Сравнивайте с английским: нажмите на абзац — оригинал откроется в окне. Кнопка EN под абзацем показывает его прямо в тексте.
Введение
CNQX или цианквиксалин (6-циано-7-нитрохиноксалин-2,3-дион) является конкурентным антагонистом AMPA/каинатных рецепторов. Его химическая формула – C9H4N4O4. CNQX часто используется в сетчатке для блокирования ответов OFF-биполярных клеток при электрофизиологических записях. CNQX является антагонистом глутаматных рецепторов типа α-амино-3-гидрокси-5-метил-4-изоксазолпропионовой кислоты (AMPA) (AMPAR). Исследование влияния CNQX на адаптацию вестибулоокулярного рефлекса было проведено на золотых рыбках путем инъекции CNQX в вестибуло-мозжечок. Инъекция, сделанная перед адаптацией, значительно снижала и, в самых высоких дозах, полностью ингибировала приобретение адаптивных изменений рефлекторного усиления и ослабления в течение трехчасового периода обучения. На исходную эффективность инъекции CNQX не повлияла. Инъекции CNQX в конце периода обучения показали быструю потерю приобретенной вестибулоокулярной рефлекторной адаптации, когда золотая рыбка оставалась неподвижной в темноте. В отличие от инъекции CNQX сразу после тренировки, инъекция, сделанная через один-два часа после начала тренировочного периода, не выявила признаков изменения эффективности. Инъекции CNQX не оказывали долгосрочного постоянного эффекта на способность золотых рыбок к повторному обучению через 48 часов и были сопоставимы с контрольной группой, не подвергавшейся инъекциям CNQX. CNQX не ингибировал адаптивные изменения во время введения.
CNQX or cyanquixaline (6 cyano 7 nitroquinoxaline 2,3 dione) is a competitive AMPA/kainate receptor antagonist. Its chemical formula is C9H4N4O4. CNQX is often used in the retina to block the responses of OFF bipolar cells for electrophysiology recordings. CNQX is an antagonist of α Amino 3 hydroxy 5 methyl 4 isoxazolepropionic acid (AMPA) type glutamate receptors (AMPARs). A study of the effects of CNQX on vestibuloocular reflex adaptation was done on goldfish by injecting CNQX into the vestibulo cerebullum. The injection before adaptation significantly decreased and at the highest doses, completely inhibited the acquisition of adaptive reflex gain increases and decreases during a three hour training period. Baseline performance was not affected by the CNQX injections. Injections of CNQX at the end of the training period shows a rapid loss of gained vestibuloocular reflex adaptation when the goldfish remained stationary in the dark. Instead of injecting CNQX immediately after training, injection made one to two hours after the initiation of the training period showed no signs of altering performance. CNQX injections did not have long term permanent effects on the goldfish's ability to be retrained 48 hours later and was comparable to a control group that was not subjected to CNQX injections. CNQX did not inhibit adaptive changes while the injection was administered.
Исследовательские приложения
Возбуждающая синаптическая передача может быть опосредована изменением реактивности AMPA-рецепторов. Распространенным методом изменения реактивности является изменение количества AMPA-рецепторов в постсинаптической мембране посредством эндоцитоза. Различные стимулы, включая CNQX, оказывают различное влияние на интернализацию AMPA-рецепторов. CNQX, являясь известным конкурентным антагонистом AMPA/каинатных рецепторов, используется в исследованиях, направленных на выяснение, является ли эндоцитоз AMPA-рецепторов лиганд-зависимым. В культуре нейронов гиппокампа CNQX частично ингибировал интернализацию AMPA-рецепторов, стимулируемую AMPA. Однако, при обработке нейронов гиппокампа только CNQX, интернализация AMPA-рецепторов продолжалась как в соме, так и в дендритах. APV (антагонист NMDA-рецепторов) или нимодипин (блокатор кальциевых каналов, активируемых потенциалом) также не смогли блокировать эту интернализацию, что позволяет предположить, что активация рецептора не является обязательным условием для эндоцитоза AMPA-рецепторов. Тип AMPA-рецепторов, подвергающихся эндоцитозу в результате стимуляции CNQX, также можно идентифицировать с помощью CNQX. В клетках HEK, меченных субъединицами GluR, CNQX стимулирует интернализацию рецепторов GluR1 и GluR2. Внутриклеточный участок, консервативный как для GluR1, так