Введение
Белки, активируемые гормоном эстрогеном
Эстрогенные рецепторы (ЭР) – это группа белков, находящихся внутри клеток. Они являются рецепторами, которые активируются гормоном эстрогеном (17β-эстрадиолом). Существуют два класса ЭР: ядерные эстрогенные рецепторы (ERα и ERβ), которые являются представителями семейства ядерных рецепторов – внутриклеточных рецепторов, и мембранные эстрогенные рецепторы (mER) (GPER (GPR30), ER X и Gq mER), которые преимущественно являются G-белок-связанными рецепторами. В данной статье речь пойдет о первых (ER). После активации эстрогеном, ЭР способен перемещаться в ядро и связываться с ДНК для регуляции активности различных генов (то есть является ДНК-связывающим фактором транскрипции). Однако он также обладает дополнительными функциями, не зависящими от связывания с ДНК. Как гормональные рецепторы для половых стероидов (рецепторы стероидных гормонов), ЭР, андрогенные рецепторы (AR) и прогестеронные рецепторы (PR) играют важную роль в половом созревании и гестации.
Протеомика
Существуют две различные формы эстрогенного рецептора, обычно называемые α и β, каждая из которых кодируется отдельным геном (и , соответственно). Активированные гормонами эстрогенные рецепторы образуют димеры, и поскольку эти две формы коэкспрессируются во многих типах клеток, рецепторы могут образовывать гомодимеры ERα (αα) или ERβ (ββ) или гетеродимеры ERαβ (αβ). Эстрогенные рецепторы альфа и бета демонстрируют значительную общую гомологию последовательностей и оба состоят из пяти доменов, обозначенных A/B – F (перечислены от N-конца к C-концу; номера аминокислотной последовательности относятся к человеческому ER). N-концевой домен A/B способен трансактивировать транскрипцию генов в отсутствие связанного лиганда (например, гормона эстрогена). Хотя этот участок способен активировать транскрипцию генов без лиганда, эта активация слаба и более селективна по сравнению с активацией, обеспечиваемой доменом E. Домен C, также известный как домен связывания ДНК, связывается с эстроген-чувствительными элементами в ДНК. Домен D – это шарнирный участок, соединяющий домены C и E. Домен E содержит полость для связывания лиганда, а также сайты связывания коактиваторов и корепрессорных белков. Домен E в присутствии связанного лиганда способен активировать транскрипцию генов. Функция C-концевого домена F не совсем ясна и варьируется по длине. Вследствие альтернативного сплайсинга РНК известно о существовании нескольких изоформ ER. Было идентифицировано как минимум три изоформы ERα и пять изоформ ERβ. Подтипы рецепторов изоформ ERβ могут трансактивировать транскрипцию только при образовании гетеродимера с функциональным рецептором ERβ1 массой 59 кДа. Рецептор ERβ3 был обнаружен в высоких концентрациях в яичках. Две другие изоформы ERα имеют массу 36 и 46 кДа. Рецептор ERγ описан только у рыб, но не у человека.
Генетика
У людей две формы эстрогенового рецептора кодируются разными генами, расположенными на шестой и четырнадцатой хромосомах (6q25.1 и 14q23.2) соответственно.
Агонисты
Эндогенные эстрогены (например, эстрадиол, эстрон, эстриол, эстетрол)
Натуральные эстрогены (например, конъюгированные эстрогены)
Синтетические эстрогены (например, этинилэстрадиол, диэтилстильбестрол)
Natural estrogens (e. g., conjugated estrogens)
Synthetic estrogens (e. g., ethinylestradiol, diethylstilbestrol)
Смешанный (агонист и антагонист)
Фитоэстрогены (например, куместрол, дайдзеин, генистеин, мироэстрол)
Селективные модуляторы рецепторов эстрогена (например, тамоксифен, кломифен, ралоксифен)
Selective estrogen receptor modulators (e. g., tamoxifen, clomifene, raloxifene)
Антагонисты
Антиэстрогены (например, фулвестрант, ICI 164384, этамокситрифетол)
Трансдукция сигнала
Поскольку эстроген — это стероидный гормон, он способен проникать через фосфолипидные мембраны клетки, поэтому рецепторам не требуется быть связанными с мембраной для взаимодействия с эстрогеном.
