Сравнивайте с английским: нажмите на абзац — оригинал откроется в окне. Кнопка EN под абзацем показывает его прямо в тексте.
Введение
Полиморфизм амплифицированных фрагментов длины (AFLP PCR или AFLP) – это инструмент, основанный на ПЦР, который используется в генетических исследованиях, ДНК-дактилоскопии и в практике генетической инженерии. Разработанный в начале 1990-х годов компанией KeyGene, AFLP использует рестрикционные ферменты для расщепления геномной ДНК, за которым следует лигация адаптеров к липким концам рестрикционных фрагментов. Затем выбирается подмножество рестрикционных фрагментов для амплификации. Этот отбор достигается с помощью праймеров, комплементарных последовательности адаптера, последовательности рестрикционного сайта и нескольких нуклеотидов внутри рестрикционных фрагментов (как подробно описано ниже). Амплифицированные фрагменты разделяются и визуализируются при денатурации с помощью электрофореза в агарозном геле, либо посредством авторадиографии или флуоресцентных методик, либо с использованием автоматизированных капиллярных секвенаторов. Хотя AFLP не следует использовать как аббревиатуру, его часто называют "полиморфизмом амплифицированных фрагментов длины". Однако полученные данные не оцениваются как полиморфизмы длины, а вместо этого – как полиморфизмы по наличию и отсутствию. AFLP PCR – это высокочувствительный метод для выявления полиморфизмов в ДНК. Метод был впервые описан Восом и Забео в 1993 году, но он также способен амплифицировать от 50 до 100 фрагментов одновременно. Кроме того, для амплификации не требуется предварительной информации о последовательности (Meudt & Clarke 2007). В результате AFLP стал чрезвычайно полезным в изучении таксонов, включая бактерии, грибы и растения, где многое до сих пор неизвестно о геномном составе различных организмов. Технология AFLP защищена патентами и патентными заявками Keygene N. V. AFLP является зарегистрированным товарным знаком Keygene N. V.
Amplified fragment length polymorphism (AFLP PCR or AFLP) is a PCR based tool used in genetics research, DNA fingerprinting, and in the practice of genetic engineering. Developed in the early 1990s by KeyGene, AFLP uses restriction enzymes to digest genomic DNA, followed by ligation of adaptors to the sticky ends of the restriction fragments. A subset of the restriction fragments is then selected to be amplified. This selection is achieved by using primers complementary to the adaptor sequence, the restriction site sequence and a few nucleotides inside the restriction site fragments (as described in detail below). The amplified fragments are separated and visualized on denaturing on agarose gel electrophoresis, either through autoradiography or fluorescence methodologies, or via automated capillary sequencing instruments. Although AFLP should not be used as an acronym, it is commonly referred to as "Amplified fragment length polymorphism". However, the resulting data are not scored as length polymorphisms, but instead as presence absence polymorphisms. AFLP PCR is a highly sensitive method for detecting polymorphisms in DNA. The technique was originally described by Vos and Zabeau in 1993. but it also has the capability to amplify between 50 and 100 fragments at one time. In addition, no prior sequence information is needed for amplification (Meudt & Clarke 2007). As a result, AFLP has become extremely beneficial in the study of taxa including bacteria, fungi, and plants, where much is still unknown about the genomic makeup of various organisms. The AFLP technology is covered by patents and patent applications of Keygene N. V. AFLP is a registered trademark of Keygene N. V.