Введение

Сложный механизм оплодотворения цветковых растений

Двойное оплодотворение или двойное оплодотворение (см. различия в написании) — это сложный механизм оплодотворения цветковых растений (ангиоспермы). Этот процесс включает в себя соединение женского гаметофита (мегагаметофита, также называемого эмбриональным мешком) с двумя мужскими гаметами (спермиями). Он начинается, когда пыльцевое зерно прилипает к рыльцу пестика, женской репродуктивной структуры цветка. Затем пыльцевое зерно поглощает влагу и начинает прорастать, формируя пыльцевую трубку, которая растет вниз к завязи через столбик. Кончик пыльцевой трубки затем входит в завязь и проникает через микропиле в семязачатке. Пыльцевая трубка высвобождает две спермии в эмбриональные мешки. Клетки эмбрионального мешка неоплодотворенного семязачатка насчитывают 8 и расположены в виде 3+2+3 (сверху вниз), то есть 3 антиподальные клетки, 2 полярные центральные клетки, 2 синергиды и 1 яйцеклетка. Одна спермия оплодотворяет яйцеклетку, а другая спермия сливается с двумя полярными ядрами большой центральной клетки мегагаметофита. Гаплоидная спермия и гаплоидная яйцеклетка объединяются, образуя диплоидную зиготу, этот процесс называется синггамией, в то время как другая спермия и два гаплоидных полярных ядра большой центральной клетки мегагаметофита образуют триплоидное ядро (тройное слияние). У некоторых растений могут формироваться полиплоидные ядра. Большая клетка гаметофита затем развивается в эндосперм — ткань, богатую питательными веществами, которая обеспечивает питание развивающемуся эмбриону. Завязь, окружающая семязачатки, развивается в плод, который защищает семена и может способствовать их распространению. Два центральных материнских ядра клеток (полярные ядра), которые вносят вклад в эндосперм, образуются путем митоза из одного и того же мейотического продукта, который дал начало яйцеклетке. Материнский вклад в генетическую конституцию триплоидного эндосперма вдвое больше, чем вклад спермии. В исследовании, проведенном в 2008 году на Arabidopsis thaliana, впервые с использованием in vivo визуализации была задокументирована миграция мужских ядер внутри женской гаметы и их слияние с женскими ядрами. Также были определены некоторые гены, участвующие в процессе миграции и слияния. Сообщается о наличии признаков двойного оплодотворения у гнетовых, которые являются семенными растениями, не образующими цветков.

Краткая история

Двойное оплодотворение было открыто более века назад Сергеем Наващиным в Киеве и Леоном Гиньяром во Франции. Каждый из них сделал это открытие независимо друг от друга. Первые наблюдения двойного оплодотворения, выполненные с использованием классического светового микроскопа, были проведены на Lilium martagon и Fritillaria tenella. Ограничения световой микроскопии оставляли множество вопросов без ответа относительно процесса двойного оплодотворения. Однако, с развитием электронной микроскопии, многие из этих вопросов были разрешены. Особенно важно, что наблюдения группы В. Дженсена показали отсутствие клеточных стенок у мужских гамет и тесное прилегание плазматической мембраны гамет к плазматической мембране клетки, окружающей их внутри пыльцевого зерна.

Двойное оплодотворение у гимносперм

Гораздо более примитивная форма двойного оплодотворения наблюдается при половом размножении в порядке голосеменных, обычно известных как гнеталы. У Ephedra nevadensis одна двуядерная сперматозоидная клетка попадает в яйцеклетку. После первоначального оплодотворения второе ядро сперматозоида направляется к оплодотворению дополнительного ядра яйцеклетки, находящегося в цитоплазме яйцеклетки. У большинства других семенных растений это второе "ядро брюшного канала" обычно оказывается функционально бесполезным. У Gnetum gnemon многочисленные свободные ядра яйцеклеток присутствуют в женской цитоплазме внутри женского гаметофита. После проникновения зрелого женского гаметофита пыльцевой трубкой, женская цитоплазма и свободные ядра перемещаются, чтобы окружить пыльцевую трубку. Из двуядерной сперматозоидной клетки высвобождаются два ядра сперматозоидов, которые затем сливаются со свободными ядрами яйцеклеток, образуя два жизнеспособных зигота – гомологичный признак семейств Эфедра и Гнетум. В обеих семьях второе оплодотворение приводит к образованию дополнительного диплоидного эмбриона. Этот избыточный эмбрион впоследствии прерывается, что приводит к синтезу только одного зрелого эмбриона. Дополнительный продукт оплодотворения у Ephedra не питает первичный эмбрион, поскольку женский гаметофит отвечает за обеспечение питательными веществами. Сравнительные молекулярные исследования генома G. gnemon показали, что гнетофиты более тесно связаны с хвойными, чем с цветковыми. Отвержение гипотезы антофитов, которая рассматривает гнеталы и цветковые как родственные таксоны, приводит к предположению, что процесс двойного оплодотворения является результатом конвергентной эволюции и возник независимо у гнетофитов и цветковых.

