Сравнивайте с английским: нажмите на абзац — оригинал откроется в окне. Кнопка EN под абзацем показывает его прямо в тексте.
Содержание
Введение
Анализ крови с использованием фенолфталеина
Blood test utilizing phenolphthalein
Тест Кастела-Майера – это предварительный анализ крови, впервые описанный в 1903 году, в котором химический индикатор фенолфталеин используется для выявления возможного присутствия гемоглобина. Он основан на пероксидазоподобной активности гемоглобина в крови, катализирующей окисление фенолфталина (бесцветной восстановленной формы фенолфталеина) в фенолфталеин, который проявляется в виде яркого розового цвета. Тест Кастела-Майера является разновидностью каталитического анализа крови – одного из двух основных классов судебно-медицинских тестов, обычно применяемых криминалистическими лабораториями для химической идентификации крови. Другим классом тестов, используемых для этой цели, являются микрокристаллические тесты, такие как тест на кристаллы Тейхмана и тест на кристаллы Такаямы. Тест назван в честь американского агрохимика Джозефа Хоэинга Кастла (1864–1916), который в 1901 году разработал и испытал первоначальный анализ крови, и немецкого врача и химика Эриха Майера (1874–1927), который модифицировал тест в 1903 году. В 1903 году Эрих Мейер в Германии обнаружил, что реакцию могут вызывать и клетки крови. В 1906 году Кастл и Амосс установили, что реакцию вызывает гемоглобин цыплят, содержащийся в крови. В 1909 году Кастл обнаружил, что тест чувствителен к сильно разбавленным образцам крови. Однако в 1908 году Поцци Эскот (к тому времени проживавший в Лиме, Перу) обнаружил, что тест даёт ложноположительные реакции на ряд веществ, отличных от крови.
The Kastle–Meyer test is a presumptive blood test, first described in 1903, in which the chemical indicator phenolphthalein is used to detect the possible presence of hemoglobin. It relies on the peroxidase like activity of hemoglobin in blood to catalyze the oxidation of phenolphthalin (the colorless reduced form of phenolphthalein) into phenolphthalein, which is visible as a bright pink color. The Kastle–Meyer test is a form of catalytic blood test, one of the two main classes of forensic tests commonly employed by crime labs in the chemical identification of blood. The other class of tests used for this purpose are microcrystal tests, such as the Teichmann crystal test and the Takayama crystal test. The test was named after the American agricultural chemist, Joseph Hoeing Kastle (1864–1916), who in 1901, invented and tested the crude blood test, and the German physician and chemist, Erich Meyer (1874–1927), who modified the test in 1903. In 1903, Erich Meyer in Germany found that blood cells could also trigger the reaction. In 1906, Kastle and Amoss found that chick hemoglobin in blood triggered the reaction. In 1909, Kastle found that the test was sensitive to very dilute samples of blood. However, in 1908, Pozzi Escot (who by then was living in Lima, Peru) found that the test produced false positive reactions in response to a number of substances besides blood.
Метод
Предполагаемый образец крови сначала собирают с помощью тампона. К образцу добавляется капля реагента фенолфталеина, а через несколько секунд на тампон наносится капля перекиси водорода. Если тампон быстро становится розовым, считается, что тест дает предварительно положительный результат на кровь. Ожидание более 30 секунд приведет к тому, что большинство тампонов приобретут розовый оттенок естественным образом, окисляясь на воздухе. Для повышения чувствительности и специфичности тампон может быть предварительно обработан каплей этанола для лизиса присутствующих клеток. Этот тест не повреждает образец, который можно сохранить и использовать для дальнейших исследований в лаборатории; однако, немногие лаборатории используют тампон, использованный для теста Кастеля–Майера, в последующих анализах, предпочитая брать свежий тампон непосредственно с исходного пятна.
