Бычий сывороточный альбумин: свойства и применение
Bovine serum albumin
Бычий сывороточный альбумин (BSA, Фракция V) – стандарт для лабораторных экспериментов. Получают из коровьей сыворотки методом Коуна. Описание и применение.
Сравнивайте с английским: нажмите на абзац — оригинал откроется в окне. Кнопка EN под абзацем показывает его прямо в тексте.
Введение
Белок сывороточного альбумина, полученный из коров, альбумин, специфичный для коров.
Serum albumin protein derived from cows
albumin specific to cows
Бычий сывороточный альбумин (BSA или "Фракция V") – это белок сывороточного альбумина, получаемый из коров. Он часто используется в качестве стандарта концентрации белка в лабораторных экспериментах. Название "Фракция V" происходит от того, что альбумин является пятой фракцией в оригинальной методике очистки Эдвина Кона, основанной на различиях в растворимости белков плазмы. Манипулируя концентрацией растворителя, pH, уровнем соли и температурой, Кон смог последовательно выделять "фракции" из плазмы крови. Этот процесс был впервые коммерциализирован для производства альбумина человека для медицинского применения, а затем адаптирован для производства BSA.
Bovine serum albumin (BSA or "Fraction V") is a serum albumin protein derived from cows. It is often used as a protein concentration standard in lab experiments. The nickname "Fraction V" refers to albumin being the fifth fraction of the original Edwin Cohn purification methodology that made use of differential solubility characteristics of plasma proteins. By manipulating solvent concentrations, pH, salt levels, and temperature, Cohn was able to pull out successive "fractions" of blood plasma. The process was first commercialized with human albumin for medical use and later adopted for production of BSA.
Приложения
BSA часто используется в качестве модели для других белков сывороточного альбумина, особенно для альбумина человеческой сыворотки, с которым он структурно гомологичен на 76%. BSA имеет множество биохимических применений, включая ELISA (Enzyme Linked Immunosorbent Assay), иммуноблоты и иммуногистохимию. Поскольку BSA – это небольшой, стабильный и умеренно нереактивный белок, он часто используется в качестве блокатора в иммуногистохимии. В ходе иммуногистохимии, метода, использующего антитела для идентификации антигенов в клетках, срезы тканей часто инкубируют с BSA-блокаторами для связывания неспецифических участков связывания. Это связывание BSA с неспецифическими участками связывания повышает вероятность того, что антитела свяжутся только с интересующими антигенами. BSA-блокатор улучшает чувствительность, снижая фоновый шум, поскольку эти участки покрыты умеренно нереактивным белком. В этом процессе минимизация неспецифического связывания антител необходима для достижения максимального отношения сигнал/шум. Этот белок не влияет на другие ферменты, которым он не требуется для стабилизации. BSA также часто используется для определения количества других белков путем сравнения неизвестного количества белка с известными количествами BSA (см. белковый анализ Брэдфорда). BSA используется благодаря его способности усиливать сигнал в анализах, отсутствию влияния на многие биохимические реакции и низкой стоимости, поскольку большие его количества можно легко получить из говяжьей крови – побочного продукта мясной промышленности. Другое применение BSA заключается в его использовании для временной изоляции веществ, блокирующих активность необходимого фермента, тем самым подавляя полимеразную цепную реакцию (ПЦР). BSA широко используется в качестве матрицы для синтеза наноструктур и определения токсического или полезного воздействия ионов металлов и их комплексов. BSA также является основным компонентом фетальной бычьей сыворотки – распространенной среды для культивирования клеток.
BSA is often used a model for other serum albumin proteins, especially human serum albumin, to which it is 76% structurally homologous. BSA has numerous biochemical applications including ELISAs (Enzyme Linked Immunosorbent Assay), immunoblots, and immunohistochemistry. Because BSA is a small, stable, moderately non reactive protein, it is often used as a blocker in immunohistochemistry. During immunohistochemistry, which is the process that uses antibodies to identify antigens in cells, tissue sections are often incubated with BSA blockers to bind nonspecific binding sites. This binding of BSA to nonspecific binding sites increases the chance that the antibodies will bind only to the antigens of interest. The BSA blocker improves sensitivity by decreasing background noise as the sites are covered with the moderately non reactive protein. During this process, minimization of nonspecific binding of antibodies is essential in order to acquire the highest signal to noise ratio. This protein does not affect other enzymes that do not need it for stabilization. BSA is also commonly used to determine the quantity of other proteins, by comparing an unknown quantity of protein to known amounts of BSA (see Bradford protein assay). BSA is used because of its ability to increase signal in assays, its lack of effect in many biochemical reactions, and its low cost, since large quantities of it can be readily purified from bovine blood, a byproduct of the cattle industry. Another use for BSA is that it can be used to temporarily isolate substances that are blocking the activity of the enzyme that is needed, thus impeding polymerase chain reaction (PCR). BSA has been widely used as a template to synthesize nanostructures and determining the toxic or beneficial effects of metal ions and their complexes. BSA is also the main constituent of fetal bovine serum, a common cell culture medium.