Геном
При отсутствии гормона рецепторы эстрогена преимущественно локализуются в цитозоле. Связывание гормона с рецептором запускает ряд событий, начиная с миграции рецептора из цитозоля в ядро, димеризации рецептора и последующего связывания димера рецептора со специфическими последовательностями ДНК, известными как гормональные элементы ответа. Комплекс ДНК/рецептор затем рекрутирует другие белки, ответственные за транскрипцию нижележащей ДНК в мРНК и, в конечном итоге, в белок, что приводит к изменению функции клетки. Эстрогеновые рецепторы также обнаруживаются в ядре клетки, и оба подтипа эстрогеновых рецепторов имеют домен связывания ДНК и могут функционировать как факторы транскрипции, регулируя продукцию белков. Рецептор также взаимодействует с активаторным белком 1 и Sp 1 для стимуляции транскрипции посредством нескольких коактиваторов, таких как PELP 1. Прямая ацетилирование эстрогенового рецептора альфа в лизиновых остатках шарнирной области p300 регулирует трансактивацию и гормональную чувствительность.
Негеномные
Некоторые рецепторы эстрогена ассоциируются с клеточной мембраной и могут быть быстро активированы при воздействии эстрогена на клетки. Кроме того, часть ER может ассоциироваться с клеточными мембранами посредством связывания с кавеолином 1 и образовывать комплексы с G-белками, стриатином, рецепторными тирозинкиназами (например, EGFR и IGF-1) и нерецепторными тирозинкиназами (например, Src). Через рецепторные тирозинкиназы сигналы передаются в ядро по митоген-активированному протеинкиназному (MAPK/ERK) и фосфоинозитид-3-киназному (PI3K/AKT) путям. Гликогенсинтаза киназа 3 (GSK) 3β ингибирует транскрипцию ядерного ER, ингибируя фосфорилирование серина 118 ядерного ERα. Фосфорилирование GSK 3β снимает его ингибирующее действие, что может быть достигнуто посредством PI3K/AKT и MAPK/ERK путей, через rsk. Показано, что 17β-эстрадиол активирует G-белок-связанный рецептор GPR30. Однако субклеточная локализация и роль этого рецептора до сих пор остаются предметом дискуссий.
Рак
Рецепторы эстрогена сверхэкспрессируются примерно в 70% случаев рака молочной железы, что обозначается как "ER-положительный", и их наличие в таких тканях можно продемонстрировать с помощью иммуногистохимии. Для объяснения того, почему это вызывает опухолеобразование, предложено две гипотезы, и имеющиеся данные свидетельствуют о том, что оба механизма вносят вклад: во-первых, связывание эстрогена с ER стимулирует пролиферацию клеток молочной железы, что приводит к увеличению клеточного деления и репликации ДНК, и, как следствие, к мутациям. Во-вторых, метаболизм эстрогенов производит генотоксичные продукты распада. Результатом обоих процессов является нарушение клеточного цикла, апоптоз и репарация ДНК, что повышает вероятность формирования опухоли. ERα достоверно связан с более дифференцированными опухолями, в то время как данные о вовлеченности ERβ остаются противоречивыми. Идентифицированы различные варианты гена ESR1 (с однонуклеотидными полиморфизмами), которые ассоциированы с различным риском развития рака молочной железы. Эндокринная терапия рака молочной железы включает селективные модуляторы рецепторов эстрогена (SERM), такие как тамоксифен, действующие как антагонисты ER в ткани молочной железы, или ингибиторы ароматазы, такие как анастрозол. Статус ER используется для определения чувствительности поражений рака молочной железы к тамоксифену и ингибиторам ароматазы. Другой SERM, ралоксифен, применялся в качестве профилактической химиотерапии для женщин с высоким риском развития рака молочной железы. Другой химиотерапевтический антиэстроген, ICI 182,780 (Faslodex), который действует как полный антагонист, также стимулирует деградацию рецептора эстрогена. Однако, развитие первичной резистентности к эндокринной терапии снижает эффективность применения конкурентных ингибиторов, таких как тамоксифен. Лишение гормонов с помощью ингибиторов ароматазы также оказывается неэффективным. Массивно-параллельное секвенирование генома выявило частое наличие точечных мутаций в ESR1, которые являются драйверами резистентности и способствуют переходу ERα в агонистическую конформацию без связанного лиганда. Такая конститутивная, эстроген-независимая активность обусловлена специфическими мутациями, такими как D538G или Y537S/C/N, в лигандосвязывающем домене ESR1 и стимулирует пролиферацию клеток и прогрессирование опухоли без гормональной стимуляции.