A presumed blood sample is first collected with a swab. A drop of phenolphthalein reagent is added to the sample, and after a few seconds, a drop of hydrogen peroxide is applied to the swab. If the swab turns pink rapidly, it is said to test presumptive positive for blood. Waiting for periods over 30 seconds will result in most swabs turning pink naturally as they oxidize on their own in the air. Optionally, the swab can first be treated with a drop of ethanol in order to lyse the cells present and gain increased sensitivity and specificity. This test is nondestructive to the sample, which can be kept and used in further tests at the lab; however, few labs would use the swab used for the Kastle–Meyer test in any further testing, opting instead to use a fresh swab of the original stain.
Ограничения
Хотя тест Кастель-Майера, как сообщается, способен обнаруживать разведения крови до 1:107, у этого теста есть ряд важных ограничений. Химические окислители, такие как соли меди и никеля, могут вызвать розовое окрашивание реагента Кастель-Майера еще до добавления перекиси водорода, поэтому крайне важно сначала добавить реагент, затем подождать несколько секунд и только после этого добавить перекись водорода. Тест Кастель-Майера дает одинаковую реакцию с человеческой кровью и с любой другой кровью, содержащей гемоглобин, поэтому для окончательного определения видовой принадлежности крови необходимо провести подтверждающий тест, например, тест Оухтерлони. Цветокаталитические тесты очень чувствительны, но не специфичны. Положительный цветовой тест сам по себе не следует интерпретировать как окончательное доказательство наличия крови. Отрицательный результат обычно свидетельствует об отсутствии обнаруживаемых количеств гема, однако ложноотрицательный результат может возникнуть в присутствии восстановителя. Тест не позволяет получить конкретные данные о составе крови.
While the Kastle–Meyer test has been reported as being able to detect blood dilutions down to 1:107, there are a number of important limitations to the test. Chemical oxidants such as copper and nickel salts will cause the Kastle–Meyer reagent to turn pink before the addition of the hydrogen peroxide, thus it is vitally important to add the reagent first, then wait a few seconds, then add the hydrogen peroxide. The Kastle–Meyer test has the same reaction with human blood as it does with any other hemoglobin based blood, so a confirmatory test such as the Ouchterlony test must be performed to definitively conclude from which species the blood originated. Color catalytic tests are very sensitive, but not specific. The positive color test alone should not be interpreted as positive proof of blood. A negative result is generally proof of the absence of detectable quantities of heme, however a false negative can be generated in the presence of a reducing agent. The test is unable to give specific evidence as to what is in the blood.
Другие источники
Куллифорд, Брайан Дж., "Исследование и типирование пятен крови в криминалистической лаборатории", Вашингтон, округ Колумбия: Государственная типография США, 1971. Gaensslen, Robert E., Sourcebook in Forensic Serology, Immunology, and Biochemistry, Вашингтон, округ Колумбия: Государственная типография США, 1983. Кирк, Пол Л., Расследование преступлений, John Wiley and Son, 1974. Лаборатория криминалистики полиции столицы, Руководство по биологическим методам, 1978. Понсе, Ана Кастельо; Паскуаль, Фернандо А. Верду, "Критический обзор презимптивных тестов для пятен крови", Forensic Science Communications, т. 1, № 2, июль 1999 г., стр. 1–15. Саферштейн, Ричард, Справочник по судебной науке, Prentice Hall, Inc., 1982.
Culliford, Bryan J., The Examination and Typing of Bloodstains in the Crime Laboratory, Washington, D. C.: U. S. Government Printing Office, 1971. Gaensslen, Robert E., Sourcebook in Forensic Serology, Immunology, and Biochemistry, Washington, D. C.: U. S. Government Printing Office, 1983. Kirk, Paul L., Crime Investigation, John Wiley and Son, 1974. Metropolitan Police Forensic Science Laboratory, Biology Methods Manual, 1978. Ponce, Ana Castelló; Pascual, Fernando A. Verdú, "Critical Revision of Presumptive Tests for Bloodstains," Forensic Science Communications, vol. 1, No. 2, July 1999, pages 1–15. Saferstein, Richard, Forensic Science Handbook, Prentice Hall, Inc., 1982.