Периферические мононуклеарные клетки крови: состав, выделение и применение.
Peripheral blood mononuclear cell
Периферические мононуклеарные клетки (PBMC): лимфоциты, моноциты, дендритные клетки. Выделение из крови фиколлом и центрифугированием. Важно для исследований!
Сравнивайте с английским: нажмите на абзац — оригинал откроется в окне. Кнопка EN под абзацем показывает его прямо в тексте.
Введение
Кровь в кровеносной системе с круглым ядром
Blood in circulatory system with round nucleus
Мононуклеарная клетка периферической крови (PBMC) – это любая клетка периферической крови, имеющая округлое ядро. Эти клетки состоят из лимфоцитов (Т-клеток, В-клеток, NK-клеток) и моноцитов, в то время как эритроциты и тромбоциты не имеют ядер, а гранулоциты (нейтрофилы, базофилы и эозинофилы) имеют многодольные ядра. У человека лимфоциты составляют основную часть популяции PBMC, за ними следуют моноциты и лишь небольшой процент дендритных клеток. Эти клетки можно выделить из цельной крови с использованием фиколла – гидрофильного полисахарида, который разделяет слои крови, – и градиентного центрифугирования, которое разделяет кровь на верхний слой плазмы, затем слой PBMC (буффи-кожух) и нижнюю фракцию полиморфноядерных клеток (таких как нейтрофилы и эозинофилы) и эритроцитов. Полиморфноядерные клетки можно дополнительно изолировать путем лизиса эритроцитов. Базофилы иногда обнаруживаются как в более плотных, так и в фракциях PBMC. Инфекции, такие как Ureaplasma parvum и urealiticum, Mycoplasma genitalium и hominis, а также Chlamydia trachomatis, могут быть связаны с этими клетками. PBMC также могут быть восприимчивы к вирусным инфекциям. Фактически, следы полиомавируса JC и полиомавируса клеток Меркель были обнаружены в PBMC беременных женщин и женщин, перенесших спонтанный аборт.
A peripheral blood mononuclear cell (PBMC) is any peripheral blood cell having a round nucleus. These cells consist of lymphocytes (T cells, B cells, NK cells) and monocytes, whereas erythrocytes and platelets have no nuclei, and granulocytes (neutrophils, basophils, and eosinophils) have multi lobed nuclei. In humans, lymphocytes make up the majority of the PBMC population, followed by monocytes, and only a small percentage of dendritic cells. These cells can be extracted from whole blood using ficoll, a hydrophilic polysaccharide that separates layers of blood, and gradient centrifugation, which will separate the blood into a top layer of plasma, followed by a layer of PBMCs (buffy coat) and a bottom fraction of polymorphonuclear cells (such as neutrophils and eosinophils) and erythrocytes. The polymorphonuclear cells can be further isolated by lysing the red blood cells. Basophils are sometimes found in both the denser and the PBMC fractions. such as Ureaplasma parvum and urealiticum, Mycoplasma genitalium and hominis and Chlamydia trachomatis infections. PBMCs may be also susceptible to viral infections. Indeed, footprints of JC polyomavirus and Merkel cell polyomavirus have been detected in PBMCs from pregnant women and women affected by spontaneous abortion.
Исследовательские цели
Многие ученые, проводящие исследования в области иммунологии (включая аутоиммунные заболевания), инфекционных болезней, гематологических злокачественных новообразований, разработки вакцин, трансплантационной иммунологии и высокопроизводительного скрининга, часто используют ПБМК. Во многих случаях ПБМК получают из банков крови. Фракция ПБМК также содержит популяции прогениторных клеток, что подтверждается методами культивирования колоний в метилцеллюлозе. ПБМК рассматриваются как важный путь введения вакцин. ПБМК у пациентов с раком могут быть выделены и культивированы in vitro. Затем ПБМК подвергаются воздействию опухолевых антигенов, таких как антиген опухолевых стволовых клеток. Для облегчения поглощения и распознавания антигена ПБМК обычно добавляют воспалительные цитокины.
Many scientists conducting research in the fields of immunology (including auto immune disorders), infectious disease, hematological malignancies, vaccine development, transplant immunology, and high throughput screening are frequent users of PBMCs. In many cases, PBMCs are derived from blood banks. PBMC fraction also contains progenitor populations, as demonstrated by methylcellulose based colony forming assays. PBMCs have been thought to be an important route of vaccination. PBMCs from cancer patients can be extracted and cultured in vitro. Subsequently, PBMCs are challenged with tumor antigens such as tumor stem cell antigen. Inflammatory cytokines are usually added to aid in antigen uptake and recognition by PBMCs.