Введение

β-ситостерол (бета-ситостерол) – одно из нескольких фитостеролов (растительных стеролов), имеющих химическую структуру, сходную со структурой холестерина. Это белый, воскообразный порошок с характерным запахом, являющийся одним из компонентов пищевой добавки E499. Фитостеролы гидрофобны и растворимы в спиртах.

Природные явления и пища

Бета-ситостерол широко распространен в растительном мире. Он содержится в растительных маслах, орехах, авокадо и продуктах их переработки, таких как салатные заправки. Olavius algarvensis, вид морских кольчатых червей, преимущественно включает ситостерол в состав своих клеточных мембран вместо холестерина, хотя холестерин также присутствует в этих мембранах.

Исследования на людях

В настоящее время изучается потенциал β-ситостерола в снижении симптомов доброкачественной гиперплазии предстательной железы (ДГПЖ) и уровня холестерина в крови.

Генетическое заболевание

В то время как растительные стеролы обычно полезны, существует редкое аутосомно-рецессивное генетическое заболевание – фитостеролемия, вызывающее избыточное всасывание фитостеролов.

Прекурсор анаболического стероида болденона

Будучи стероидом, β-ситостерол является предшественником анаболического стероида болденона. Болденон-ундециленат обычно используется в ветеринарной медицине для стимуляции роста крупного рогатого скота, но также является одним из наиболее часто используемых анаболических стероидов в спорте. Это вызвало подозрение, что некоторые спортсмены, дающие положительный результат на болденон-ундециленат, на самом деле не употребляли сам гормон, а потребляли продукты, богатые β-ситостеролом.

Химическая инженерия

Использование ситостерола в качестве химического промежуточного продукта на протяжении многих лет было ограничено из-за отсутствия реакционноспособного центра в боковой цепи, позволяющего её отщепить. Интенсивные исследования, проведённые во многих лабораториях, в конечном итоге привели к обнаружению микроорганизма Pseudomonas, эффективно осуществляющего эту трансформацию. Ферментация расщепляет всю алифатическую боковую цепь в положении 17, образуя смесь 17-кетопродуктов, включая дегидроэпиандростерон.

Синтез

Полный синтез β-ситостерола не был осуществлен. Однако β-ситостерол был синтезирован из стигмастерола 1, что включает специфическое гидрирование боковой цепи стигмастерола. Первая стадия синтеза приводит к образованию стигмастерол-тозилата 2 из стигмастерола 1 (чистота 95%) с использованием p-TsCl, DMAP и пиридина (выход 90%). Затем тозилат 2 подвергается сольволизу при обработке пиридином и безводным MeOH, что дает соотношение 5:1 изомера стигмастеролметилового эфира 3 (выход 74%) к стигмастеролметиловому эфиру 4, который впоследствии удаляется с помощью хроматографии. Стадия гидрирования в ранее предложенном синтезе включала катализатор Pd/C и растворитель этилацетат. Однако, из-за изомеризации при гидролизе, были протестированы другие катализаторы, такие как PtO2, и растворители, такие как этанол. Использование другого катализатора не привело к существенным изменениям. Однако этанол предотвратил изомеризацию и образование неустановленной примеси, что позволило получить соединение 5. Последняя стадия синтеза – депротекция двойной связи в β-кольце соединения 5 с использованием p-TsOH, водного диоксана и нагревания (80 °C) для получения β-ситостерола 6. Суммарный выход для двух последних стадий составил 55%, а общий выход для синтеза – 37%.

Биосинтез

Регулирование биосинтеза как стеролов, так и некоторых специфических липидов происходит во время мембранного биогенеза. По данным анализа изотопного мечения 13C установлено, что в образовании β-ситостерола участвуют как мевалонатный, так и дезоксиксилюлозный пути. Точный механизм образования β-ситостерола варьируется в зависимости от организма, но обычно β-ситостерол образуется из циклоартенола. Биосинтез циклоартенола начинается с формирования фарнезилдифосфата (FPP) из одной молекулы изопентенилдифосфата (IPP) и двух молекул диметилаллилдифосфата (DMAPP). Затем две молекулы FPP соединяются «хвост к хвосту», образуя сквален, тритерпен. Сквален, посредством реакции циклизации с 2,3-оксидоскваленом 6 в качестве промежуточного соединения, образует циклоартенол. Двойная связь циклоартенола (соединение 7 на диаграмме) метилируется SAM с образованием карбокатиона, который претерпевает перенос гидрида и теряет протон, образуя соединение с метиленовой боковой цепью. Оба этих этапа катализируются стерольным C24-метилтрансферазой (этап E1 на диаграмме). Соединение 8 затем катализируется стерольным C4-деметилазой (E2) и теряет метильную группу, образуя циклоукаленол. После этого циклопропановое кольцо раскрывается под действием циклоукаленол-циклоизомеразы (E3) с образованием соединения 10. Соединение 10 теряет метильную группу и подвергается аллильной изомеризации с образованием грамистерола 11. Этот этап катализируется стерольным C14-деметилазой (E4), стерольным Δ14-редуктазой (E5) и стерольным Δ8 Δ7-изомеразой (E6). Последняя метильная группа удаляется стерольной деметилазой (E7) с образованием эпистерола 12. Эпистерол 12 метилируется SAM с образованием второго карбокатиона, который теряет протон, образуя соединение 13. Этот этап катализируется 24-метиленэстерол C-метилтрансферазой (E8). Соединение 13 затем подвергается восстановлению NADPH и модификациям в β-кольце с образованием β-ситостерола. У некоторых животных описан альтернативный путь синтеза фитостеролов, ключевым ферментом в котором является стерольметилтрансфераза (SMT).