и для GluR2 в C-концевом хвосте GluR2, был идентифицирован и удален. Удаление этого сегмента привело к снижению конститутивного эндоцитоза рецептора GluR2 в клетках HEK, что позволило определить последовательность, определяющую этот эффект. CNQX известен как селективный конкурентный антагонист как AMPA-рецепторов (IC50 400 нМ), так и каинатных рецепторов (IC50 4 мкм). Он также неконкурентно ингибирует NMDA-рецепторы. Таким образом, CNQX используется для выделения спонтанных ингибирующих постсинаптических токов, опосредованных GABAA-рецепторами. Действие CNQX на частоту спонтанных ингибирующих постсинаптических токов не зависит от его действия на ионотропные глутаматные рецепторы. Хотя значение EC50 CNQX для частоты спонтанных ингибирующих постсинаптических токов сопоставимо со значением IC50 для каинатных рецепторов, блокада каинатных рецепторов не объясняет действие CNQX. NBQX, производное квиноксалина, более эффективно блокирует каинатные рецепторы, чем CNQX, однако значительного увеличения частоты спонтанных ингибирующих постсинаптических токов не наблюдалось. Кроме того, эффекты CNQX не были воспроизведены кинуренатом (антагонист глутаматных рецепторов) или NS 102 (селективный блокатор каинатных рецепторов), поскольку не было отмечено увеличения частоты спонтанных ингибирующих постсинаптических токов. Более того, D-AP5 и 7-CIK не влияли на частоту спонтанных ингибирующих постсинаптических токов, что доказывает, что действие NMDA-рецепторов не объясняет эффекты CNQX.
Excitatory synaptic transmission can be mediated through changing the responsiveness of AMPA receptors. One common method of altering responsiveness is changing the number of AMPA receptors in the postsynaptic membrane through endocytosis. Various stimuli, including CNQX, have diverse effects on AMPA receptor internalization. Known to be a competitive antagonist of the AMPA/kainate receptor, CNQX is used in studies investigating whether or not AMPA receptor endocytosis is ligand dependent. In a culture of hippocampal neurons, CNQX partially inhibited AMPA receptor internalization that was stimulated by AMPA. However, when the hippocampal neurons were treated with CNQX alone, AMPA receptor internalization still took place in both the soma and dendrites. APV (NMDA receptor antagonist) or nimodipine (voltage gated calcium channel blocker) were also not able to block this internalization, suggesting that receptor activation is not a requirement for AMPA receptor endocytosis. The type of AMPA receptors endocytosed as a result of CNQX stimulation can also be identified using CNQX. In HEK cells tagged with GluR subunits, CNQX stimulates the internalization of GluR1 and GluR2 receptors. The intracellular region conserved in both GluR1 and GluR2 on the GluR2 C terminal tail was identified and deleted. Deletion of this segment resulted in a decrease in constitutive endocytosis of the GluR2 receptor in HEK cells, pinpointing the sequence determining this effect. CNQX is known to be a selective competitive antagonist for both AMPA receptors, which have an IC50 value of 400 nM, and kainate receptors, which have an IC50 value of 4 μM. It also noncompetitively inhibits NMDA receptors. CNQX is thus used to isolate GABAA receptor mediated spontaneous inhibitory postsynaptic currents. The actions of CNQX on the frequency of spontaneous inhibitory postsynaptic currents are independent of their actions at ionotropic glutamate receptors. Although the EC50 value of CNQX on the frequency of spontaneous inhibitory postsynaptic currents is similar to the IC50 value on kainate receptors, the blockade of kainate receptors is not responsible for the actions of CNQX. NBQX is a quinoxaline derivative that is known to be more effective than CNQX in blocking kainate receptors, but there was not a large increase in the frequency of spontaneous inhibitory postsynaptic currents. Additionally, CNQX's effects were not replicated by kynurenate (glutamate receptor antagonist) or NS 102 (selective kainate receptor blocker) since there was no increase in the frequency of spontaneous inhibitory postsynaptic currents. Furthermore, D AP5 and 7 CIK did not affect the frequency of spontaneous inhibitory postsynaptic currents, proving that the action of NMDA receptors do not account for the effects of CNQX.