотик со спектром активности, сходным с ванкомицином. Механизм его действия заключается в ингибировании синтеза бактериальной клеточной стенки. Он применяется для профилактики и лечения серьезных инфекций, вызванных грамположительными бактериями, включая Staphylococcus aureus, устойчивый к метициллину, и Enterococcus faecalis. Тейкопланин продается компанией Sanofi Aventis под торговым названием Targocid. Другие торговые названия включают Тикоцин, продаваемый компанией Cipla (Индия). Пероральный тейкопланин доказал свою эффективность в лечении псевдомембранозного колита и диареи, связанной с Clostridium difficile, с сопоставимой с ванкомицином эффективностью. Считается, что его эффективность обусловлена длиной углеводородной цепи. Тейкопланин продуцируется так называемой "редкой" актинобактерией Actinoplanes teichomyceticus ATCC 31121, относящейся к семейству Micromonosporaceae. Биосинтетический путь, приводящий к образованию тейкопланина, а также регуляторная схема, управляющая биосинтезом, были интенсивно изучены в последние годы, что позволило создать комплексную модель биосинтеза.

Показания

Тейкопланин применяется для лечения широкого спектра инфекций, вызванных грамположительными бактериями, включая эндокардит, септицемию, инфекции мягких тканей и кожи, а также инфекции, связанные с венозным катетером.

Восприимчивые организмы

Теикопланин продемонстрировал эффективность in vitro против грамположительных бактерий, включая стафилококки (включая MRSA), стрептококки, энтерококки, а также против анаэробных грамположительных бактерий, включая Clostridium spp. Теикопланин не эффективен против грамотрицательных бактерий, поскольку крупные полярные молекулы соединения не способны проникать через внешнюю мембрану этих организмов. Все теикопланины имеют общее гликопептидное ядро, называемое теикопланином A3 1 – конденсированную кольцевую структуру, к которой присоединены два углевода (манноза и N-ацетилглюкозамин). Основные и второстепенные компоненты также содержат третью углеводную составляющую – β-D-глюкозамин – и различаются только длиной и конформацией боковой цепи, прикрепленной к ней. Теикопланин A2 4 и RS 3 имеют хиральные боковые цепи, в то время как все остальные боковые цепи являются ахиральными. Теикопланин A3 лишен как боковых цепей, так и β-D-глюкозаминовой составляющей. Структуры ядра теикопланина и боковых цепей, характеризующих пять основных и четыре второстепенных соединения, представлены ниже. Теикопланин относится к комплексу родственных природных продуктов, выделенных из ферментационного бульона штамма Actinoplanes teichomyceticus, состоящему из группы из пяти структур. Эти структуры обладают общим агликоном, или ядром, состоящим из семи аминокислот, связанных пептидными и эфирными связями с образованием четырехкольцевой системы. Эти пять структур различаются по типу жирноацильной боковой цепи, присоединенной к сахару. Происхождение этих семи аминокислот в биосинтезе теикопланина было изучено с помощью ЯМР 1H и 13C. Исследования показали, что аминокислоты 4 Hpg, 3 Cl Tyr и 3-хлоро-β-гидрокситирозин происходят из тирозина, а аминокислота 3,5-дигидроксифенилглицин (3,5 Dpg) – из ацетата. Теикопланин содержит 6 непротеиногенных аминокислот и три углеводных компонента: N-ацил-β-D-глюкозамин, N-ацетил-β-D-глюкозамин и D-маннозу.

Синтез септампептидной основы

Гептапептидный остов тейкопланина формируется нерибосомными пептидными синтетазами (НРПС) TeiA, TeiB, TeiC и TeiD. Вместе они состоят из семи модулей, каждый из которых содержит ряд доменов, при этом каждый модуль отвечает за включение одной аминокислоты. Модули 1, 4 и 5 активируют L-4Hpg в виде аминоацил-АМФ, модули 2 и 6 активируют L-Tyr, а модули 3 и 7 активируют L-3,5Dpg. Активированные аминокислоты ковалентно связываются с НРПС в виде тиоэстеров с помощью кофактора фосфопантеина, который присоединен к домену белка-носителя пептида (PCP). Затем аминокислоты, связанные с ферментом, соединяются амидными связями под действием домена конденсации (C). Гептапептид тейкопланина содержит 4 D-аминокислоты, образующиеся в результате эпимеризации активированных L-аминокислот. Модули 2, 4 и 5 содержат эпимеризационный (E) домен, который катализирует это изменение. Модуль 1 не содержит E-домена, и предполагается, что эпимеризацию катализирует домен C. В общей сложности шесть из семи аминокислот в составе остова тейкопланина состоят из непротеиногенных или модифицированных аминокислот. Одиннадцать ферментов координированно индуцируются для производства этих шести необходимых остатков. Тейкопланин содержит два хлорированных положения, 2 (3Cl-Tyr) и 6 (3Cl-βHty). Галогеназа Tei8* катализирует галогенирование обоих тирозиновых остатков. Хлорирование происходит на уровне аминоацил-PCP во время биосинтеза, до фенольного окислительного сочетания, при этом тирозин или β-гидрокситирозин могут быть субстратом хлорирования. Гидроксилирование тирозинового остатка модуля 6 также происходит в транс во время сборки гептапептидного остова.

Модификация после образования гептапептидной костной мозга

После формирования пептидного остова гептапептида, линейный фермент-связанный промежуточный продукт циклизуется. OxyB образует первое кольцо, соединяя остатки 4 и 6, а OxyE затем соединяет остатки 1 и 3. OxyA соединяет остатки 2 и 4, после чего OxyC образует C-C связь между остатками 5 и 7. Предполагается, что регио- и атропизомерная селективность этих вероятных реакций сопряжения по одному электрону обусловлена требованиями к сворачиванию и ориентации частично сшитых субстратов в активном центре фермента. Для гликозилирования агликона теикопланина требуются три отдельные гликозилтрансферазы. Tei10* катализирует присоединение GlcNAc к остатку 4, за которым следует деацетилирование, катализируемое Tei2*. Затем ацильная цепь (полученная в результате действия Tei30* и Tei13*) добавляется Tei11*. После этого Tei1 присоединяет второй GlcNAc к β-гидроксильной группе остатка 6, за которым следует маннозилирование остатка 7, катализируемое Tei3*.