Введение
Вариант гемоглобина А. Гемоглобин А2 (HbA2) – это нормальный вариант гемоглобина А, состоящий из двух альфа- и двух дельта-цепей (α2δ2) и содержащийся в небольших количествах в нормальной человеческой крови. Уровень гемоглобина А2 может быть повышен при бета-талассемии или у людей, являющихся носителями гена бета-талассемии. HbA2 присутствует в небольших количествах у всех взрослых (1,5–3,1% от общего количества молекул гемоглобина) и обычно находится в пределах нормы у людей с серповидноклеточной анемией. Его биологическая значимость пока не установлена. Несмотря на кажущуюся физиологическую незначительность, HbA2 играет важную роль в диагностике признаков бета-талассемии, также известной как BTT, и других нарушений гемоглобина. Человеческий гемоглобин состоит из двух различных цепей – альфа- и бета-глобина. В крови существуют два варианта: HbA и HbA2, которые различаются всего на 10 аминокислот. Эти два варианта имеют отличия в составе альфа- и бета-глобиновых цепей. HbA2 является важным компонентом скрининговых программ, направленных на выявление бета-талассемии и гемоглобинопатий. Обычно нормальный уровень HbA2 составляет от 2,1% до 3,2%, однако эти значения могут изменяться в зависимости от индивидуальных факторов и различных гемоглобинных или гематологических показателей. Определение уровня HbA2 может быть затруднено, поскольку различные заболевания могут приводить к его повышению или понижению. Диагностика носительства бета-талассемии обычно подтверждается при уровне HbA2 выше 3,5%.
Hemoglobin A2 (HbA2) is a normal variant of hemoglobin A that consists of two alpha and two delta chains (α2δ2) and is found at low levels in normal human blood. Hemoglobin A2 may be increased in beta thalassemia or in people who are heterozygous for the beta thalassemia gene. HbA2 exists in small amounts in all adult humans (1.5–3.1% of all hemoglobin molecules) and is approximately normal in people with sickle cell disease. Its biological importance is not yet known. HbA2 may seem physiologically minor, but it plays a very crucial role in identifying the beta thalassemia traits, also known as BTT, and identifying other hemoglobin disorders. Human hemoglobin is made up of two different chains, this includes alpha globin and beta globin. In the blood, there are two different variants, HbA and HbA2, and these variants only differ by 10 amino acids. These two variants have distinctions with the alpha and beta globin chains. HbA2 is a vital component for screening programs targeting beta thalassemia and hemoglobin pathogens. Typically the normal HbA2 levels range from 2.1% to 3.2%, but these values may change based on individual factors and different hemoglobin or hematological patterns. Testing HbA2 levels can be challenging because different disorders can cause it to have higher or lower values. Testing for the beta thalassemia trait is usually identified when the value of HbA2 is higher than 3.5%.
Избыток
Повышенные уровни HbA2, превышающие 3,5%, указывают на возможную мутацию в генах бета-глобина. Эта мутация обычно возникает в промоторных областях 87 и 88, которые влияют на проксимальный элемент CACCC. Другой причиной повышения уровня HbA2 является делеция оснований, расположенных вблизи генов бета-глобина. Эта делеция приводит к увеличению уровня HbA2 из-за удаления регуляторных участков локуса в бета-промоторе. Этот специфический промотор играет важную роль во взаимодействии генов с генами гамма- и бета-глобина, обеспечивая экспрессию обоих генов. Данное заболевание является наиболее распространенным аутосомно-рецессивным заболеванием в некоторых странах. Гемоглобин A2 используется для диагностики талассемий, включая бета- и альфа-типы. При бета-талассемии у пациентов наблюдается повышенный уровень HbA2, что может служить потенциальным индикатором гетерозиготного носительства гена заболевания. Нормальные значения находятся в диапазоне от 2,1 до 3,2%, но при бета-талассемии они повышаются до 3,5–6,0%. Кроме того, у пациентов с бета-талассемией отмечается повышенное количество эритроцитов и пониженный уровень гемоглобина. У людей с пониженным уровнем гемоглобина A2 диагностируется носительство альфа-талассемии (a0) или гомозиготная форма альфа-талассемии (a+).
Лабораторные методы
Гемоглобин А2 играет ключевую роль в скрининге и определении носительства бета-талассемии. Существуют различные лабораторные методы, каждый из которых обеспечивает разную степень точности. Различные методы количественного определения HbA2 зависят от эффективности разделения его от других вариантов гемоглобина. Используются такие методы, как высокоэффективная жидкостная хроматография с катионным обменом (ВЭЖХ), микроколоночная хроматография и электрофорез ацетата целлюлозы с элюцией. Изначально для измерения HbA2 использовался электрофорез ацетата целлюлозы, но этот процесс оказался слишком длительным и трудоемким, что делало его непрактичным для массовых обследований или большого количества образцов. Подобные проблемы с эффективностью возникали и при использовании других методов, таких как изоэлектрическое фокусирование (IEF) и сканирующая денситометрия. Эти два метода разделяют белки на основе их изоэлектрической точки. Хроматография, еще один распространенный метод, показала свою надежность в диагностике носителей гена бета-талассемии. Однако этот метод также был длительным и неэффективным при работе с большим количеством образцов. Среди различных методов наиболее точным для измерения HbA2 является ВЭЖХ. Это надежная техника, поскольку она позволяет точно определять уровни HbA2, HbF и различных вариантов Hb. К этим вариантам Hb относятся: HbS, HbE, Hb Lepore, HbC, HbD и HbO Arab. Существует несколько факторов, которые могут приводить к неточному количественному определению HbA2. К ним относятся дефекты колонки, межпартийные различия, концентрация образцов, разведение, расхождения при калибровке и общее состояние образцов.