First, binding of estrogen to the ER stimulates proliferation of mammary cells, with the resulting increase in cell division and DNA replication, leading to mutations. Second, estrogen metabolism produces genotoxic waste. The result of both processes is disruption of cell cycle, apoptosis and DNA repair, which increases the chance of tumour formation. ERα is certainly associated with more differentiated tumours, while evidence that ERβ is involved is controversial. Different versions of the ESR1 gene have been identified (with single nucleotide polymorphisms) and are associated with different risks of developing breast cancer. Endocrine therapy for breast cancer involves selective estrogen receptor modulators (SERMS), such as tamoxifen, which behave as ER antagonists in breast tissue, or aromatase inhibitors, such as anastrozole. ER status is used to determine sensitivity of breast cancer lesions to tamoxifen and aromatase inhibitors. Another SERM, raloxifene, has been used as a preventive chemotherapy for women judged to have a high risk of developing breast cancer. Another chemotherapeutic anti estrogen, ICI 182,780 (Faslodex), which acts as a complete antagonist, also promotes degradation of the estrogen receptor. However, de novo resistance to endocrine therapy undermines the efficacy of using competitive inhibitors like tamoxifen. Hormone deprivation through the use of aromatase inhibitors is also rendered futile. Massively parallel genome sequencing has revealed the common presence of point mutations on ESR1 that are drivers for resistance, and promote the agonist conformation of ERα without the bound ligand. Such constitutive, estrogen independent activity is driven by specific mutations, such as the D538G or Y537S/C/N mutations, in the ligand binding domain of ESR1 and promote cell proliferation and tumor progression without hormone stimulation.
Менопауза
Метаболические эффекты эстрогена у женщин в постменопаузе связаны с генетическим полиморфизмом бета-рецептора эстрогена (ERβ).
Старение
Исследования на мышах-самках показали, что альфа-рецептор эстрогена снижается в преоптическом гипоталамусе с возрастом. Самки мышей, которым на протяжении большей части жизни давали диету с ограниченной калорийностью, поддерживали более высокий уровень ERα в преоптическом гипоталамусе, чем их сородичи, не получавшие такой диеты. Ожирение также наблюдалось у самок мышей с дефицитом эстрогена, у которых отсутствовал рецептор фолликулостимулирующего гормона. Влияние низкого уровня эстрогена на увеличение веса и развитие ожирения было связано с альфа-рецептором эстрогена.
SERM для других целей обработки
СЭРМ также изучаются для лечения миомы матки и эндометриоза.
Синдром нечувствительности к эстрогенам
Синдром нечувствительности к эстрогенам – редкое интерсексуальное состояние, о котором известно всего 5 случаев, при котором рецепторы эстрогена не функционируют. Фенотип проявляется выраженной маскулинизацией. В отличие от синдрома нечувствительности к андрогенам, СНЭ не приводит к смене фенотипического пола. Это крайне редкое заболевание, аналогичное СНА и некоторым формам гиперплазии надпочечников. Причина, по которой СНА встречается часто, а СНЭ – исключительно редко, заключается в том, что XX СНА не вызывает бесплодия и, следовательно, может передаваться по материнской линии, в то время как СНЭ всегда приводит к бесплодию вне зависимости от кариотипа. В СНЭ также наблюдается петля отрицательной обратной связи в эндокринной системе, при которой половые железы производят значительно повышенные уровни эстрогена у людей с СНЭ (119–272 пг/мл XY и 750–3500 пг/мл XX, см. средние значения), однако феминизирующего эффекта не возникает.
Открытие
Эстрогенные рецепторы были впервые идентифицированы Элвудом В. Дженсеном в Чикагском университете в 1958 году, за что Дженсен был удостоен премии Ласкера. Ген второго эстрогенного рецептора (ERβ) был идентифицирован в 1996 году Kuiper и соавторами в предстательной железе и яичнике крысы с использованием вырожденных праймеров ERalpha.