Двойное оплодотворение in vitro

Двойное оплодотворение in vitro часто используется для изучения молекулярных взаимодействий, а также других аспектов слияния гамет у цветковых растений. Одной из основных проблем при проведении двойного оплодотворения in vitro между мужскими и женскими гаметами является ограниченность перемещения спермия в пыльцевой трубке и яйцеклетки в зародышевом мешке. Контролируемое слияние яйцеклетки и спермия уже было достигнуто на примере мака. Наблюдалось нормальное протекание прорастания пыльцы, проникновения пыльцевой трубки и процесса двойного оплодотворения. Фактически, эта техника уже применялась для получения семян у различных цветковых растений и получила название "оплодотворение в пробирке".

Мегагаметофит

Женский гаметофит, мегагаметофит, участвующий в двойном оплодотворении у цветковых растений и являющийся гаплоидным, называется эмбриональным мешком. Он развивается внутри семязачатка, заключенного в завязь у основания пестика. Мегагаметофит окружен (одним или) двумя покровами, которые формируют отверстие, называемое микропиле. Мегагаметофит, обычно гаплоидный, происходит из (обычно диплоидной) материнской клетки мегаспор, также называемой мегаспороцитом. Последующая последовательность событий варьируется в зависимости от вида, но у большинства видов происходят следующие события. Мегаспороцит подвергается мейотическому делению, в результате чего образуются четыре гаплоидные мегаспоры. Только одна из этих четырех мегаспор выживает. Эта мегаспора проходит три раунда митотического деления, в результате чего образуются восемь клеток с восемью гаплоидными ядрами (центральная клетка содержит два ядра, называемые полярными ядрами). Нижний конец эмбрионального мешка состоит из гаплоидной яйцеклетки, расположенной между двумя другими гаплоидными клетками, называемыми синергидами. Синергиды участвуют в привлечении и направлении пыльцевой трубки к мегагаметофиту через микропиле. На верхнем конце мегагаметофита находятся три антиподальные клетки.

Микрогаметофит

Мужские гаметофиты, или микрогаметофиты, участвующие в двойном оплодотворении, содержатся в пыльцевых зернах. Они развиваются в микроспорангиях, или пыльцевых мешках, тычинок. Каждый микроспорангий содержит диплоидные клетки-материнские микроспоры, или микроспороциты. Каждая микроспороцита подвергается мейозу, формируя четыре гаплоидные микроспоры, каждая из которых в конечном итоге может развиться в пыльцевое зерно. Микроспора подвергается митозу и цитокинезу, чтобы образовать две отдельные клетки: генеративную клетку и клетку пыльцевой трубки. Эти две клетки, вместе со стенкой споры, составляют незрелое пыльцевое зерно. По мере созревания мужского гаметофита генеративная клетка перемещается в клетку пыльцевой трубки, где она подвергается митозу, образуя две сперматозоидные клетки. После созревания пыльцевого зерна тычинки раскрываются, высвобождая пыльцу. Пыльца переносится ветром или животными-опылителями на пестик другого цветка и оседает на рыльце. При прорастании пыльцевого зерна клетка пыльцевой трубки образует пыльцевую трубку, которая удлиняется и растет вниз по столбику пестика в завязь, где сперматозоидные клетки высвобождаются в мегагаметофит. Отсюда начинается двойное оплодотворение.