Введение
Экстрагируемые ядерные антигены (ЭНА) - это более 100 различных растворимых цитоплазматических и ядерных антигенов. Они известны как "экстрагируемые", потому что их можно удалить из ядра клетки с помощью физиологического раствора и представляют собой шесть основных белков: Ro, La, Sm, RNP, Scl 70, Jo1. Большинство ENA являются частью комплексов сплайцеосом или нуклеосом и являются типом небольшого ядерного рибонуклеопротеина (snRNPS). Расположение в ядре и ассоциация со сплайцесомами или нуклеосомами приводит к тому, что эти ENA ассоциируются с дополнительной РНК и белками, такими как полимеразы. Такое качество ЭНА часто затрудняет очистку и количественное определение их присутствия для клинического использования.
Клинические применения
Экстрагируемая панель ядерного антигена, или панель ENA, проверяет наличие в крови аутоантитела, которые реагируют с белками в ядре клетки. Обычно это делается после положительного теста на антинатомные антитела (ANA) и при появлении симптомов аутоиммунного расстройства. ANA проверяет наличие или отсутствие аутоантитела, в то время как группа ENA оценивает, какие белки в ядре клетки распознают аутоантитела. ЭНА помогает диагностировать, различать и контролировать прогрессирование аутоиммунных заболеваний и проводится с помощью простого забора крови. Хотя уровни аутоантитела могут колебаться в течение жизни, как только у человека появятся аутоантитела, они всегда будут у него. Автоантитела к этим антигенам связаны с определенными нарушениями соединительной ткани. Действительно, в 84,3% положительных проб анти-ЭНА также были обнаружены реагенты АНА.
На основе геля
С момента открытия ENA они используются в качестве диагностического инструмента при заболеваниях соединительной ткани. Для выявления анти- ENA и их связи с заболеванием в ранней стадии исследования были использованы два широко используемых метода на основе геля, двойная иммунодиффузия (DID) и контриммуноэлектрофорез (CIEP). Оба этих метода требуют осаждения антигенов для получения действительных результатов. В зависимости от исследуемого анти-ЭНА может использоваться один метод вместо другого. Например, антиген Scl 70 имеет меньший отрицательный заряд, что может привести к тому, что антиген движется в том же направлении, что и антитело. Это приведет к тому, что антигенный комплекс антител не осаждается, что приведет к недействительным результатам. Кроме того, некоторые антитела против SSB, обычно выявляемые при синдроме Шёгрена, могут не быть обнаружены этим методом. Однако этот метод экономически выполним и позволяет подтвердить диагноз. При рассмотрении данных, полученных при использовании этих методов на основе геля, следует учитывать две чувствительности: чувствительность к анализу и чувствительность к заболеванию. Чувствительность к анализу - это способность распознавать наличие антитела, а чувствительность к болезни - это способность распознавать частоту появления антитела при заболевании. Из-за ограничений гелевых методов в отношении чувствительности к болезни были изучены другие методы для повышения чувствительности анализа без снижения чувствительности к болезни. Например, у пациентов с системной красным волчанкой (СЛЭ) только 840% имеют выявленные анти- СМ при использовании гелевых анализов. Было показано, что CIEP более чувствителен, чем DID.
Гемаглютинация, ELISA, Western Blot
Для выявления ENA и их связи с конкретными заболеваниями могут использоваться три дополнительных метода: пассивная гемаглютинация, ферментный иммуносорбционный анализ (ELISA) и западная блоттинговая (Western blotting). Пассивная гемаглютинация была популярна в конце 1970-х годов, но очень мало исследований было проведено с ее использованием и ограничивалась анти-СМ и анти-рибонуклеарным белком (РНП) антителами. Шесть основных антигенов, используемых в иммунологических лабораториях для обнаружения, - это Ro, La, Sm, RNP, Scl 70 и Jo1, которые проверяются методами двойной иммунодиффузии Ouchterlony и подтверждаются иммуноблотингом. На тестах на антиядерные антитела эти антигены имеют пятнистую структуру.